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WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

配方中加入温度低于 42℃ 的条件下活性会受到抑制的可逆结合核酸适配体，来源于古生球菌属（Archaeoglobus fulgidus）的 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）可在温度 > 42℃ 的条件下高效催化含尿嘧啶的单链或双链 DNA 释放游离尿嘧啶。

图 1：WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）在温度低于 42℃ 的条件下未检测到活性。

WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG） |
（A）Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）（NEB #M0279）和 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）（NEB #M1282）的 UDG 活性温度曲线比较表明，在温度低于 42℃ 的条件下，WarmStart 的 UDG 活性会受到抑制。将 0.002 U 的 Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）或 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）与 1.8 pmol 荧光标记的且含一个尿嘧啶碱基的 47 mer 单链 DNA 寡核苷酸在不同温度（25 – 65℃）温育 30 分钟，测得 UDG 活性。尿嘧啶切除后，对生成的脱碱基位点进行化学切割（1M NaOH，85℃，10 分钟），然后在 Applied Biosystems 3730xl 基因分析仪（96 通道）上进行毛细管电泳（CE）片段分析。结果表明，虽然 WarmStart 版本的 Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）在 65℃ 时表现出与 Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶相似的活性，但 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）在 25℃ 时未检测到活性。

（B）低温范围（30 – 45℃）内且存在 dUTP 的情况下，使用 WarmStart Afu尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）（上图）、Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）（中图）或不使用 UDG（下图），对 Lambda DNA 的 500 bp 扩增子进行链置换扩增（SDA）。在不使用 UDG 的情况下，SDA 在整个温度范围内产生了一条 500 bp 的条带（下图），但温度 > 31℃ 时，SDA 受到 Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）的完全抑制（中图）。抑制扩增子生成的原因是尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）在低温下的固有活性，它会在含 dU 的扩增子中生成脱碱基位点，从而阻止其进一步扩增。然而，WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）的存在（上图）对含 dU 扩增子的扩增几乎没有影响，只是在 45℃ 左右时产物产量略有下降，这表明 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）在温度 > 42℃ 的条件下具有活性。

图 2：WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）可在 65℃ 时高效酶切含尿嘧啶的扩增产物。

WarmStart® Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG） |

 
（A）使用 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）避免 SDA 扩增后交叉污染的示意图。在不含 UDG 或含有 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）且 dUTP 存在的情况下，在 34℃ 时扩增 500 bp 扩增子，该情况下 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）无活性。SDA 后，将反应在 65℃ 温育 20 分钟，以便在先前引入的 dU 所在位置生成脱碱基位点。然后，在碱性条件下于 85℃ 温育 10 分钟，切割脱碱基位点的 DNA 骨架。

（B）在 65℃ 扩增和处理 20 分钟后，凝胶电泳观察显示，不含 UDG 和含有 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）的样品都有相似的 500 bp 扩增产物产量。然后，在碱性条件下于 85℃ 温育 10 分钟，切割脱碱基位点的 DNA 骨架。化学切割后，在不含 UDG 的反应中，500 bp 产物保持完整，但在含有 WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）的反应中，500 bp 产物的条带较弱且产物呈弥散状。

产品类别:
DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M1282S     -20    
        WarmStart® Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG) M1282SVIAL -20 1 x 0.1 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® II (Mg-free) Reaction Buffer B9005SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 1X Thermopol II 缓冲液中，65℃ 条件下，当总反应体积为 50 µl 时，在 30 分钟内，每分钟释放 60 pmol 荧光标记的且含一个尿嘧啶碱基的 47 mer 单链 DNA 寡核苷酸所需的酶量。

    反应条件

    1X ThermoPol® II（不含 Mg2+）反应缓冲液
    Incubate at 65°C

    1X ThermoPol® II（不含 Mg2+）反应缓冲液
    20 mM Tris-HCl
    10 mM (NH4)2SO4
    10 mM KCl
    0.1% Triton® X-100
    (pH 8.8 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    0.1 mg/ml Recombinant Albumin
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    分子量

    理论上的: 22717 道尔顿

  • 相关产品

    相关产品

    • WarmStart® Nt.BstNBI
    • m0538-bst-20-warmstart-dna-polymerase

    单独销售的组分

    • ThermoPol® II (Mg-free) Reaction Buffer Pack

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for WarmStart Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG) (NEB #M1282)

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Activities of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
    • DNA Repair Enzymes on Damaged and Non-standard Bases
    • Properties of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the activity of WarmStart Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG) in NEBuffers?
    2. Will WarmStart Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG) work in Thermopol® Buffer?
    3. What is the molecular weight of WarmStart Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG)?
    4. Is WarmStart Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG) a tagged protein?
    5. Does the Uracil Glycosylase inhibitor (UGI) inhibit WarmStart Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG)?
    6. Does WarmStart Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG) release uracil from ss and dsDNA?
    7. Does WarmStart Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG) cut RNA?
    8. Will WarmStart Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG) work in Fpg buffer?
    9. What does WarmStart mean?
    10. How can WarmStart Afu Uracil-DNA Glycosylase (UDG) be used for carryover prevention?
    11. What is Strand Displacement Amplification (SDA)?

WarmStart® RTx Reverse Transcriptase (Glycerol-free) |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

WarmStart RTx Reverse Transcriptase (Glycerol-free) is formulated without glycerol to support lyophilization, incorporation into microfluidic devices, and enable quick adoption into automation workflows.

WarmStart RTx Reverse Transcriptase is a unique in silico-designed RNA-directed DNA polymerase coupled with a reversibly-bound aptamer that inhibits RTx activity below 40°C. This enzyme can synthesize a complementary DNA strand initiating from a primer using RNA (cDNA synthesis) or single-stranded DNA as a template. RTx is a robust enzyme for RNA detection in amplification reactions and is particularly well suited for use in LAMP (Loop-mediated Isothermal Amplification). The WarmStart property enables high throughput applications, room temperature setup, and increases the consistency and specificity of amplification reactions. RTx contains intact RNase H activity.

WarmStart RTx Reverse Transcriptase (Glycerol-free) offers the same robust detection of human RNA targets in RT-LAMP assays as the glycerol-containing enzyme.

WarmStart® RTx Reverse Transcriptase (Glycerol-free) |

RT-LAMP (RNA targets) experiments were performed with NEB #M0380: WarmStart RTx Reverse Transcriptase and NEB #M0538: Bst 2.0 WarmStart DNA Polymerase, or NEB #M0439: WarmStart RTx Reverse Transcriptase (Glycerol-free) and NEB #M0402: Bst 2.0 WarmStart DNA Polymerase (Glycerol-free). Reactions containing 1X LAMP primers and 0.5X LAMP Fluorescent dye were set up in quadruplicate over three logs of total Jurkat RNA (10 ng to 0.1 ng) in 96-well, 25 µl reactions. Control reactions without template (NTC) were also evaluated. Reactions were incubated at 65°C for 40 minutes and fluorescence was monitored every 15 seconds in the SYBR/FAM channel of a real-time thermocycler (Bio-Rad® CFX96). Each dot represents the time at which the fluorescence signal for a single reaction crosses the instrument-defined threshold. All four replicates were detected at each template input unless otherwise indicated (note that dots frequently overlap given similar detection time for the replicates). Overall, similar performance was observed for both glycerol-containing (NEB #M0538 and NEB #M0380) and glycerol-free (NEB #M0402: and NEB #M0439) enzymes at each template input. No amplification was observed in any of the no template control reactions.

产品类别:
Isothermal Amplification & Strand Displacement Products,
cDNA Synthesis & Reverse Transcriptases Products,
PCR, qPCR & Amplification Technologies Products

应用:
Loop-Mediated Isothermal Amplification,
DNA Amplification, PCR & qPCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0439L     -80    
        WarmStart® RTx Reverse Transcriptase (Glycerol-free) M0439LVIAL -80 1 x 0.027 ml 75,000 units/ml
        10X Isothermal Amplification Buffer (Lyo-compatible) B1714SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Typical RT-LAMP Protocol (NEB #M0439)
    2. Typical cDNA Synthesis Protocol with WarmStart® RTx Reverse Transcriptase (Glycerol-free) (NEB #M0439)

工具 & 资源

  • Web 工具

    • NEB LAMP Primer Design Tool

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is LAMP and RT-LAMP?
    2. What advantages does WarmStart® RTx provide?
    3. How sensitive is RNA amplification with WarmStart® RTx?
    4. Can WarmStart® RTx be inactivated?
    5. Is WarmStart® RTx active in other buffers?
    6. What is the maximum length of cDNA product produced by WarmStart® RTx?
    7. Does WarmStart® RTx have RNase H activity?
    8. Can DNA be used as a template for WarmStart® RTx?
    9. What are Hot Start and WarmStart® polymerases and when would I use them?
    10. What is the difference between buffers B1714: 10X Isothermal Amplification Buffer (Lyo-compatible) and B0537: 10X Isothermal Amplification Buffer?
    11. What is the Mg2+ concentration in the 10X Isothermal Amplification Buffer (Lyo-compatible)?
    12. Does B1714: 10X Isothermal Amplification Buffer (Lyo-compatible) include any excipients?
    13. Can WarmStart® RTx Reverse Transcriptase (Glycerol-free) at 75,000 U/mL be diluted prior to use?
    14. How many Freeze/Thaw cycles can WarmStart® RTx Reverse Transcriptase (Glycerol-free) tolerate?

质控、安全 & 法规

  • 质控分析

    每一新批次的 NEB 产品都要经过质控，以满足指定的质量标准，对特定产品的质量标准和每一批次的检测数据可以通过产品说明表格、COA、产品信息卡或者产品手册进行查阅或下载。关于 NEB 产品质控的详细信息，可从此处查阅。

  • 产品说明与变更通知

    产品说明表包含产品的储存温度、有效期和规格，这些文件的命名规则如下：[货号]_[规格]_[版本]

    • M0439L_v1

  • CoA 文件包含单个批次产品的储存温度、有效期和质控，这些文件的命名规则如下： [货号]_[规格]_[版本]_[Lot#]

    • M0439L_v1_10225699

WarmStart® LAMP 变色预混液，含 UDG |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

含 UDG 的 WarmStart® LAMP 变色预混液是由 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart® RTx 反转录酶在特殊的低缓冲力反应溶液中优化形成，该溶液包含可视化的 pH 指示剂，使检测 LAMP 和 RT-LAMP 的结果判定更加简单、快捷。预混液中包含的 dUTP 和 UDG 可有效减少反应间的残留污染。 

该系统提供了一种快速、清晰可视化的扩增检测方案，其原理为 DNA 聚合酶在 LAMP 扩增反应中产生大量质子，引发 pH 值的下降，从而使反应液颜色从粉红色变为黄色（如需了解 LAMP 概述和引物设计，请观看 NEB 网站相关视频）。该预混液即可用于 LAMP 也可用于 RT-LAMP 反应，仅需加热装置及样品，即可在 15-40 分钟内肉眼判定阳性结果。

简单可视化的扩增检测

WarmStart® LAMP 变色预混液，含 UDG |

阴性结果显示粉红色，阳性结果显示变为黄色
产品类别:
Isothermal Amplification & Strand Displacement Products,
PCR, qPCR & Amplification Technologies Products

应用:
Loop-Mediated Isothermal Amplification,
Isothermal Amplification,
DNA Amplification, PCR & qPCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M1804S     -20    
        WarmStart® Colorimetric LAMP 2X Master Mix with UDG M1804SVIAL -20 1 x 1.32 ml 2 X
    • M1804L     -20    
        WarmStart® Colorimetric LAMP 2X Master Mix with UDG M1804SVIAL -20 5 x 1.32 ml 2 X

  • 优势和特性

    应用特性

    • LAMP amplification of RNA and DNA targets
    • Simple visual indication of amplification for easy detection and analysis
    • UDG and dUTP included in master mix for carryover prevention 
     

  • 相关产品

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    • 等温扩增缓冲液套装
    • e1700-warmstart-lamp-kit-dna-rna
    • m0380-warmstart-rtx-reverse-transcriptase

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. WarmStart Colorimetric LAMP 2X Master Mix with UDG Typical LAMP Protocol (NEB #M1804)

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart

  • Web 工具

    • NEB LAMP Primer Design Tool

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the difference between using Colorimetric LAMP and regular LAMP reactions?
    2. How long should I incubate the Colorimetric LAMP reaction before checking the results?
    3. What buffer should I use for my target samples and primers going into the colorimetric LAMP reaction?
    4. What is the Mg++ concentration in the Colorimetric LAMP 2X Master Mix? 
    5. Can the Colorimetric LAMP 2X Master Mix be used in instruments that utilize fluorescent detection of DNA amplification or real time turbidity measurement?
    6. How stable are the WarmStart Colorimetric LAMP 2X Master Mixes?
    7. How do I design LAMP Primers?
    8. The WarmStart LAMP Master Mix has some precipitation in the tube after thawing, is this normal?
    9. What is the difference between the WarmStart® Colorimetric LAMP 2X Master Mix with UDG (NEB #M1804) and the WarmStart Colorimetric LAMP 2X Master Mix (DNA & RNA) (NEB #M1800)?
    10. What if my colorimetric LAMP mix is orange instead of pink prior to amplification?
    11. Does the WarmStart® Colorimetric LAMP Master Mix with UDG enable carryover prevention/contamination reduction?
    12. How much sample can be added to the colorimetric LAMP reaction as input?
    13. Can I monitor the color change of the colorimetric LAMP reactions using a spectrophotometer?
    14. What components are contained in the WarmStart® Colorimetric LAMP Master Mix with UDG and what else I need to perform a LAMP reaction?
    15. Can the WarmStart Colorimetric LAMP 2X Master Mixes be used in instruments that utilize fluorescence detection?
    16. What is the optimal LAMP/RT-LAMP amplification temperature?
    17. How fast should I expect a result?
    18. Can I set up my LAMP/RT-LAMP reactions at room temperature?
    19. Amplification occurred in my NTC sample(s) following isothermal incubation. What happened?
    20. Is a separate incubation step required for RT-LAMP?
    21. Should I use Guanidine HCl (B2619A) in colorimetric LAMP reactions?
    22. Does NEB have a master mix for LAMP or RT-LAMP reactions?
    23. What is LAMP and RT-LAMP?
    24. What type of purification is recommended for LAMP primers?

WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）为 LAMP/RT-LAMP 提供了便捷的一步法解决方案，适用于 DNA 或 RNA 样品。LAMP 和 RT-LAMP 是一种常用等温扩增技术，通过使用 LAMP 特异性引物（用户自备）和链置换 DNA 聚合酶进行靶标核酸的快速检测。该预混液是在优化后 LAMP 缓冲液中混入了 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶均经过基因工程改造，提高了在 LAMP 和 RT-LAMP 反应中的性能。WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）具备完全缓冲力，可兼容不同样品类型，适用于多种检测方法，包括：浊度检测、实时荧光检测（使用 LAMP 荧光染料时）和终点可视化检测，例如：基于金属离子指示剂的变色检测（羟基萘酚蓝）

由于先前扩增的产物会无意中成为后续反应的底物造成污染，因此预混液中的 dUTP 和热敏 UDG 可有效降低交叉污染风险。热敏 UDG 在温度高于 50℃ 时可完全失活，因此对反应没有影响。

 

图 1：WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）适用于多种检测方法

WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG） |

使用 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）（NEB #M1708）对靶标 RNA 或 DNA 扩增，可通过多种实时（A）和终点（B）检测方法进行结果判定。这些检测方式包括荧光法、不基于 pH 的变色法（例如：羟基萘酚蓝）、浊度法或琼脂糖凝胶电泳。对于实时荧光检测，可使用包含 50X LAMP 荧光染料的试剂盒（NEB #E1708），在常规实时 PCR 仪器的 SYBR®/FAM 通道中进行监测。

图 2：LAMP/RT-LAMP 预混液和适用样品类型

WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG） |

NEB 基于 pH 变化的 WarmStart 变色 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含/不含 UDG）（NEB #M1804）（NEB# M1800）缓冲力低，因此可使用 pH 敏感染料进行可视化扩增检测。基于 pH 值改变而产生的颜色变化（如粉红变黄色）所需缓冲力要低，高缓冲力样品或酸性样品可能会影响颜色变化，因此，这种方法限制了检测样品的种类。WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG，NEB #M1708、NEB #E1708；不含 UDG，NEB #E1700）具备完全缓冲力，可检测这些样品类型，适用于多种检测方法，包括荧光或其它变色染料（例如：羟基萘酚蓝）。

图 3：WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）可对人 DNA 和 RNA 靶标进行稳健检测

WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG） |

使用 NEB #M1700 进行 RT-LAMP（RNA 靶标）或 LAMP（DNA 靶标）实验：WarmStart LAMP 2X 预混液是 NEB #E1700 试剂盒（不含 dUTP/UDG）中的预混液和 NEB #M1708：WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）。反应加入 1X LAMP 引物和 1X LAMP 荧光染料后，分别加入三个数量级的总 Jurkat RNA 或 Jurkat DNA（10 ng – 0.1 ng），每个样品做 4 个重复，反应体系为 25 µl。同时设置了无模板的对照反应（NTC）。置于 96 孔板中 65℃ 温育 40 分钟，使用实时热循环仪（Bio-Rad® CFX96）中的 SYBR/FAM 通道进行 15 秒一次的荧光检测。每个点代表单个反应的荧光信号超过仪器阈值的时间。除了个别说明外，每个样品都检测到所有四个重复（注：如果各重复的检测时间相似，则检测点重叠）。总体而言，各样品检测结果显示：NEB #M1700 和 NEB #M1708 性能一致。无模板对照均无扩增。

图 4：WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）与自动化反应装置兼容

WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG） |

通过手动或 TEMPEST® 自动化液体处理工作站（96 孔板，25 µl 反应体系）建立针对合成 SARS-CoV-2 RNA 样品的 LAMP 检测体系。检测样品为：阳性样品（人总 RNA 混入 5,000、500 或 50 拷贝的合成 SARS-CoV-2 RNA）或无模板对照（NTC），如图所示。经 65℃ 温育 40 分钟，使用 1X LAMP 荧光染料在实时荧光仪器（Bio-Rad CFX96）中的 SYBR/FAM 通道检测。结果显示：两种体系的检测时间和最低检出限（LOD）结果一致。

图 5：WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）兼容不基于 pH 的变色检测法（例如：羟基萘酚蓝）

WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG） |

使用 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）和针对 N 和 E 基因的混合引物对合成 SARS-CoV-2 RNA 进行扩增，使用 0.12 mM 羟基萘酚蓝作为变色金属指示剂。测定样品为：阳性样品（人总 RNA 混入 5,000、500 或 50 拷贝的合成 SARS-CoV-2 RNA）、阴性样本（人总 RNA）或无模板对照（NTC），如图所示。反应体系（25 µl）经 65℃ 温育 45 分钟后，进行肉眼检测。

A.所有阳性样品均显示阳性结果，包括在所有仅含 50 拷贝的低起始量样品（n = 20），颜色明显从紫色变为蓝色。

B.所有阴性样品的大量重复均未出现颜色变化（n = 32）。

产品类别:
Isothermal Amplification & Strand Displacement Products,
Master Mixes Products

应用:
Loop-Mediated Isothermal Amplification

  • 试剂盒组成

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M1708S     -20    
        WarmStart® Multi-Purpose LAMP/RT-LAMP 2X Master Mix (with UDG) M1708SVIAL -20 1 x 1.25 ml 2 X
    • M1708L     -20    
        WarmStart® Multi-Purpose LAMP/RT-LAMP 2X Master Mix (with UDG) M1708SVIAL -20 5 x 1.25 ml 2 X

  • 特性和用法

    需要但不提供的材料

    LAMP 引物（我们推荐使用 NEB LAMP Primer Design Tool）
    靶标核酸样品
    分子生物学级 H2O
    加热块、水浴、实时浊度计或热循环仪（可按需进行实时荧光测量）和适合仪器的反应容器
     

  • 相关产品

    相关产品

    • WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒（含 UDG）
    • LAMP 荧光染料
    • m0538-bst-20-warmstart-dna-polymerase
    • m0380-warmstart-rtx-reverse-transcriptase

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. WarmStart® Multi-Purpose LAMP/RT-LAMP 2X Master Mix (with UDG) Protocol (NEB #M1708)

  • 应用实例

    • Optimizing rapid isothermal workflow for SARS-CoV-2 with WarmStart® LAMP with UDG

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the optimal LAMP/RT-LAMP amplification temperature?
    2. What is the Mg++ concentration in the WarmStart LAMP/RT-LAMP Master Mix?
    3. What types of input samples/materials are compatible with the LAMP/RT-LAMP mixes?
    4. How fast should I expect a result?
    5. Can I set up my LAMP/RT-LAMP reactions at room temperature?
    6. The WarmStart LAMP Master Mix has some precipitation in the tube after thawing, is this normal?
    7. How do I design LAMP Primers?
    8. Does the WarmStart LAMP/RT-LAMP 2X Master Mix (with UDG) enable carryover prevention/contamination reduction?
    9. Amplification occurred in my NTC sample(s) following isothermal incubation. What happened?
    10. What detection methods can be used for LAMP/RT-LAMP experiments?
    11. What are the advantages of using standard LAMP (NEB #E1700, M1708, E1708) over pH-based colorimetric LAMP (NEB #M1800, M1804)?
    12. Is a separate incubation step required for RT-LAMP?
    13. What type of purification is recommended for LAMP primers?

质控、安全 & 法规

  • 质控分析

    每一新批次的 NEB 产品都要经过质控，以满足指定的质量标准，对特定产品的质量标准和每一批次的检测数据可以通过产品说明表格、COA、产品信息卡或者产品手册进行查阅或下载。关于 NEB 产品质控的详细信息，可从此处查阅。

  • 产品说明与变更通知

    产品说明表包含产品的储存温度、有效期和规格，这些文件的命名规则如下：[货号]_[规格]_[版本]

    • E1708S_L_v1
    • M1708S_L_v1
    • M1708S_L_v2

  • CoA 文件包含单个批次产品的储存温度、有效期和质控，这些文件的命名规则如下： [货号]_[规格]_[版本]_[Lot#]

    • M1708L_v1_10114262
    • M1708S_v1_10114146
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    • WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）

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    SomaLogic 公司已向 NEB 公司授权可将核酸适配体与嗜热 DNA 聚合酶和反转录酶联合使用的独家许可。NEB 公司授予买方/用户非独家许可，即 WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）仅供研究使用（RUO）。要将本产品用于商业用途，需另外征得 NEB 公司的授权。如需了解更多信息或咨询商业用途，请联系 [email protected]。