上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
产品信息
CLIP-tag 蛋白标记系统能将目标蛋白以共价结合的形式，特异性地标记上任何分子。CLIP-tag 是一种基于人 O6-烷基鸟嘌呤-DNA-烷基转移酶（O6-alkylguanine-DNA-alkyltransferase，hAGT）的蛋白。CLIP-tag 的底物是苄基胞嘧啶（benzylcytosine，BC）的衍生物。在标记反应中，底物的苄基部分被替换，与 CLIP-tag 的活性半胱氨酸共价结合，形成稳定的硫醚键。尽管 CLIP-tag 与 SNAP-tag® 基于相同的蛋白，苄基胞嘧啶底物是一类独立的底物，和 SNAP-tag 所识别的苄基鸟嘌呤底物不同。CLIP-tag 和 SNAP-tag 可同时用于同一细胞中两种蛋白的正交和互补标记。
该体系包括两个步骤：亚克隆并表达与 CLIP-tag 融合的目的蛋白；选择 CLIP-tag 底物进行标记融合蛋白。在随 CLIP-tag 质粒提供的产品说明中描述了 CLIP-tag 融合蛋白的表达。介绍了利用 CLIP-tag 底物标记融合蛋白的方法。
- 产品类别:
- CLIP-tag™ Substrates Products,
- Protein Labeling Products
- 应用:
- CLIP Cell,
- CLIP Surface,
- Pulse Chase,
- In vivo Imaging,
- Receptor Internalization,
- Protein Localization,
Protein Labeling Snap Clip
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产品组分信息
本产品提供以下试剂或组分：
NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度 -
S9219S -20 CLIP-Cell™ TMR-Star S9219SVIAL -20 1 x 30 nmol Not Applicable
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特性和用法
需要但不提供的材料
- 表达 CLIP-tag 融合蛋白的细胞
- 组织培养材料和培养基
- 转染试剂
- 荧光显微镜及适用的滤光装置
- DMSO
激发
554nm
发射
580nm
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注意事项
- 贮存条件：CLIP-Cel TMR-Star 应避光贮存于 -20℃（长期贮存）或 4℃（短期贮存，少于 4 周）。底物应避光和避免受潮。如果妥善贮存于 -20℃，干燥贮存的底物至少可保持三年稳定，溶解在 DMSO 中时至少可保持三个月稳定。
操作说明、说明书 & 用法
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操作说明
- Labeling of Proteins in vitro (S9219)
- Cellular Labeling (S9219)
- View the video “Fluorescent Labeling of COS-7 Expressing SNAP-tag Fusion Proteins for Live Cell Imaging” in the Journal of Visualized Experiments (JoVE)
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应用实例
- Simultaneous Fluorescent Labeling of Proteins in Living Cells
工具 & 资源
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选择指南
- Comparison of SNAP-tag®/CLIP-tag™ Technologies to GFP
- SNAP-tag® and CLIP-tag™ Substrate Selection Chart
FAQs & 问题解决指南
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FAQs
- Cellular Imaging and Analysis FAQs
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问题解决指南
- Labeling with SNAP-tag® Technology Troubleshooting Guide
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实验技巧
添加 DMSO 后，使用移液枪吸打混匀至少 10-20 次，然后剧烈涡旋至少 1 分钟，以确保底物完全溶解。
在完全培养基中稀释底物后，使用移液枪吸打混匀至少 10 次，有助于降低背景。
增加底物浓度和/或反应时间通常会导致背景较高，并且不一定会增加信噪比（SNR）。
