上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
产品信息
产品来源
大肠杆菌中过表达,克隆自海栖热袍菌(Thermotoga maritima)。
- 产品类别:
- DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases Products
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产品组分信息
本产品提供以下试剂或组分:
NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度 -
M0291S -20 Tma Endonuclease III M0291SVIAL -20 1 x 0.05 ml 10,000 units/ml ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
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特性和用法
单位定义
1 单位指在 10 µl 反应体系中,65℃ 条件下,1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 60 bp 寡核苷酸双链所需的酶量。
* AP 位点创建方法:37℃ 条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 60 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
反应条件
1X ThermoPol® 反应缓冲液套装
Incubate at 65°C1X ThermoPol® 反应缓冲液套装
20 mM Tris-HCl
10 mM (NH4)2SO4
10 mM KCl
2 mM MgSO4
0.1% Triton® X-100
(pH 8.8 @ 25°C)使用浓度
10,000 units/ml
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
100 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
50% Glycerol
0.1% Triton® X-100
pH 7.4 @ 25°C热失活
否
单位活性检测条件
10 µl 总反应体系,含 1X ThermoPol 反应缓冲液和 5 pmol 荧光标记寡核苷酸双链。
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优势和特性
应用特性
- 碱洗脱(3)
- 碱解旋(4)
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相关产品
单独销售的组分
- ThermoPol® 反应缓冲液套装
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注意事项
- 将反应体系置于热循环仪中,或用矿物油覆盖,以减少蒸发。
- Tma 核酸内切酶 III 在 ThermoPol® II(不含 Mg2+)反应缓冲液(NEB #B9005)中的活性为 75%。
- Tma 核酸内切酶 III 在 NEBuffer 1(NEB #B7001)中的活性为 100%,在 NEBuffer 4(NEB #B7004)中的活性为 100%,在 NEBuffer 2(NEB #B7002)中的活性为 50%。不建议在 NEBuffer 3(NEB #B7003)中使用 Tma 核酸内切酶 III。
- 稀释液兼容性:稀释液 D:
100 mM KCl、10 mM Tris-HCl(pH 7.4 @ 25℃)、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1% Triton X-100 和 50% 甘油。
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参考文献
- Nelson, K.E. et al. (1999). Nature. 399,
- Marks, K. unpublished observation.
- Pflaum, M. et al. (1998). FreeRad. Res. 29,
- Hartwig, A. et al. (1996). Toxicol. Lett. 88,
操作说明、说明书 & 用法
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操作说明
- Protocol for Tma Endonuclease III (M0291)
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使用指南
- DNA Damage and PreCR
工具 & 资源
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选择指南
- Activities of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
- DNA Repair Enzymes on Damaged and Non-standard Bases
- Properties of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
FAQs & 问题解决指南
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FAQs
- What is the activity of Tma Endonuclease III in the NEBuffers 1-4?
- What is the activity of Tma Endonuclease III in ThermoPol buffer?
- What is the molecular weight of Tma Endonuclease III?
- Is Tma Endonuclease III a tagged protein?
- What substrate is used to test the Tma Endonuclease III activity?
- What types of DNA damage does Tma Endonuclease III act upon?