Tim-Fc 系列及对照蛋白（外泌体提取相关产品）

◆相关产品

Tim-Fc 系列

　　本系列是人或小鼠TIM家族（TIMD1、 TIMD3、TIMD4）的胞外域与人 IgG1 或小鼠 IgG2a 的 Fc 结构域 N 末端（包括铰链序列）融合的重组蛋白。

　　TIMD（T cell immunoglobulin and mucin domain）家族被认为在过敏、哮喘、移植耐受、自身免疫和对病毒感染的反应等免疫应答控制中发挥着重要作用。此外，有报告指出由于 TIM 免疫球蛋白可变区的特殊结构，TIMD 家族能与暴露在凋亡细胞表面的磷酯酰丝氨酸（PS）高特异性结合。

对照蛋白（人 IgG1 Fc，小鼠 IgG2a Fc）

　　本产品是只有人 IgG1 Fc 结构域或小鼠 IgG2a 结构域（包括铰链序列）的重组蛋白。在人 IgGFc 结构域融合目的嵌合蛋白活性测定或 WB 等实验中，作为对照蛋白使用。本产品是冻干品。

　　Fc（non-lytic）型，是补体（C1q）结合区，FcgR1 结合区突变，不会产生抗体依赖性细胞毒性（antibody directed cytotoxicity，ADCC）或补体依赖性细胞毒性（complement directed cytotoxicity，CDC）作用。

Tim-4 (mouse):Fc (human) (rec.) (Biotin)

Tim-4（小鼠）：Fc（人）（重组）（生物素标记）

◆产品详情

别名：TIM4，TIMD4

          T Cell Immunoglobulin and Mucin Domain-containing Protein 4；

          T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域蛋白4

产品类型：蛋白质

特性

来源/宿主： CHO 细胞

序列：小鼠 TIM-4（aa 22-279）的胞外域融合到人 IgG1 的 Fc 区的Ｎ端

交叉反应性：人，小鼠

应用

功能：

        -抑制受刺激的Ｔ细胞增殖

        -用于分离细胞外囊泡

标记：生物素标记

特异性：TIM-4 可以用于分离表面含有磷脂酰丝氨酸（PS）的不同物种（人，小鼠，大鼠等）的细胞外囊泡。

生物活性：测量其对经抗 CD3 诱导刺激人Ｔ细胞增殖能力的抑制作用。Tim-4 (mouse) : Fc (human) (rec.) （Biotin）结合磁珠可用于细胞外囊

                 泡的分离。在钙离子依存的情况下，120 ng 蛋白足够分离 1010 的细胞外囊泡颗粒。

分子量：~95kDa（SDS-PAGE）

纯度：≥95%（SDS-PAGE）

内毒素：<0.05 EU/μg 蛋白（LAL test；Lonza）

浓度：复溶后 0.1mg/mL

复溶：100 µL 灭菌水复溶

规格：溶于 PBS 中，经 0.2 μm 过滤后冻干

其他产品数据：NCBI reference NP_848874.3: Tim-4 (mouse)

运输和保存

运输：冰块

短期储存：+4℃

长期储存：-20°C

保存建议：避免反复冻融。

使用/稳定性：收到产品后可在 -20°C 稳定保存 6-12 个月。产品分装后可在 -20°C 稳定保存 3 个月。

◆产品描述

　　细胞外囊泡（EVs）由多种细胞释放到细胞微环境中，可以自发的运输或携带多种生物活性分子，如非编码 RNA、miRNA、基因组 DNA、脂质、生长因子和信号分子。EVs 可分为外泌体（30～100nm）、微囊泡（100-1000 nm）和凋亡小体（＞1000 nm）。EVs 不仅在正常生理过程的调节中起着重要作用，而且在疾病发病机制中起着重要作用，它的内含物能够反映分泌细胞的生理状态。目前正在研究和开发利用 EVs 进行治疗和诊断的方法。因此，开发理想的 EVs 分离和定量方法已经成为了一个活跃的研究领域。细胞外囊泡在其外部脂质双分子层上表达磷脂酰丝氨酸（PS）。

　　Tim-4（T cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 4）是一种单链I型膜蛋白，属于免疫球蛋白超家族和 TIM 家族。Tim-4 含有一个 Ig 样 V 型（免疫球蛋白样）结构域。它在树突细胞和巨噬细胞上表达。Tim-4 在Ｔ辅助细胞 2（Th2）的增殖中起重要作用。Tim-4 以钙离子依赖的形式与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸（PS）结合，并且介导凋亡细胞的吞噬。

　　EV 膜富含磷脂酰丝氨酸（PS），Tim-4 可以结合 EVs 表面上的 PS。华山力成教授团队开发了一种新型的亲和方法，通过将生物素亲和的 Tim-4 结合到链霉素磁珠上，在钙离子存在的情况下，进行 EVs 的分离。该方法可以用于替代目前常用的超速离心法来进行 EVs 的纯化。这种全新的 Tim-4 亲和法与其他方法相比（如超离法、PEG 沉淀法、抗体免疫沉淀法），可以获得更好的产率、纯度，以及分离多种群 EVs。

参考文献