RNA提取试剂
ISOGEN with Spin Column
ISOGEN with Spin Column 50次用量
ISOGEN with Spin Column是总RNA提取试剂ISOGEN与硅胶膜内封离心柱的组合产品。
使用ISOGEN溶解样品，通过液相分离提取RNA。去除混杂物时，使用Nippon Gene自主设计的离心柱，仅1个小时左右即可提取更高纯度的总RNA。该产品的原理（Boom technology）是在离液离子条件下，使核酸吸附于二氧化硅膜。
◆特点
• 可提取高纯度全RNA 无需酒精沉淀 从混杂物较多的植物也可提取高纯度全RNA
◆产品列表
|
ISOGEN with Spin Column （10次用量、50次用量）
|
|
产品
|
容量（10次用量）
|
容量（次用量）
|
备注
|
|
ISOGEN
|
10 mL × 1
|
50 mL × 1
|
保存于阴暗处
|
|
IsoWash I
|
9 mL × 1
|
30 mL × 1
|
可室温保存
|
|
IsoWash II
|
7 mL × 1
|
30 mL × 1
|
可室温保存
|
|
TE (pH8.0)
|
1 mL × 1
|
5 mL × 1
|
可室温保存
|
|
Spin Column
|
10瓶
|
50瓶
|
|
保存方法
冷藏保存（2～10°C）
运输方法
本品在室温下运输。产品到达后，在2~10℃条件下保存即可正常使用。
◆使用案例
操作流程
Data 1: RNA取量的基准
|
样本
|
RNA取量的基准
|
|
动物组织
|
脑
|
0.5 µg RNA/mg tissue
|
|
肝脏
|
3 µg RNA/mg tissue
|
|
肾脏
|
2 µg RNA/mg tissue
|
|
精巢
|
2 µg RNA/mg tissue
|
|
培养细胞
|
Jurkat细胞
|
4 µg RNA/1 × 106 cells
|
|
HeLa细胞
|
4 µg RNA/1 × 106 cells
|
|
植物
|
卷心菜(幼苗)
|
0.3 µg RNA/mg tissue
|
|
水稻 (叶子)
|
0.3 µg RNA/mg tissue
|
|
大豆种子
|
0.5 µg RNA/mg tissue
|
|
玉米种子
|
0.5 µg RNA/mg tissue
|
|
卷心菜种子
|
0.3 µg RNA/mg tissue
|
|
郁金香球茎
|
0.2 µg RNA/mg tissue
|
|
水稻(稻谷)
|
0.2 µg RNA/mg tissue
|
Data 2： 提取的RNA的吸光光谱与电泳结果（与旧方法比较）
按照操作步骤，从小鼠肝脏（50 mg）及冷冻粉碎后的植物样本（各25 mg）提取RNA，进行吸光色谱检测。同时使用以往的方法（ISOGEN提取后使用异丙醇沉淀纯化）进行同样的检测。
|
动物样本：小鼠肝脏
|
植物样本：郁金香球茎
|
|
|
|
▶ 根据各RNA溶液的吸光值计算出0.5 µg的RNA，使用甲醛变性琼脂糖凝胶进行电泳。
|
|
Lane 1: 小鼠肝脏（旧方法）
Lane 2: 小鼠肝脏（离心柱法）
Lane 3: 卷心菜（旧方法）
Lane 4: 卷心菜（离心柱法）
Lane 5: 郁金香球茎（旧方法）
Lane 6: 郁金香球茎（离心柱法）
Lane 7: 水稻稻谷（旧方法）
Lane 8: 水稻稻谷（离心柱法）
M: RNA Ladder (0.125 – 6.0 kb)
|
|
1% gel Agarose S, EtBr 染色
|
使用动物组织提取的RNA纯度与使用以往方法一样高（将培养细胞作为样本的结果也一样）。使用离心柱法（本产品）植物样本（尤其是球茎、稻谷等）可提取高纯度RNA，且不含在230 nm附近吸收波长最多的多糖类等混杂物。根据电泳结果也可得出这一结论。
◆注意事项
• 如果您对试剂的基本的知识不了解，请不要使用。
• ISOGEN 是非医疗用医剧毒物（苯酚制剂），请小心操作。
• 使用时请穿着适当的防护设备（手套、眼镜等）。
• 操作场所保持通风，以免吸入蒸汽。
• 如果接触皮肤或眼睛，请用大量的水冲洗15分钟或以上，并及时就诊。
• 请按照说明书进行操作。
• 对于因不按照说明书操作而导致的事故，Nippon Gene不负任何责任。
◆备注
本产品是实验研究用试剂，请勿用作医疗用途。
