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miRNA研究专题
FUJIFILM Wako提供miRNA从分离、克隆到靶基因功能研究的一系列试剂盒。
列表中的产品仅仅用于实验室研究，不能作为药物、食物或人的使用。
◆简便高效的microRNA分离试剂盒——microRNA Isolation Kit
产品编号：291-70201
microRNA Isolation Kit 可同时分离出miRNA和及其靶基因mRNA，操作简单。分离得到的 Ago IP RNA fraction，可用于miRNA和靶基因mRNA的克隆、定量和表达谱分析。
◆高效的miRNA克隆——microRNA Cloning Kit Wako
产品编号：290-66501
● 高效率克隆microRNA
● 可克隆具有二级结构的microRNA
● 重复性好。
◆miRNA靶基因mRNA的克隆—— Target mRNA Cloning Kit Wako
产品编号：298-68001
miRbase中miRNA的数目已经达到10883，但是miRNA已知的靶序列mRNA却很少， 而miRNA的靶序列研究也是其功能研究一个重要部分，由于miRNA与其靶mRNA存在不完全配对，对计算机预测造成困难。
miRNA、靶mRNA和Ago蛋白会以复合物RISC形式存在，本试剂盒通过从细胞中分离得到的RISC复合物中，直接有效的克隆特定miRNA的靶序列mRNA，可作为miRNA靶序列的新发现与筛选的有力工具。
特点
● 用于扩增微量 mRNA
● 可直接从Ago IP RNA片段中克隆mRNA，用于microRNA 靶基因的研究
靶序列mRNA的cDNA克隆实验路线图
◆PCR反应的纯化试剂盒——PCR Purification Kit Wako
产品编号：298-67901
不需要使用凝胶试剂盒回收纯化，可通过PCR Purification Kit Wako直接去除PCR扩增后DNA反应液中含有的引物、引物二聚体、dNTP、酶类如DNA聚合酶和限制内切酶等物质，操作简单，纯化后DNA溶液可用于限制酶处理、Southern杂交、标记，克隆，测序，体外转录等实验。
miRNA试剂盒（Wako）的应用：（miR-122 targeted mRNA的研究）
实验总路线图
① 扩增到cDNA电泳检测
结果显示：可以从Ago IP RNA片段中成功的扩增到cDNA.
② 扩增后的cDNA的克隆
miR-122的潜在靶序列的cDNA克隆 ，然后通过在线软件如TargetScan 4.2对获得序列是否是靶序列进行评分。
※ 1. CSP：Context Score Percentile
靶序列mRNA的合理参数值
※ 2.对照细胞
转染了GL3（荧光素酶）siRNA的HepG2细胞
③ 靶序列 mRNA 的鉴定（ qRT-PCR）
mRNA的定量（CSP※1 of Clone ≧ 80）
其中ALDOA mRNA已经证实是miR-122的靶基因，此外，通过此方法发现了很多新的miR-122潜在的靶序列。
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Target mRNA Cloning Kit |
A useful approach to total analysis of RISC-associated RNA |
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| 298-67901 | 298-68001 |
参考文献
1. Hayashida, Y., et al . A useful approach to total analysis of RISC-associated RNA., BMC Research Notes , 2, 169（2009）
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 298-68001 | Target mRNA Cloning Kit Wako | 10 次 | － |
| 291-70201 | microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1 | 10 次 | － |
| 292-66701 | microRNA Isolation Kit, Human Ago2 | 10 次 | － |
| 292-67301 | microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 | 10 次 | － |
| 297-70301 | microRNA Isolation Kit, Human Ago3 | 10 次 | － |
| 298-67901 | PCR Purifi cation Kit Wako | 30 次 | － |
| 290-66501 | microRNA Cloning Kit Wako | 8 次 | － |
F4798-KIT Nutritional Profile