产品信息

超保真 DNA 聚合酶对于扩增后需要 DNA 序列正确的应用非常重要。Phusion 超保真 DNA 聚合酶兼备高保真度和稳健扩增的性能，适用于所有 PCR 应用。其拥有独特的结构，将一种类似火球菌属（Pyrococcus）来源的新型酶，与增强持续合成能力的结构域融合表达，从而提高保真度和扩增速度。Phusion DNA 聚合酶是克隆的理想选择，可用于长片段或难扩增的扩增子。Phusion 是目前具有最高扩增准确性的热稳定型聚合酶之一，错配率是 Taq DNA 聚合酶 1/50，是火球菌（Pyrococcus furiosus）DNA 聚合酶（1）的 1/6。Phusion DNA 聚合酶具有 5´→3´ 聚合酶活性和 3´→5´ 核酸外切酶活性，可生成平末端产物。

Phusion 超保真 PCR 预混液（提供 GC 缓冲液）具备稳健扩增的性能，适用于所有 PCR 应用。这款 2X 预混液由 Phusion DNA 聚合酶、dNTP 和已优化且含 MgCl₂的缓冲液组成。只需添加模板、引物和水，即可建立反应。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带 Phusion DNA 聚合酶基因。

产品类别:

Phusion® High-Fidelity DNA Polymerases Products,

Master Mixes Products

应用:

Long Range PCR,

Fast PCR,

High-Fidelity PCR,

Multiplex PCR,

Specialty PCR,

Routine PCR,

PCR

• 产品组分信息

  本产品提供以下试剂或组分：

  NEB #	名称	组分货号	储存温度	数量	浓度
  M0532S     -20       Phusion® High-Fidelity PCR Master Mix with GC Buffer M0532SVIAL -20 2 x 1.25 ml 2 X   DMSO B0515AVIAL -20 1 x 0.5 ml 100 %
  M0532L     -20       Phusion® High-Fidelity PCR Master Mix with GC Buffer M0532SVIAL -20 10 x 1.25 ml 2 X   DMSO B0515AVIAL -20 2 x 0.5 ml 100 %

• 特性和用法

  热失活

  否

  单位活性检测条件

  25 mM TAPS-HCl（25℃ 时 pH 9.3）、50 mM KCl、2 mM MgCl₂、1 mM β-巯基乙醇、200 μM dNTP（含 [³H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

  单位定义：
  1 单位是指在 74℃ 条件下，30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

  反应条件：
  1X Phusion 超保真 PCR 预混液（提供 GC 缓冲液）、DNA 模板、0.5 µM 引物和 3% DMSO（可选），总反应体积为 50 µl。

• 优势和特性

  Features

  • 稳健的反应体系 – 最少的优化工作伴随最大的成功可能性
  • 超高保真度 – 是 Taq 酶的 50 倍
  • 快速 – 显著缩短延伸时间（是 Pfu 酶的 10 倍）
  • 高产量 – 使用最少量的酶提高产物产量
  • 通用性 – 可用于常规 PCR 以及长片段或难扩增的模板。

  应用特性

  • PCR
  • 克隆
  • 长片段或难扩增片段的扩增
  • 高通量 PCR

• 相关产品

  相关产品

  • Phusion® 超保真 PCR 预混液（提供 HF 缓冲液）
  • m0530-phusion-high-fidelity-dna-polymerase
  • Phusion® HF 反应缓冲液套装
  • Phusion® GC 反应缓冲液套装
  • MgCl₂ 溶液
  • dNTP 混合液
  • dNTP 套装
  • Phusion® High-Fidelity PCR Kit

• 注意事项

  1. Products specifications for individual components in the Phusion High-Fidelity PCR Master Mix with GC Buffer are available separately.

• 参考文献

  1. Frey, B. and Suppman, B. (1995). BioChemica. 2, 34-35.
  2. Chester, N. and Marshak, D.R. (1993). Analytical Biochemistry. 209, 284-290.

操作说明、说明书 & 用法

• 操作说明

  1. Protocol for Phusion® High-Fidelity PCR Master Mix with GC Buffer

• 使用指南

  • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
  • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

工具 & 资源

• 选择指南

  • DNA Polymerase Selection Chart
  • Thermophilic DNA Polymerases

• Web 工具

  • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

• FAQs

  1. What are the differences between the various available Phusion^® products?
  2. My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
  3. What ends will my PCR products have?
  4. What does exonuclease activity mean for a DNA polymerase?
  5. Does Phusion® High-Fidelity DNA Polymerase exhibit a strand displacement activity?
  6. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
  7. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
  8. What should the final primer concentration be in my PCR?

• 问题解决指南

  • PCR Troubleshooting Guide

• 实验技巧

  Phusion 对退火温度的要求与大多数 PCR 酶不同。请访问 www.neb.cn/tmcalculator，帮助您确定最佳的 Phusion 退火温度。