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uffer™ 套装（EcoRI/SspI、DpnII） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

4 管 NEBuffer 缓冲液，用于需要专用缓冲液的限制性内切酶（2 管 EcoRI/SspI，2 管 DpnII）

为确保限制性内切酶发挥最佳（100%）活性，New England Biolabs 随每种酶提供 10X NEBuffer 缓冲液。大多数酶都会随附四种标准 NEBuffer 缓冲液中的一种。有时，四种标准 NEBuffer 缓冲液均无法满足酶对缓冲液的特定要求，在这种情况下，会随酶提供其专用的 NEBuffer 缓冲液。

套装中每种专用的 NEBuffer 缓冲液各 2 管，每管 1.25ml：EcoRI/SspI 和 DpnII。

1X NEBuffer™ EcoRI/SspI
100 mM Tris-HCl
50 mM NaCl
10 mM MgCl2
0.025% Triton® X-100
（pH 7.5，25℃ 时）

1X NEBuffer™ DpnII
50 mM Bis-Tris-HCl
100 mM NaCl
10 mM MgCl2
1 mM DTT
（pH 6 @ 25℃）

 

产品类别:
Restriction Endonuclease Buffers & Diluents Products,
Buffers Products

应用:
Cloning Ligation

  • 试剂盒组成

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • B7006S     -20    
        NEBuffer™ EcoRI/SspI B0101SVIAL -20 2 x 1.25 ml 10 X
        NEBuffer™ DpnII B0543SVIAL -20 2 x 1.25 ml 10 X

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can I use NEBuffer EcoRI/SspI with SspI-HF?

EcoRI 甲基转移酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

EcoRI 甲基转移酶能修饰 GAATTC 序列中的内侧腺嘌呤残基（N6）。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带克隆自大肠杆菌 RY13（R.N. Yoshimori）的 EcoRI 修饰基因。

产品类别:
Methyltransferases for Epigenetics Products,
Methyltransferases Products

应用:
Restriction Enzymes for Epigenetics

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0211S     -20    
        EcoRI Methyltransferase M0211SVIAL -20 1 x 0.25 ml 40,000 units/ml
        rCutSmart™ Buffer B6004SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
        S-adenosylmethionine (SAM) B9003SVIAL -20 1 x 0.1 ml 32 mM

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 37℃ 条件下，10 μl 反应体系中，1 小时内能保护 1 μg λ DNA 不被 EcoRI 限制性内切酶切割所需酶量。

    反应条件

    1X rCutSmart™ 缓冲液
    Supplement with 80 µM S-腺苷甲硫氨酸（SAM）
    Incubate at 37°C

    1X rCutSmart™ 缓冲液
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    100 µg/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25°C)

    对照保护实验

    在 10 µl 补充了 80 µM S-腺苷甲硫氨酸的 1X EcoRI 甲基转移酶缓冲液中，rCutSmart 缓冲液与 1 µg λ DNA 于 37℃ 温育 1 小时，后于 65℃ 温育 15 分钟。保护能力是通过添加 40 µl 补充了 10 mM MgCl2 的 rCutSmart 缓冲液以及 5 个单位 EcoRI 限制性内切酶来测定的。37℃ 条件下温育 30 分钟后用琼脂糖凝胶电泳分析。

    贮存溶液

    100 mM KPO4
    200 mM NaCl
    10 mM β-ME
    0.1 mM EDTA
    200 µg/ml BSA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    65°C for 20 minutes

    分子量

    理论上的: 37911 道尔顿

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • S-腺苷甲硫氨酸（SAM）

  • 注意事项

    1. EcoRI Methyltransferase is inhibited by MgCl2. Only 50% activity is retained at a concentration of 4 mM MgCl2.

  • 参考文献

    1. Hoffman, J.L. (1986). biochemistry. 25, 4444-4449.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Recommended Protocol for 3H labeling of DNA
    2. Recommended Protocol for Methylation of Genomic DNA

  • 使用指南

    • Dam and Dcm Methylases of E. coli

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Is S-adenosylmethionine (SAM) supplied with the Methyltransferase?
    2. What should be considered if the methylation is not going to completion?
    3. Can EcoRI Methyltransferase be heat inactivated?
    4. Does EcoRI Methyltransferase require MgCl2?
    5. Will EcoRI methylation block the ApoI restriction enzyme?
    6. Will any NEB methyltransferases (methylases) work on RNA?