干细胞培养的基础材料 iMatrix系列

无需稀释可直接使用的孔板涂层溶液

Easy iMatrix-511

　　Easy iMatrix-511 是可以直接应用于培养孔板涂层的稀释溶液，有 iMatrix-511 和 iMatrix-511 silk 两种类型的稀释溶液。

　　本品 1 支（100 mL）可用于大约 11 块 6 孔板。

　　培养孔板涂层后 iMatrix-511 及 iMatrix-511 silk 的使用方法相同。

◆使用方法

【使用方法：以 6 well plate（9.6 cm² / well）为例】

1. 每孔中添加该产品 1.5 mL（0.25 μg/cm²）。

2. iMatrix-511 或 iMatrix-511 silk 可在以下三种条件下进行涂层处理：①37℃ 1小时处理、②室温 3小时处理、③4℃ 过夜处理。

3. 涂层处理完成后，去掉 Easy iMatrix-511 溶液，在孔板未干燥状态下，迅速接种细胞。

   　※避免涂层处理后的培养器材干燥，以免影响培养效果。　　　

◆产品列表

※本产品仅供实验研究用。

◆相关产品

Easy iMatrix-511，Easy iMatrix-511silk

Q1. 产品是以什么样的状态销售的？

A1. 产品是以液态销售的。一瓶里密封装有 1.6 μg/mL 浓度的 100 mL 细胞培养基质（层粘连蛋白 511-E8 片段）。

Q2. 产品的存储条件和有效期是什么？

A2. 产品的储存条件为，冷藏保存在 2-15°C。（推荐 4°C）产品的有效期，请参考下表。

※    具体的有效期详见考产品外包装。

Q3. 可以冷冻保存吗？

A3. 不可以冷冻保存。

Q4. 培养 hES/hiPS 细胞时使用什么培养基较好？

A4. 宫崎等的论文（Nature communications, 3(1236), 1-10, 2012）、（Scientific Reports, 7, 41165, 2017）中，使用了以下的培养基。

・mTeSR1,TeSR2,TeSR-E8 (STEMCELL Technologies)
・StemPro hESC SFM (Thermo Fisher Scientific)
・StemFitAK03 (Ajinomoto)

中川等的论文（Scientific Reports, 4(3594), 1-7, 2014）中使用了以下的培养基。

・StemFit (Ajinomoto)

文献中使用的培养基都出现了良好的结果。

Q5. 请教我培养 iPS 细胞时最佳的使用量。

A5.  6 孔板的一个孔中（9.6 cm²）使用 1.5 mL 本产品时，iMatrix-511 的浓度为 0.25 μg/cm²。

Q6. 培养 iPS 细胞时需要 Rock Inhibitor（Y-27632）吗？

A6. 在中川等的论文（Scientific Reports, 4(3594), 2014）中，介绍了只有在传代时添加 Rock Inhibitor，更换培养基的时候不使用的方法。

Q7. 培养 iPS 细胞时可以单细胞传代吗？

A7. 可以。

※使用iMatrix-511时，ES/iPS 细胞的扩增培养步骤，传代操作，请参考以下的链接。

（扩增培养步骤 ）

（传代操作的视频）

也可以参考中川等的论文（Scientific Reports, 4(3594), 2014）。

Q8. 传代时使用什么细胞分离液？

A8. 请使用胰蛋白酶。

※使用iMatrix-511时，ES/iPS细胞的扩增培养步骤，传代操作，请参考以下的链接。

（扩增培养步骤）

（传代操作的视频）

也可以参考中川等的论文（Scientific Reports, 4(3594), 2014）。

Q9. 可以使用小鼠的 iPS 细胞吗？

A9. 由于没有小鼠 iPS 细胞的培养数据，所以无法回答。

Q10. 这个产品与基质胶有什么不同?

A10. 基质胶含有小鼠 EHS 肉瘤来源的层粘连蛋白-111。另外还含有层粘连蛋白以外的分子。

A10. iMatrix-511 是将在 CHO-S 细胞中表达的层粘连蛋白 511-E8 片段高度纯化后的重组蛋白。

A10. iMatrix-511silk 是从蚕结的茧中高纯度纯化层粘连蛋白 511-E8 片段的重组蛋白。

A10. 已知 iPS 细胞是通过细胞膜受体（特别是 α6β１整联蛋白）粘附于层粘连蛋白-511。

A10. 已知 α6β１整联蛋白对层粘连蛋白-511 具有高粘附活性。这使得用 iMatrix-511 / iMatrix-511silk 可以使 iPS 细胞在单细胞状态下传代。

A10. 在宫崎等的论文中（Nature communications, 3(1236), 1-10, 201），5 次传代后（30 天后）的细胞数扩增效率约为基质胶的 200 倍。