产品信息

• 产品组分信息

  本产品提供以下试剂或组分：

  NEB #	名称	组分货号	储存温度	数量	浓度
  M0259V     -20       Deep Vent® (exo-) DNA Polymerase M0259VVIAL -20 1 x 0.05 ml 2,000 units/ml   ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X   Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution B1003SVIAL -20 1 x 1.5 ml 100 mM
  M0259S     -20       Deep Vent® (exo-) DNA Polymerase M0259SVIAL -20 1 x 0.1 ml 2,000 units/ml   ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X   Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution B1003SVIAL -20 1 x 1.5 ml 100 mM
  M0259L     -20       Deep Vent® (exo-) DNA Polymerase M0259LVIAL -20 1 x 0.5 ml 2,000 units/ml   ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 3 x 1.5 ml 10 X   Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution B1003SVIAL -20 1 x 1.5 ml 100 mM

• 特性和用法

  单位定义

  1 单位指在 75℃ 条件下，30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。
  

  反应条件

  1X ThermoPol^® 反应缓冲液套装

  1X ThermoPol^® 反应缓冲液套装
  20 mM Tris-HCl
  10 mM (NH₄)₂SO₄
  10 mM KCl
  2 mM MgSO₄
  0.1% Triton® X-100
  (pH 8.8 @ 25°C)

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  100 mM KCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  0.1% Triton® X-100
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25°C

  热失活

  否

  分子量

  理论上的: 89000 道尔顿

  5′ – 3′ 核酸外切酶

  No

  3′ – 5′ 核酸外切酶

  No

  链置换

  +++

  产物末端

  • Single-base 3´ Overhangs

  单位活性检测条件

  1X ThermoPol 反应缓冲液、每种浓度为 200 µM 的 dNTP（含 [³H]-dTTP）、15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

• 优势和特性

  应用特性

  • PCR
  • 引物延伸

• 相关产品

  相关产品

  • dNTP 混合液
  • dNTP 套装

  单独销售的组分

  • ThermoPol® 反应缓冲液套装
  • Magnesium Sulfate (MgSO₄) Solution

• 注意事项

  1. 该酶不提供 BSA，因为大多数引物延伸反应不需要 BSA。但如果需要，在售有 NEB #B9001。乙酰化的 BSA 不能用于引物延伸反应。
  2. 在售稀释液 D（#B8004）。推荐使用此缓冲液稀释 Deep Vent (exo-) DNA 聚合酶。
  3. 还提供其它 ThermoPol 反应缓冲液套装（#B9004）。每种缓冲液套装包含 4 管 10X 缓冲液（1.5 ml/管）和 1 管 MgSO₄（100 mM）。

• 参考文献

  1. Jannasch, H.W. et al. (1992). Appl. Environ. Mircobiol. 58, 3472-3481.

操作说明、说明书 & 用法

• 操作说明

  1. Guidelines for PCR Optimization for Deep Vent® DNA Polymerase
  2. Protocol for a Routine Deep Vent® (exo-) PCR

• 使用指南

  • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

工具 & 资源

• 选择指南

  • DNA Polymerase Selection Chart
  • Thermophilic DNA Polymerases

FAQs & 问题解决指南

• FAQs

  1. Are the DNA fragments produced by Deep Vent (exo-) DNA Polymerase blunt-ended or do they have the single-base 3′ overhang that Taq DNA Polymerase yields?
  2. Can Deep Vent (exo-) DNA Polymerase be used in other buffers?
  3. I can’t get Deep Vent (exo-) DNA Polymerase to work yet Taq DNA Polymerase works fine.

• 问题解决指南

  • PCR Troubleshooting Guide

• 实验技巧

  反应中的酶量至关重要。尝试在反应中加入终浓度为 0.02 – 0.04 U/µl 的 Deep Vent (exo-) DNA 聚合酶。