BL21(DE3) E. coli 感受态细胞 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

大肠杆菌(E. coli)化学感受态细胞,适合转化和蛋白表达。

重点

  • T7 表达菌株
  • Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失
  • 抗噬菌体 T1(fhuA2)
  • B 菌株
  • 无动物来源产品

基因型

fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3) [dcm] ∆hsdS
λ DE3 = λ sBamHIo ∆EcoRI-B int::(lacI::PlacUV5::T7 gene1) i21 ∆nin5

产品类别:
T7 Expression,
E. coli Protein Expression Strains Products,
Protein Expression Products,

E. coli Expression Strains Products

应用:
T7 Expression,
Peptide Ligation,
Protein Expression in E. Coli,

Protein Expression

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • C2527H     -80    
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        BL21(DE3) Competent E. coli C2527HVIAL -80 20 x 0.05 ml Not Applicable
    • C2527I     -80    
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        BL21(DE3) Competent E. coli C2527IVIAL -80 6 x 0.2 ml Not Applicable

  • 特性和用法

    Antibiotic for Plasmid Selection

    用于质粒筛选的抗生素 使用浓度
    Ampicillin 100 µg/ml
    Carbenicillin 100 µg/ml
    Chloramphenicol 33 µg/ml
    Kanamycin 30 µg/ml
    Streptomycin 25 µg/ml
    Tetracycline 15 µg/ml

    货运单

    • Ships on dry ice

  • 优势和特性

    Features

    • 常规 T7 表达

  • 相关产品

    相关产品

    • BL21 E. coli 感受态细胞
    • Lemo21(DE3)E. coli 感受态细胞
    • NiCo21(DE3)E. coli 感受态细胞

    单独销售的组分

    • SOC Outgrowth 培养基

  • 注意事项

    1. 注意:本产品含有害物质 DMSO。处理前请先查看 MSDS。
    2. 贮存和处理:感受态细胞应在 -80℃ 下贮存。在 -20℃ 贮存会导致转化效率显著降低。当细胞温度高于 -80℃ 时,即使不融化,细胞也会失去效率。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. 5 Minute Transformation Protocol (C2527)
    2. Protein Expression Using BL21(DE3) (C2527)
    3. Transformation Protocol for BL21(DE3) Competent Cells (C2527)

  • 使用指南

    • Additional E. coli Strain Genotypes
    • Competent E. coli Genome Sequences Tool
    • Genetic Markers
    • Making Unmethylated (Dam- Dcm-) DNA
    • McrA, McrBC and EcoKI Strain Phenotypes

  • 应用实例

    • Protein Expression with T7 Express Strains

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Characteristics of Select E.coli Strains
    • Competent Cell Product Comparison
    • Competent Cell Selection Guide

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Does New England Biolabs offer strains of Competent E.coli suited for protein expression?
    2. What are the strain properties (C2527)?
    3. Why are there no colonies or no growth in liquid culture (C2527)?
    4. Why is induced protein insoluble (C2527)?
    5. Why is there no protein visible on gel or no activity (C2527)?
    6. What are the solutions/recipes (C2527)?
    7. Can I store competent cells at -20°C instead of -80°C?
    8. Which kind of transformation tubes should be used?
    9. What volume of DNA can be added into competent cells?
    10. What is the shelf life for this strain (NEB #C2527H and NEB #C2527I)?
    11. Are NEB’s competent cells compatible with the “Mix & Go” protocol?
    12. What is the difference between BL21 and BL21(DE3) competent E.coli cells?
    13. How should I store SOC Outgrowth Medium? The SOC I received with my competent cells recommends storage at either room temperature or 4°C, however, when I purchase it as a stand alone product, it recommends storing it at 4°C. Which is better?
    14. Is T7 expression subject to catabolite repression in BL21(DE3) and derivative strains?

Lemo21(DE3)E. coli 感受态细胞 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

大肠杆菌(E. coli)化学感受态细胞,适合转化和蛋白表达。T7 表达的精细调控可以缓解毒性蛋白包涵体的形成或生长抑制作用。许多情况下,较少的表达会产生更多所需形式的目的蛋白。膜蛋白表达尤其如此(Wagner et al.,2008)。大肠杆菌(E. coli)中的膜蛋白表达和蛋白输出都受到 Sec 转位酶(某些情况下是 Tat 转位酶)转运性能的限制。如果 T7 表达不受调控,靶向 Sec 转位酶的蛋白表达往往会导致包涵体的积累或细胞分裂的抑制。

Lemo21(DE3)不仅有 BL21(DE3)的宿主特性,还可对困难克隆进行可调控表达。可调控的表达是通过改变溶菌酶(lysY)的水平来实现的,溶菌酶是 T7 RNA 聚合酶的天然抑制剂。溶菌酶的水平(0-2,000 µM)通过在表达培养物中添加 L-鼠李糖来调节。当 Lemo21(DE3)在不含鼠李糖的情况下生长时,该菌株的表现与含 pLysS 的菌株相同。然而,添加鼠李糖可调节目的蛋白的表达。对于难溶的蛋白,调节表达水平有可能产生更可溶的正确折叠的蛋白。

重点

  • 含 Lemo System™ 的 BL21(DE3)
  • 可调 T7 表达菌株(适用于难表达蛋白):膜蛋白、毒性蛋白以及存在可溶性问题蛋白
  • Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失
  • 抗噬菌体 T1(fhuA2
  • 氯霉素维持的 Lemo System™

基因型

fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3) [dcm] ∆hsdS/ pLemo(CamR)  λ DE3 = λ sBamHIo ∆EcoRI-B int::(lacI::PlacUV5::T7 gene1) i21 ∆nin5 pLemo = pACYC184-PrhaBAD-lysY

产品类别:
T7 Expression,
E. coli Protein Expression Strains Products,
Protein Expression Products,

E. coli Expression Strains Products

应用:
T7 Expression,
Toxic Protein Expression,
Membrane Protein Expression,

Expression of Difficult Proteins,
Peptide Ligation,
Protein Expression in E. Coli,

Protein Expression

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • C2528J     -80    
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        Lemo21(DE3) Competent E. coli C2528JVIAL -80 12 x 0.05 ml Not Applicable
        L-rhamnose solution B9030AVIAL -80 1 x 12.5 ml 0.5 M

  • 特性和用法

    Antibiotic for Plasmid Selection

    用于质粒筛选的抗生素 使用浓度
    Ampicillin 100 µg/ml
    Carbenicillin 100 µg/ml
    Kanamycin 30 µg/ml
    Streptomycin 25 µg/ml
    Tetracycline 15 µg/ml

    货运单

    • Ships on dry ice

    抗生素耐药性

    • cam

  • 优势和特性

    Features

    • 困难靶标的可调 T7 表达

    应用特性

    Western 分析带 6-His 标签的马来丝虫(Brugia malayi)蛋白 Lemo21(DE3)E. coli 感受态细胞 |
    A) 20℃ 下马来丝虫蛋白在 BL21(DE3)中的表达。B) 30℃ 下表达的马来丝虫蛋白的可溶部分

    膜蛋白的过夜表达 – PhoA 融合Lemo21(DE3)E. coli 感受态细胞 |
    Lemo System™ 能够简单、快速地优化膜蛋白表达。

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    • NiCo21(DE3)E. coli 感受态细胞

    单独销售的组分

    • SOC Outgrowth 培养基

  • 注意事项

    1. 注意:本产品含有害物质 DMSO。处理前请先查看 MSDS。
    2. 贮存和处理:感受态细胞应在 -80℃ 下贮存。在 -20℃ 贮存会导致转化效率显著降低。当细胞温度高于 -80℃ 时,即使不融化,细胞也会失去效率。
    3. 必须添加 30 μg/ml 的氯霉素,以维持 Lemo System™。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. 5 Minute Transformation Protocol (C2528)
    2. Protein Expression Using Lemo21(DE3) (C2528)
    3. Transformation Protocol (C2528)

  • 使用指南

    • Additional E. coli Strain Genotypes
    • Genetic Markers
    • McrA, McrBC and EcoKI Strain Phenotypes

  • 应用实例

    • E. coli Lemo21 DE3-A T7 RNA Polymerase-based protein overexpression platform for routine and difficult targets

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Characteristics of Select E.coli Strains
    • Competent Cell Product Comparison

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What are the solutions/recipes (C2528)?
    2. What are the strain properties (C2528)?
    3. Why are there no colonies or no growth in liquid culture (C2529)?
    4. Why is induced protein insoluble (C2528)?
    5. Why is there no protein visible on gel or no activity (C2528)?
    6. Can I store competent cells at -20°C instead of -80°C?
    7. Which kind of transformation tubes should be used?
    8. What volume of DNA can be added into competent cells?
    9. What is the shelf life for this strain (NEB #C2528H)?
    10. Are NEB’s competent cells compatible with the “Mix & Go” protocol?
    11. Is T7 expression subject to catabolite repression in BL21(DE3) and derivative strains?

NiCo21(DE3)E. coli 感受态细胞 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

BL21(DE3)源大肠杆菌(E. coli)化学感受态细胞 利用固相金属离子亲和层析(IMAC)分离含多聚组氨酸标签的重组蛋白时,目的蛋白经常被大量的大肠杆菌(E. coli)内源金属结合蛋白所污染。蛋白表达菌 NiCo21(DE3)经基因工程改造,使 IMAC 组分中的 E. coli 蛋白污染减少到最低:GlmS 在突变后消除了与 IMAC 树脂结合的能力,另外三种蛋白(SlyD、ArnA 和 Can)在加上重组标签后,能够通过几丁质亲和层析快速去除。

重点

  • 常规表达时 BL21(DE3)的卓越替代品
  • 通过 IMAC 分离的目的蛋白纯度更佳
  • 与 BL21(DE3)的生长特点一致
  • Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失
  • 抗噬菌体 T1(fhuA2
  • 无动物来源产品

基因型

can::CBD fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3) [dcm] arnA::CBD slyD::CBD glmS6Ala ∆hsdS λ DE3 = λ sBamHIo ∆EcoRI-B int::(lacI::PlacUV5::T7 gene1) i21 ∆nin5

产品类别:
Nickel Purification (His-tag),
T7 Expression,
Affinity Purification Products,

Protein Purification Products,
E. coli Protein Expression Strains Products,
Protein Expression Products,

E. coli Expression Strains Products

应用:
His-tagged Protein Expression & Purification,
Affinity Purification & Expression Tags,
Protein Purification,

T7 Expression,
Peptide Ligation,
Protein Expression in E. Coli,

Protein Expression

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • C2529H     -80    
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        NiCo21(DE3) Competent E. coli C2529HVIAL -80 20 x 0.05 ml Not Applicable

  • 特性和用法

    Antibiotic for Plasmid Selection

    用于质粒筛选的抗生素 使用浓度
    Ampicillin 100 µg/ml
    Carbenicillin 100 µg/ml
    Chloramphenicol 33 µg/ml
    Kanamycin 30 µg/ml
    Streptomycin 25 µg/ml
    Tetracycline 15 µg/ml

    货运单

    • Ships on dry ice

  • 优势和特性

    Features

    • 通过 IMAC 分离的目的蛋白纯度更佳

    应用特性

    利用 NiCo21(DE3)提高 His 标签蛋白的纯度NiCo21(DE3)E. coli 感受态细胞 |
    A)在 NiCo21(DE3) E. coli 感受态细胞中表达谷氨酰 tRNA 合成酶(6-His),随后进行 Ni-NTA 纯化。将来自 Ni-NTA 柱的洗脱液(E)通过几丁质柱。目的蛋白在流动相(FT)中被洗脱,而 CBD 标签金属结合蛋白仍然保持与几丁质树脂(NEB #S6651)结合(B)。按照制造商推荐的条件进行纯化。B) 利用抗 CBD 抗体(NEB #E8034),通过 Western blot 检测污染物 ArnA、SlyD 和 Can。

    两步纯化在 NiCo21(DE3)E. coli 菌株中表达的目的蛋白
    NiCo21(DE3)E. coli 感受态细胞 |

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    • 几丁质树脂
    • 抗 CBD 单克隆抗体
    • 几丁质磁珠
    • 6 孔磁性分离架
    • 12 孔磁性分离架
    • 96 孔微孔板磁性分离架

    单独销售的组分

    • SOC Outgrowth 培养基

  • 注意事项

    1. 注意:本产品含有害物质 DMSO。处理前请先查看 MSDS。
    2. 贮存和处理:感受态细胞应在 -80℃ 下贮存。在 -20℃ 贮存会导致转化效率显著降低。当细胞温度高于 -80℃ 时,即使不融化,细胞也会失去效率。

  • 参考文献

    1. Bolanos-Garcia and Davies (2006). Biochimica et Biophysica Acta. 1760, 1304-1313.
    2. Carine Robichon, Jianying Luo, Thomas B. Causey, Jack S. Benner, and James C. Samuelson (2011). Applied and Environmental Microbiology. 77, 4634-4646.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. 5 Minute Transformation Protocol (C2529)
    2. Expression Using NiCo21(DE3) (C2529)
    3. Protocol for Removal of IMAC Contaminating Proteins (C2529)
    4. High Efficiency Transformation Protocol (C2529)

  • 使用指南

    • Additional E. coli Strain Genotypes
    • Competent E. coli Genome Sequences Tool
    • Genetic Markers
    • McrA, McrBC and EcoKI Strain Phenotypes

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Characteristics of Select E.coli Strains
    • Competent Cell Selection Guide

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Does New England Biolabs offer strains of Competent E.coli suited for protein expression?
    2. What are the solutions/recipes (C2529)?
    3. Why are there no colonies or no growth in liquid culture (C2529)?
    4. Why is the induced protein insoluble (C2529)?
    5. Why is there no protein visible by SDS-PAGE or no activity (C2529)?
    6. What are the strain properties (C2529)? 
    7. Can I store competent cells at -20°C instead of -80°C?
    8. Which kind of transformation tubes should be used?
    9. What volume of DNA can be added into competent cells?
    10. What is the shelf life for this strain (NEB #C2529H)?
    11. Are NEB’s competent cells compatible with the “Mix & Go” protocol?
    12. How should I store SOC Outgrowth Medium? The SOC I received with my competent cells recommends storage at either room temperature or 4°C, however, when I purchase it as a stand alone product, it recommends storing it at 4°C. Which is better?
    13. Is T7 expression subject to catabolite repression in BL21(DE3) and derivative strains?
    14. What expression plasmids can be used with NiCo21(DE3)?

167008-NUNC 96孔细胞培养板 MicroWell™ 微孔板

产品型号167008

品       牌赛默飞世尔科技

产品简介

NUNC 96孔细胞培养板 MicroWell™ 微孔板,适用于细胞培养,无性繁殖,病毒滴定和细胞熔合;培养板边缘和盖的设计减少了蒸发;提高了的孔缘减低交叉污染的风险,盖子的形状便于堆叠和处理;96孔脚点适用于标准的仪器,使用分隔板(259684),可以承受低速离心应用

详情介绍

NUNC96孔培养板供应,NUNC培养板优势代理

1、适用于细胞培养,无性繁殖,病毒滴定和细胞熔合
2、培养板边缘和盖的设计减少了蒸发
3、提高了的孔缘减低交叉污染的风险,盖子的形状便于堆叠和处理
4、96孔脚点适用于标准的仪器,使用分隔板(259684),可以承受低速离心应用

F96 MicroWell™ 微孔板

  • 可预先贴条形码

  • 具有可视性的透明微孔板

  • MaxiSorp™,MediSorp™,MultiSorp™和PolySorp™都可用于固相免疫检测

  • Nunclon™Δ,Collagen I和Poly-D-Lysine 用于促进细胞贴壁

  • 工作体积:50-250µl/孔

Nunc F96 MicroWell™ 微孔板
聚苯乙烯,外部尺寸128 x 86 mm
 

目录编号 表面 颜色 总容量,
µl/孔
已灭菌 带盖 条形码 数量 
每包/箱
156545* 细胞培养 透明 400 + 10/180
161093* 细胞培养 透明 400 + + 10/160
167008* 细胞培养 透明 400 + + 1/50
168055* 细胞培养 透明 400 + 1/50
152038 Collagen I 透明 400 -** + 5/20
152039 Poly-D-Lysine 透明 400 -** + 5/20
256510 未经处理 透明 400 + 10/180
260836 未经处理 透明 400 10/180
260844 未经处理 透明 400 + 10/180
260860 未经处理 透明 400 + + 10/160
260887 未经处理 透明 400 + + + 10/160
260895 未经处理 透明 400 + 10/160
456529 PolySorp 透明 400 10/180
456537* MaxiSorp 透明 400 10/180
460984* MaxiSorp 透明 400 + 10/180
467320* MediSorp 透明 400 5/60
467340* MultiSorp 透明 400 5/60

*带证书
**在洁净环境中生产