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T4 噬菌体 β-葡糖基转移酶（T4-BGT） |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自 T4 噬菌体的 bgt 基因

产品类别:
Epigenetic Analysis Products

应用:
5-hmC Detection & Analysis

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0357S     -20    
        T4 Phage β-glucosyltransferase (T4-BGT) M0357SVIAL -20 1 x 0.05 ml 10,000 units/ml
        NEBuffer™ 4 B7004SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
        Uridine Diphosphate Glucose S2200SVIAL -20 1 x 0.25 ml 2 mM
    • M0357L     -20    
        T4 Phage β-glucosyltransferase (T4-BGT) M0357LVIAL -20 1 x 0.25 ml 10,000 units/ml
        NEBuffer™ 4 B7004SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
        Uridine Diphosphate Glucose S2200SVIAL -20 1 x 0.25 ml 2 mM

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指能够保护 0.5 µg T4gt-DNA 免受 MfeI 限制性内切酶切割所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ 4
    Supplement with 40 µM 尿嘧啶二磷酸葡萄糖
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ 4
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    1 mM DTT
    (pH 7.9 @ 25°C)

    稀释兼容性

    • 稀释液 B

    贮存溶液

    20 mM KPO4
    200 mM NaCl
    0.25 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    pH 7 @ 25°C

    热失活

    65°C for 10 minutes

    分子量

    理论上的: 40666 kDa

    单位活性检测条件

    在 30 µl 的 1X NEBuffer 4 反应体系中加入 0.5 µg T4gt-DNA 和 40 µM 尿嘧啶二磷酸葡萄糖。在 37℃ 温育 1 小时，然后在 65℃ 温育 10 分钟。添加 20 µl 1X NEBuffer 4 和 10 个单位的 MfeI 来测定 T4 -BGT 的保护能力。37℃ 温育 30 分钟后用琼脂糖凝胶电泳分析。

    酶特性
    在 NEBuffer 缓冲液中的活性：
    NEBuffer 1：100%
    NEBuffer 2：50%
    NEBuffer 3：50%
    NEBuffer 4：100% 

    在反应中的存活性：要保护 0.5 µg T4 gt-DNA 免受 MfeI 切割，至少需要 0.16 个单位的酶作用 16 小时。

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • NEBuffer 4

  • 参考文献

    1. Josse, J. and Kornberg, A. (1962). J. Biol.Chem.. 237, 1968-1976.
    2. Tomaschewski, J. et al. (1985). Nucleic Acids Res. 13, 7551-7568.
    3. McNicol, L. A. et al. (1973). J. Mol. Biol. 15, 76,, 285-301.
    4. Szwagierczak, A. et al. (2010). Sensitive enzymatic quantification of 5-hydroxymethylcytosine in genomic DNA. Nucleic Acids Res. 38, e181.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Glucosylation and digestion of Genomic DNA using AbaSI (#R0665)

  • 使用指南

    • Activity of DNA Modifying Enzymes in rCutSmart™ Buffer

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Will T4 Phage β-glucosyltransferase (T4-BGT) work in rCutSmart Buffer?