BG-GLA-NHS |NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

SNAP-tag 蛋白标记体系能将目标蛋白以共价结合的形式,特异性地标记上任何分子。SNAP-tag 是一种基于人 O6-烷基鸟嘌呤-DNA-烷基转移酶(O6-alkylguanine-DNA-alkyltransferase,hAGT)的蛋白。SNAP-tag 的底物通过苄基与鸟嘌呤或氯嘧啶基团偶联荧光基团、生物素或微珠。在标记反应中,底物的苄基部分被替换,与 SNAP-tag 形成共价结合。

该体系包括两个步骤:亚克隆并表达目标蛋白为 SNAP-tag 融合蛋白,以及使用所选的 SNAP-tag 底物标记融合蛋白。在 SNAP-tag 质粒的产品说明中描述了 SNAP-tag 融合蛋白的表达。有关利用 SNAP-tag 底物标记融合蛋白的信息,请参阅操作说明。

BG-GLA-NHS |
图 1:BG-GLA-NHS 的结构(MW 481.5 g/mol)

 
产品类别:
Building Blocks Products,
SNAP-tag Substrates Products ,
Protein Labeling Products

应用:
Protein Labeling Snap Clip,
Cell Imaging

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • S9151S     -20    
        BG-GLA-NHS S9151SVIAL -20 1 x 2 mg Not Applicable

  • 特性和用法

    反应条件

    将 BG-GLA-NHS 偶联到蛋白
    NHS 与蛋白质的偶联通常使用过量的 NHS 酯进行。根据蛋白质中赖氨酸残基的数量,可能需要在标记反应完成之前终止标记反应,以避免损伤或展开蛋白质。典型的偶联包括使 NHS 酯与蛋白表面暴露的伯胺发生反应,形成酰胺键。反应条件为: pH 7-9(常规条件 pH 8.3),温度范围 4–37℃,温育时间从 30 分钟至过夜。必须注意避免使用含有伯胺的缓冲液,如 Tris 或铵离子。

    BG-GLA-NHS 与含胺化合物的偶联
    常规反应中含有等摩尔量的 NHS 酯、待偶联的胺和三乙胺在 DMF 中于 30℃条件下过夜。纯化方式取决于所使用的标签。用高效液相色谱法(HPLC)和硅胶色谱法均已获得了较好的结果

  • 注意事项

    1. BG-GLA-NHS 以冻干粉形式提供,并在氩气下包装。SNAP-tag 构建模块底物干粉应在 -20℃条件下贮存。
    2. BG-GLA-NHS 可溶于无水 DMF 或 DMSO。选择与最终用途相兼容的溶剂体积。通过涡旋并短暂离心去除未溶解的固体。
    3. NHS 酯在潮湿的环境中容易水解。实验设计应最大限度地利用 BG-GLA-NHS。建议不要将未使用的 BG-GLA-NHS 溶解于 DMF 或 DMSO 中贮存。如果有特殊情况,建议在 -20℃条件下贮存最短时间。

  • 参考文献

    1. Howland, S.W. et al. (2008). J. Immunother. 31, 607-619.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Labeling SNAP-tag Fusion Proteins with BG-substrates (S9151)
    2. Reaction Conditions for Chemical Coupling (S9151)

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Building Blocks
    • Comparison of SNAP-tag®/CLIP-tag™ Technologies to GFP

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Cellular Imaging and Analysis FAQs

  • 问题解决指南

    • Labeling with SNAP-tag® Technology Troubleshooting Guide

BG-Maleimide |NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

SNAP-tag 蛋白标记体系能将目标蛋白以共价结合的形式,特异性地标记上任何分子。SNAP-tag 是一种基于人 O6-烷基鸟嘌呤-DNA-烷基转移酶(O6-alkylguanine-DNA-alkyltransferase,hAGT)的蛋白。SNAP-tag 的底物通过苄基与鸟嘌呤或氯嘧啶基团偶联荧光基团、生物素或微珠。在标记反应中,底物的苄基部分被替换,与 SNAP-tag 形成共价结合。

该体系包括两个步骤:亚克隆并表达目标蛋白为 SNAP-tag 融合蛋白,以及使用所选的 SNAP-tag 底物标记融合蛋白。在 SNAP-tag 质粒的产品说明中描述了 SNAP-tag 融合蛋白的表达。有关利用 SNAP-tag 底物标记融合蛋白的信息,请参阅操作说明。

图 1:BG-Maleimide 的结构(MW 489.5 g/mol) BG-Maleimide |
产品类别:
Building Blocks Products,
SNAP-tag Substrates Products ,
Protein Labeling Products

应用:
Protein Labeling Snap Clip,
Cell Imaging

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • S9153S     -20    
        BG-Maleimide S9153SVIAL -20 1 x 2 mg Not Applicable

  • 注意事项

    1. BG-Maleimide 干粉于 -20℃条件下贮存。
    2. BG-Maleimide 构建模块应溶解在无水 DMF 中。选择与最终用途相兼容的溶剂体积。溶解于 DMF 中未使用的构建模块应于 -20℃ 条件下贮存。

  • 参考文献

    1. Jongsma, M.A. and Litjens, R.H. (2006). Proteomics. 6, 2650-2655.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Reaction Conditions for Chemical Coupling (S9153)
    2. Protocol for Labeling SNAP-tag Fusion Proteins with BG-substrates (S9153)

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Building Blocks
    • Comparison of SNAP-tag®/CLIP-tag™ Technologies to GFP

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Cellular Imaging and Analysis FAQs

  • 问题解决指南

    • Labeling with SNAP-tag® Technology Troubleshooting Guide

  • 实验技巧

    测试

BG-PEG-NH2 |NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

SNAP-tag 蛋白标记体系能将目标蛋白以共价结合的形式,特异性地标记上任何分子。SNAP-tag 是一种基于人 O6-烷基鸟嘌呤-DNA-烷基转移酶(O6-alkylguanine-DNA-alkyltransferase,hAGT)的蛋白。SNAP-tag 的底物通过苄基与鸟嘌呤或氯嘧啶基团偶联荧光基团、生物素或微珠。在标记反应中,底物的苄基部分被替换,与 SNAP-tag 形成共价结合。

该体系包括两个步骤:亚克隆并表达目标蛋白为 SNAP-tag 融合蛋白,以及使用所选的 SNAP-tag 底物标记融合蛋白。在 SNAP-tag 质粒的产品说明中描述了 SNAP-tag 融合蛋白的表达。有关利用 SNAP-tag 底物标记融合蛋白的信息,请参阅该说明。

BG-PEG-NH2 |
图 1:BG-PEG-NH2 的结构(MW 488.50 g/mol)


产品类别:
Building Blocks Products,
SNAP-tag Substrates Products ,
Protein Labeling Products

应用:
Protein Labeling Snap Clip,
Cell Imaging

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • S9150S     -20    
        BG-PEG-NH2 S9150SVIAL -20 1 x 2 mg Not Applicable

  • 注意事项

    1. BG-PEG-NH2 干粉于 -20℃ 条件下贮存。
    2. BG-PEG-NH2 可溶于无水 N,N-二甲基甲酰胺(DMF)和二甲基亚砜(DMSO)。选择与最终用途相兼容的溶剂体积。在 37℃条件下加热、涡旋和/或超声处理将有助于溶解。
    3. 溶解在 DMF 或 DMSO 中的未使用的 BG-PEG-NH2 底物应在 -20℃条件下贮存。
    4. Biacore® CM5 芯片的表面已被 BG-PEG-NH2 修饰,使其可共价固定 SNAP-tag 融合蛋白。使用标准的氨基偶联程序(暴露 NHS 和 EDC)进行表面活化。详细说明请参考 Biacore® CM5 芯片制造商的操作说明。

  • 参考文献

    1. Kindermann, M. et al. (2003). JACS . 125, 7810-7811.
    2. Sielaff, I. et al. (2003). ChemBiochem. 7, 194-202.
    3. Kufer, S.K. et al. (2005). Eur.Biophys. J. 35, 72-78.
    4. Huber, W. et al. (2004). Anal.Biochem. 333, 280-288.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Labeling SNAP-tag Fusion Proteins with BG-substrates (S9150)
    2. Reaction Conditions for Chemical coupling (S9150)

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Building Blocks
    • Comparison of SNAP-tag®/CLIP-tag™ Technologies to GFP

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Cellular Imaging and Analysis FAQs

  • 问题解决指南

    • Labeling with SNAP-tag® Technology Troubleshooting Guide

BG-NH2 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

The SNAP-tag protein labeling system enables the specific, covalent attachment of virtually any molecule to a protein of interest. The SNAP-tag is a protein based on human O6-alkylguanine-DNA-alkyltransferase (hAGT). SNAP-tag substrates are fluorophores, biotin or beads conjugated to guanine or chloropyrimidine leaving groups via a benzyl linker. In the labeling reaction, the substituted benzyl group of the substrate is covalently attached to the SNAP-tag.

There are two steps to using this system: subcloning and expression of the protein of interest as a SNAP-tag fusion, and labeling of the fusion with the SNAP-tag substrate of choice. Expression of SNAP-tag fusion proteins is described in the documentation supplied with SNAP-tag plasmids. The labeling of fusion proteins with the SNAP-tag substrate is described in this document.

Figure 1: Structure of BG-NH2 (MW 270.3 g/mol) BG-NH2 |
产品类别:
Discontinued (<3 years)

  • 注意事项

    1. BG-NH2 干粉应在 -20℃ 条件下贮存。
    2. BG-NH2 应溶解在无水 N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中使用。BG-NH2 可在无水 DMF 中少量溶解。在 37℃ 下加热、涡旋和/或超声处理将有助于溶解。预计会有一些剩余的沉淀物,并应被转移到反应中。随着偶联反应的进行,剩余的固体将继续溶解。选择与最终用途相适应的溶剂体积。在 DMF 中溶解的未使用的 BG-NH2 底物,应在 -20℃ 条件下贮存。

  • 参考文献

    1. Keppler A. et al. (2004). Methods. 32, 437-444.
    2. Keppler A. et al. (2003). Nature Biotechnology. 21, 86-89.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Reaction Conditions for Chemical Coupling (S9148)
    2. Labeling SNAP-tag Fusion Proteins with BG-substrates (S9148)

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Building Blocks
    • Comparison of SNAP-tag®/CLIP-tag™ Technologies to GFP

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Cellular Imaging and Analysis FAQs

  • 问题解决指南

    • Labeling with SNAP-tag® Technology Troubleshooting Guide