产品信息

• 产品组分信息

  本产品提供以下试剂或组分：

  NEB #	名称	组分货号	储存温度	数量	浓度
  M0277S     -20       AMV Reverse Transcriptase M0277SVIAL -20 1 x 0.02 ml 10,000 units/ml   AMV Reverse Transcriptase Reaction Buffer B0277AVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
  M0277L     -20       AMV Reverse Transcriptase M0277LVIAL -20 1 x 0.1 ml 10,000 units/ml   AMV Reverse Transcriptase Reaction Buffer B0277AVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X

• 特性和用法

  单位定义

  1 单位指以 poly(rA)-oligo(dT) 为模板和引物，37℃ 条件下，10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入酸不溶物中所需的酶量。

  反应条件

  1X AMV 反转录酶反应缓冲液
  Incubate at 42°C

  1X AMV 反转录酶反应缓冲液
  50 mM Tris-acetate
  75 mM Potassium Acetate
  8 mM Magnesium Acetate
  10 mM DTT
  (pH 8.3 @ 25°C)

  贮存溶液

  200 mM potassium phosphate
  2 mM DTT
  50% Glycerol
  0.2% Triton® X-100
  pH 7.2 @ 25°C

  热失活

  85°C for 5 minutes

  单位活性检测条件

  75 mM 醋酸钾、50 mM Tris-HCl（pH 8.3）、8 mM 醋酸镁、0.5 mM [³H]-dTTP、0.2 mM poly(rA)•oligo(dT)12–18 和 10 mM DTT。

• 优势和特性

  应用特性

  • cDNA 合成
  • RNA 测序
  • RT-PCR

• 相关产品

  相关产品

  • 小鼠 RNase 抑制剂
  • NEBNext® Ultra II RNA 非链特异性第二链合成模块

• 注意事项

  1. 反应条件：37℃-52℃ 温育。
  2. cDNA 转录产物的产量和长度随反转录酶量的增加而增加。
  3. 贮存条件：解冻后应贮存于 -20℃。反复冻融会使酶失活。分装形式可在 -70℃ 贮存较长时间。

• 参考文献

  1. Krug, M.S. et al. (1987). Meth.Enzymol. 152,
  2. Sambrook.J., Fritsch, E.F. and Maniatis, T. (1989). Molecular Cloning: A LaboratoryManual. (2nd ed.), 8-64. Cold Spring Harbor Laboratory Press.
  3. Kacian, D.L. (1977). Meth.Virol.. 6, 143.

操作说明、说明书 & 用法

• 操作说明

  1. First Strand cDNA Synthesis (Quick Protocol) (NEB #M0277)
  2. First Strand cDNA Synthesis (Standard Protocol) (NEB #M0277)
  3. First Strand cDNA Synthesis (No-RT Negative Control Reaction) (NEB #M0277)

• 使用指南

  • cDNA/Reverse Transcriptase Tips

工具 & 资源

• 选择指南

  • DNA Polymerase Selection Chart