上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
产品信息
产品来源
大肠杆菌菌株，携带有克隆自 T4 噬菌体的 bgt 基因
- 产品类别:
- Epigenetic Analysis Products
- 应用:
- 5-hmC Detection & Analysis
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产品组分信息
本产品提供以下试剂或组分：
NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度 -
M0357S -20 T4 Phage β-glucosyltransferase (T4-BGT) M0357SVIAL -20 1 x 0.05 ml 10,000 units/ml NEBuffer™ 4 B7004SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X Uridine Diphosphate Glucose S2200SVIAL -20 1 x 0.25 ml 2 mM
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M0357L -20 T4 Phage β-glucosyltransferase (T4-BGT) M0357LVIAL -20 1 x 0.25 ml 10,000 units/ml NEBuffer™ 4 B7004SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X Uridine Diphosphate Glucose S2200SVIAL -20 1 x 0.25 ml 2 mM
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特性和用法
单位定义
1 单位是指能够保护 0.5 µg T4gt-DNA 免受 MfeI 限制性内切酶切割所需的酶量。
反应条件
1X NEBuffer™ 4
Supplement with 40 µM 尿嘧啶二磷酸葡萄糖
Incubate at 37°C1X NEBuffer™ 4
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
1 mM DTT
(pH 7.9 @ 25°C)稀释兼容性
- 稀释液 B
贮存溶液
20 mM KPO4
200 mM NaCl
0.25 mM DTT
0.1 mM EDTA
50% Glycerol
pH 7 @ 25°C热失活
65°C for 10 minutes
分子量
理论上的: 40666 kDa
单位活性检测条件
在 30 µl 的 1X NEBuffer 4 反应体系中加入 0.5 µg T4gt-DNA 和 40 µM 尿嘧啶二磷酸葡萄糖。在 37℃ 温育 1 小时，然后在 65℃ 温育 10 分钟。添加 20 µl 1X NEBuffer 4 和 10 个单位的 MfeI 来测定 T4 -BGT 的保护能力。37℃ 温育 30 分钟后用琼脂糖凝胶电泳分析。
酶特性
在 NEBuffer 缓冲液中的活性：
NEBuffer 1：100%
NEBuffer 2：50%
NEBuffer 3：50%
NEBuffer 4：100%在反应中的存活性：要保护 0.5 µg T4 gt-DNA 免受 MfeI 切割，至少需要 0.16 个单位的酶作用 16 小时。
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相关产品
单独销售的组分
- NEBuffer 4
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参考文献
- Josse, J. and Kornberg, A. (1962). J. Biol.Chem.. 237, 1968-1976.
- Tomaschewski, J. et al. (1985). Nucleic Acids Res. 13, 7551-7568.
- McNicol, L. A. et al. (1973). J. Mol. Biol. 15, 76,, 285-301.
- Szwagierczak, A. et al. (2010). Sensitive enzymatic quantification of 5-hydroxymethylcytosine in genomic DNA. Nucleic Acids Res. 38, e181.
操作说明、说明书 & 用法
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操作说明
- Protocol for Glucosylation and digestion of Genomic DNA using AbaSI (#R0665)
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使用指南
- Activity of DNA Modifying Enzymes in rCutSmart™ Buffer
FAQs & 问题解决指南
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FAQs
- Will T4 Phage β-glucosyltransferase (T4-BGT) work in rCutSmart Buffer?