尿嘧啶糖基酶抑制剂(UGI)(也称:尿嘧啶糖基化酶抑制剂) |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

尿嘧啶糖基酶抑制剂(UGI),来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)噬菌体 PBS1,蛋白分子量较小(9.5 kDa),可抑制 E. coli 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)以及来源于其它物种的 UDG。UGD 与 UGI 按 1:1 比例进行可逆的蛋白结合,发挥对 UDG 的抑制作用。UGI 可解离 UDG-DNA 复合物。


产品来源

大肠杆菌菌株,携带有克隆自枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)噬菌体 PBS1 的 UGI 基因。

产品类别:
DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0281S     -20    
        Uracil Glycosylase Inhibitor (UGI) M0281SVIAL -20 1 x 0.1 ml 2,000 units/ml
        UDG Reaction Buffer B0280SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
    • M0281L     -20    
        Uracil Glycosylase Inhibitor (UGI) M0281LVIAL -20 1 x 0.5 ml 2,000 units/ml
        UDG Reaction Buffer B0280SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位 UGI 指在 50 µl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时抑制 1 单位大肠杆菌 UDG 所需的酶量。1 单位 UDG 指每分钟从含尿嘧啶的双链 DNA 上催化释放 60 pmol 尿嘧啶所需的酶量。

    反应条件

    1X UDG 反应缓冲液
    Incubate at 37°C

    1X UDG 反应缓冲液
    20 mM Tris-HCl
    1 mM DTT
    1 mM EDTA
    (pH 8 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 µg/ml BSA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    70°C for 10 minutes

  • 优势和特性

    应用特性

    • 尿嘧啶糖基酶抑制剂(UGI)可抑制尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)。由于 95℃ 热处理后该酶仍有部分活性,UGI 可用于阻止产物 DNA 的后续降解。

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • UDG Reaction Buffer

  • 注意事项

    1. 由于 95℃ 热处理后该酶仍有部分活性,UGI 可用于阻止产物 DNA 的后续降解。
    2. 对 NEB 的大肠杆菌 UDG 酶有效(NEB #M0280)。
    3. 在原始反应中加入与 UDG 等量或过量的 UGI。
    4. 在 NEBuffer 1-4 中都有活性。(NEB #B7001、NEB #B7002、NEB #B7003、NEB #B7004)
    5. UGI 的热稳定性极高,煮沸 10 分钟仍具有 95% 以上的活性。

  • 参考文献

    1. Lindahl, T. et al. (1977). J. Biol.Chem.. 252, 3286-3294.
    2. Wang, Z., et al. (1991). Gene. 99, 31-37.
    3. Bennett, S. E. and Mosbaugh, D. W. (1992). J. Biol. Chem.. 267, 22512-22521.

操作说明、说明书 & 用法

  • 使用指南

    • DNA Damage and PreCR

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the nature of the Uracil Glycosylase Inhibitor?
    2. How does UGI inhibit UDG?
    3. Does UGI inhibit the activity of all UDGs?
    4. What is the molecular weight of UGI?
    5. Why is it necessary to use UGI in a reaction?

热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(OGG) |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(OGG)是一种古细菌 8-羟基鸟嘌呤(8-oxoG)DNA 糖基酶,具有 N-糖基酶和 AP-裂解酶活性。N-糖基酶活性会释放双链 DNA 中的受损嘌呤(8-羟基鸟嘌呤),产生脱嘌呤(AP 位点)。AP 裂解酶活性切割 AP 位点的 3′端,留下 1 个 5′ 磷酸和 1 个 3′-磷酸-α、β-不饱和醛。与其它一些 DNA 糖基酶不同,热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(OGG)只特异性地识别和切割 8-oxoG,而不切割其它修饰碱基。

图 1:与 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(Fpg)不同,热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(OGG)只特异性地识别和切割 8-羟基鸟嘌呤,而不切割其它修饰碱基。

热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(OGG) |

将热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(OGG)(8 U)或 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(Fpg)(8 U)与荧光标记的含有修饰碱基的双链 DNA(8-氧代鸟嘌呤、5-羟基胞嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基尿苷或 8-羟基鸟嘌呤)一起温浴,检测其切除修饰碱基的能力。通过毛细管电泳分析样品,切割产物峰值的出现证明了切割产物的存在。热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(OGG)只切割 8-羟基鸟嘌呤样品(顶部图),而 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(Fpg)对其它底物也有活性,包括 5-羟基胞嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇和 5-羟基尿苷(底部图)。

重点

  • 重组来源提取
  • 提供 10X 反应缓冲液

产品来源

大肠杆菌菌株(E. coli),携带有克隆的热稳定古细菌羟基鸟嘌呤糖基酶基因。

产品类别:
DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0464S     -20    
        Thermostable OGG M0464SVIAL -20 1 x 0.065 ml 8,000 units/ml
        rCutSmart™ Buffer B6004SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 10 μl 反应体系中,65℃ 条件下,1 小时内切割 10 pmol 含一个与胞嘧啶配对的 8-羟基鸟嘌呤的 60 mer 荧光标记寡核苷酸双链所需的酶量。

    反应条件

    1X rCutSmart™ 缓冲液
    Incubate at 65°C

    1X rCutSmart™ 缓冲液
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    100 µg/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    500 mM NaCl
    0.1 mM EDTA
    1 mM DTT
    200 µg/ml Recombinant Albumin
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • rCutSmart™ 缓冲液

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for cleavage with Thermostable OGG (NEB #M0464)

  • 使用指南

    • DNA Damage and PreCR

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Activities of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
    • DNA Repair Enzymes on Damaged and Non-standard Bases
    • Properties of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the difference between Thermostable OGG (NEB #M0464) and Fpg (NEB #M0240)?
    2. What is the activity of Thermostable OGG in other buffers?
    3. Will Thermostable OGG cut an 8-oxoguanine paired with a base other than cytosine?
    4. What is the molecular weight of Thermostable OGG?
    5. Is Thermostable OGG a tagged protein?
    6. What substrate is used to test Thermostable OGG?
    7. Does Thermostable OGG cut only one strand, or both, to cause a double-strand break?
    8. What modified bases will Thermostable OGG recognize and cleave?
    9. Will Thermostable OGG cut 8-oxoguanine in ssDNA?
    10. What temperatures is Thermostable OGG active?