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货号： 297-77501 保存条件： -20℃ 供应商： 上海金畔生物科技有限公司 保质期： 咨询 英文名： MagCapture™ RNA Pull Down Assay Kit 数量： 1 规格： 10次 MagCapture™ RNA Pull Down检测试剂盒
本试剂盒包含新型链霉亲和素样蛋白Tamavidin® 2的突变体、可洗脱的生物素样Tamavidin® 2-REV的固定化磁珠以及Wako独家的洗脱用缓冲液。
本品可应用于生物素化RNA（bait RNA）的RNA Pull Down，所拉下来的含有生物素化RNA的核糖核蛋白（RNP）复合物无需变性，即可通过生物素竞争性洗脱回收。
因此，与使用SDS等变性剂的洗脱法相比，本试剂盒优势为可减少目的蛋白中的非特异性蛋白。可有效应用于对于确定与目的RNA相互作用的蛋白以及功能未知的新型长链非编码RNA（lncRNA）的功能分析。
◆Tamavidin® 2-REV~和生物素可逆结合功能
Takakura, Y. et al.: "Tamavidin® 2-REV : an engineered tamavidin with reversible biotin-binding capability.", J. Biotechnol., 164(1), 19-25(2013).
Tamavidin® 2-REV是新型链霉亲和素样蛋白Tamavidin® 2的突变体。通过减低与生物素的亲和力，可以形成可逆性的生物素结合复合物。因此，通过添加过量的生物素，可以竞争性洗脱生物素化分子。
（传统的链霉亲和素（抗生物素蛋白）和生物素的结合力非常牢固，发生不可逆的结合。）
试剂盒内容 10次反应
RPD捕获磁珠——500 μL
RPD洗涤缓冲液——55 mL
RPD细胞裂解缓冲液——25 mL
RPD重组缓冲液——1500 μL
RPD生物素洗脱缓冲液——1000 μL
◆操作步骤概述
◆应用数据 ~以HOTAIR RNA※ 进行RNA Pull Down分析～
※HOTAIR是一种与肿瘤发生密切相关的lncRNA
银染
bait RNA：生物素标记HOTAIR RNA正义链
洗脱：Sample Buffer、4%SDS溶液、
洗脱：试剂盒附带的生物素溶液
样本：K562细胞（1×107 细胞）的总细胞裂解液
Western Blot
一抗：抗Ezh2抗体
二抗：抗兔IgG（Fc）单抗，POD结合
二抗：（Code No. 016-23943）
与传统产品相比，本试剂盒可获得低背景的RNA结合蛋白。
产品编号
产品名称
规格
包装
297-77501
MagCapture™ RNA Pull Down 检测试剂盒
MagCapture™ RNA Pull Down Assay Kit基因研究用
10 次
◆MagCapture™ Tamavidin® 2-REV
◆MagCapture™ HP Tamavidin® 2-REV
本品是Tamavidin® 2-REV固定化磁珠，有两种不同的粒径。
※ MagCaptureTM HP Tamavidin® 2-REV 为小粒径型。
应用数据 ～以HOTAIR RNA进行RNA Pull Down分析/MagCapture™Tamavidin® 2-REV
与Streptavidin的性能比较
银染
bait RNA：生物素标记HOTAIR RNA正义链
洗脱：Sample Buffer
样本：K562细胞（5×106细胞）的总细胞裂解物
Western Blot
一抗：抗Ezh2抗体
二抗：抗兔IgG（Fc）单抗，
二抗：POD结合（Code No. 016-23943）
与普通Streptavidin产品相比，本试剂盒可获得低背景的
RNA结合蛋白。
应用数据～以HOTAIR RNA进行RNA Pull Down分析/MagCapture™ HP Tamavidin®2-REV
与MagCapture™ Tamavidin® 2-REV比较回收量
银染
bait RNA：生物素标记HOTAIR RNA正义链
洗脱：Sample Buffer
样本：K562细胞（5×106细胞）的总细胞裂解物
Western Blot
一抗：抗Ezh2抗体
二抗：抗兔IgG（Fc）单抗，
二抗：POD结合（Code No. 016-23943）
通过使用MagCapture™ Tamavidin® 2-REV，RNA蛋白的
回收量提升了（SDS sample buffer洗脱）
产品编号
产品名称
规格
包装
136-18341
MagCapture™ Tamavidin® 2-REV RNA回收试剂
MagCapture™ Tamavidin® 2-REV基因研究
2 mL
133-18611
MagCapture™ HP Tamavidin® 2-REV RNA回收试剂
MagCapture™ HP Tamavidin® 2-REV2 mL
◆重组Tamavidin® 2系列
本系列产品是从榆黄蘑（Pleurotus cornucopiae，蘑菇的一种）中克隆的链霉亲和素样生物素结合蛋白Tamavidin® 2的突变体。对比野生型的Tamavidin® 2，本系列产品各有优势，可根据用途选用对应的产品。
产品名称
等电点（pl）※1
耐热性※2
有机溶剂耐受性
生物素结合速度常数
(ka(M-1S-1))
生物素解离速度常数
(kd(S-1))分子量
(四聚体)Tamavidin® 2
7.4
Tm=85℃
有
(1.0±0.5)×106
低于检测下限※4
约60 kDa
Tamavidin® 2-REV
8
Tm=75℃
–
(1.3±0.5)×106
(1.5±0.4)×10-5
约60 kDa
Tamavidin® 2-HOT
7.23
耐热性高
耐受性高※3
(3.0±1.7)×105
低于检测下限
约60 kDa
※1 等电点：只有Tamavidin® 2-LPI是实测值。其余是根据氨基酸序列计算得到的数值。
※2 耐热性(Tm值)：加热20分钟后，生物素结合活性为加热前50%时的温度。Tamavidin® 2-HOT，
※2 耐热性(Tm值)：在99.9°C下，加热30分钟后结合活性依然保持在90%以上，因此无法计算其Tm值。
※3 耐受性高：40-50％ DMSO中。
※4 检测界限值：5×10-6(kd(S-1))
产品编号
产品名称
特点
规格
包装
205-18263
Tamavidin® 2, recombinant
Tamavidin® 2, 重组型免疫化学用
5 mg
203-19401
Tamavidin® 2-REV, recombinant
Tamavidin® 2-可逆型, 重组型与生物素的可逆性结合
免疫化学用
1 mg
209-19403
5 mg
205-19363
Tamavidin® 2-HOT, recombinant
Tamavidin® 2-耐热型, 重组型超耐热·耐有机溶剂
5 mg
根据有关许可，Tamavidin® 是日本Tabako产业株式会社的注册商标。Tamavidin® 由日本Tabako产业株式会社授权给FUJIFILM Wako进行销售。
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