标签归档：热启动

Hot-Start Gene Taq 热启动基因Taq酶

发表于由

Hot-Start Gene Taq

热启动基因Taq酶

品牌：Nippon Gene
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

313-07044

 – 50units – 咨询 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

Hot-Start Gene Taq 热启动基因Taq酶

发表于由

Hot-Start Gene Taq

热启动基因Taq酶

品牌：Nippon Gene
CAS No.：
储存条件：-20℃
纯度：–
产品编号

(生产商编号)

 等级 规格 运输包装 零售价(RMB) 库存情况 参考值

319-07041

 – 250U – 咨询 – –


* 干冰运输、大包装及大批量的产品需酌情添加运输费用


* 零售价、促销产品折扣、运输费用、库存情况、产品及包装规格可能因各种原因有所变动，恕不另行通知，确切详情请联系上海金畔生物科技有限公司。

EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶是 Taq DNA 聚合酶和温度敏感性核酸适配体抑制剂的混合物。这种抑制剂可与酶可逆结合，在温度低于 45℃ 时抑制聚合酶活性，而在正常的 PCR 循环条件下释放酶。此特性有助于在室温下建立反应体系。基于适配体的热启动机制的一个优点是无需单独的高温温育步骤来激活酶。EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶拥有先进的基于适配体的热启动机制活性，并随附经优化的反应缓冲液，堪称用于扩增重亚硫酸盐转化 DNA 的理想之选。

Taq DNA 聚合酶具有 5´ – 3´ 聚合酶活性（1、2、3）和 5´ 结构特异性核酸内切酶活性（4、5）。

EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶随附 5X EpiMark 热启动 Taq 反应缓冲液，从而可实现重亚硫酸盐转化 DNA 和富含 AT 的扩增子的稳定扩增。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自水生嗜热菌（Thermus aquaticus）YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因。

产品类别:
Methylome Analysis Products,
Epigenetic Analysis Products,
Taq DNA Polymerase Products,

Next Generation Sequencing Library Preparation Products

应用:
Bisulfite Sequencing,
Bisulfite Conversion,
Hot Start PCR,

Specialty PCR,
Routine PCR,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0490S     -20    
        EpiMark® Hot Start Taq DNA Polymerase M0490SVIAL -20 1 x 0.025 ml 5,000 units/ml
        EpiMark® Hot Start Taq Reaction Buffer Pack B0490SVIAL -20 1 x 2 ml 5 X
    • M0490L     -20    
        EpiMark® Hot Start Taq DNA Polymerase M0490LVIAL -20 1 x 0.125 ml 5,000 units/ml
        EpiMark® Hot Start Taq Reaction Buffer Pack B0490SVIAL -20 3 x 2 ml 5 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 75℃ 条件下，30 分钟内将 15 nmol dNTP 掺入到酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X EpiMark®热启动 Taq 反应缓冲液套装

    1X EpiMark®热启动 Taq 反应缓冲液套装
    20 mM Tris-HCl
    1.8 mM MgCl2
    22 mM KCl
    0.06% IGEPAL® CA-630
    0.05% Tween® 20
    22 mM NH4Cl
    (pH 8.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    0.5% Tween® 20
    0.5% IGEPAL® CA-630
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    分子量

    理论上的: 94000 道尔顿

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    Yes

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    No

    产物末端

    • 3´ 单碱基突出末端

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液、200 µM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 重亚硫酸盐转化 DNA 的 PCR 实验

  • 相关产品

    相关产品

    • MgCl2 溶液
    • dNTP 套装
    • EpiMark® 甲基化 DNA 富集试剂盒
    • dNTP 混合液

    单独销售的组分

    • EpiMark® Hot Start Taq Reaction Buffer Pack

  • 参考文献

    1. Chien, A., Edgar, D.B. and Trela, J.M. (1976). J. Bact. . 127, 1550-1557.
    2. Kaledin, A.S., Slyusarenko, A.G. and Gorodetskii, S.I. (1980). Biokhimiya . 45, 644-651.
    3. Lawyer, F.C. et al. (1993). PCR Methods And Appl.. 2, 275-287.
    4. Longley, M.J., Bennett, S.E. and Mosbaugh D.W. (1990). Nucleic Acids Res. . 18, 7317-7322.
    5. Lyamichev, V., Brow, M.A. and Dahlberg, J.E. (1993). Science. 260, 778-783.
    6. Saiki R.K. et al. (1985). Science. 230, 1350-1354.
    7. Powell, L.M. et al. (1987). Cell. 50, 831-840.
    8. Sun, Y., Hegamyer, G. and Colburn, N. (1993). Biotechniques . 15, 372-374.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. EpiMark® Hot Start Taq DNA Polymerase Guidelines for PCR (M0490)

  • 使用指南

    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers

工具 & 资源

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What ends will my PCR products have?
    2. What are Hot Start and WarmStart® polymerases and when would I use them?
    3. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
    4. My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
    5. What should the final primer concentration be in my PCR?
    6. Is this Taq DNA Polymerase product compatible with other NEB Buffers?
    7. What are the general recommendations for designing primers for bisulfite-treated/deaminated DNA?

Next® Q5® 热启动超保真 PCR 预混液 |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

Next® Q5® 热启动超保真 PCR 预混液 |

Next® Q5® 热启动超保真 PCR 预混液 |
 

NEBNext® Q5 热启动超保真 PCR 预混液是独创的 Q5 DNA 聚合酶热启动 NEBNext 剂型。在所有的 NEBNext Ultra 试剂盒中，均含有此剂型，用于 DNA 和 RNA 文库制备。

NEBNext Ultra II Q5 预混液（NEB #M0544）现已商售，它能够进一步提高文库扩增的一致性，即使在 GC 富集区域依然表现优异。

这两种预混液中均含有 Q5 超保真 DNA 聚合酶，它是一种具备热稳定性的新型 DNA 聚合酶，具有 3´→5´ 核酸外切酶活性，并且融合了具有增强持续合成能力的 Sso7d 结构域。Q5 还具有最优异的保真度（比 Taq DNA 聚合酶高 280 倍），错配率极低。

这款便捷的 2X 预混液包含 dNTP、Mg++ 以及专有缓冲液，仅需加入引物和 DNA 模板，即可稳健扩增。加入热启动适配体后，可以更方便地在室温下建立反应体系。

覆盖深度与未扩增文库的相关性
Next® Q5® 热启动超保真 PCR 预混液 |
使用 NEBNext Q5 热启动超保真 PCR 预混液进行文库扩增来对扩增的均一性进行评价。Y 轴表示以 hg19 为参考基因组，每 10 kb 的平均覆盖深度；X 轴表示 PCR-Free 文库的 reads 数。使用 NEBNext Ultra DNA 文库制备试剂盒（NEB #E7370）制备文库，并在 HiSeq® 2500 上进行测序，测序结果以 hg19 为参考基因组进行比对（Bowtie 2.1.0）、重复标记（Picard 1.56）以及向下抽样至 420M reads（Picard 1.56）。使用 Bedtools（2.19.1）统计 hg19 每个 10 kb 区间上的 reads，再将碱基 reads 除以间隔长度（10 kb）来计算平均覆盖度。
NEBNext Q5 热启动超保真 PCR 预混液可将 GC 偏好性降至最低
Next® Q5® 热启动超保真 PCR 预混液 |
未经 PCR 扩增的人类（IMR-90）或大肠杆菌 K12 基因组 DNA 文库和使用 NEBNext Q5 热启动超保真 PCR 预混液进行扩增的相应文库，同时在 Illumina MiSeq® 上测序。GC 偏差图已生成，X 轴为每 100 bp 的 GC 含量（%）。标准化后的覆盖度由蓝色圆圈表示，参考序列的 GC 含量（%）由红线表示，碱基质量由绿线表示。与 PCR-free 文库相比，使用 NEBNext 热启动超保真 PCR 预混液扩增的文库中也可以观察到类似的 GC 偏差。

反应条件
NEBNext Q5 热启动超保真PCR 预混液、DNA 模板和 0.5 μM 到 1.25 μM 的引物（视样品加入量而定），总反应体积为 50 μl。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带 Q5 DNA 聚合酶基因。

产品类别:
Q5® High-Fidelity DNA Polymerases Products,
Master Mixes Products,
Next Generation Sequencing Library Preparation Products

应用:
Polymerases for NGS Library Preparation,
Hot Start PCR,
Fast PCR,

Specialty PCR,
Routine PCR,
DNA Amplification, PCR & qPCR,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0543S     -20    
        NEBNext® Q5® Hot Start HiFi PCR Master Mix M0543SVIAL -20 1 x 1.25 ml Not Applicable
    • M0543L     -20    
        NEBNext® Q5® Hot Start HiFi PCR Master Mix M0543SVIAL -20 5 x 1.25 ml Not Applicable

  • 特性和用法

    热失活

    否

  • 优势和特性

    应用特性

    • 二代测序文库扩增
    • 超保真 PCR
    • 难扩增片段
    • 高通量 PCR

  • 相关产品

    相关产品

    • NEBNext® Ultra 连接模块
    • NEBNext® 多样本接头引物试剂盒 1（12 种单端 Index 引物）
    • NEBNext® 多样本接头引物试剂盒 2（12 种单端 Index 引物）
    • NEBNext® 多样本接头引物试剂盒 1（8 x 12 种双端 Index 引物）
    • NEBNext 多样本接头引物试剂盒 3（12 种单端 Index 引物）
    • NEBNext® 多样本接头引物试剂盒 4（12 种单端 Index 引物）
    • NEBNext® 多样本接头引物试剂盒（96 种单端 Index 引物）

  • 注意事项

    1. To ensure optimal performance, themaster mix should be thawed and resuspendedprior to use. Stability testing using up to 30 freeze/thaw cycles has shown no negative effect onmaster mix performance. The NEBNext Q5 HotStart HiFi PCR Master Mix may be liquid at –20°C.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for a PCR reaction using NEBNext® Q5® Hot Start HiFi PCR Master Mix (M0543)

工具 & 资源

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What’s New About NEBNext® Q5 Hot Start HiFi PCR Master Mix?
    2. What types of beads can be used with NEBNext® Q5 Hot Start HiFi PCR Master Mix?
    3. Is NEBNext® Q5 Hot Start HiFi PCR Master Mix the same as the Q5® Hot Start High-Fidelity 2X Master Mix (M0494)?
    4. Is NEBNext® Q5 Hot Start HiFi PCR Master Mix the same as NEBNext® High-Fidelity 2X PCR Master Mix (M0541)?
    5. Is NEBNext® Q5 Hot Start HiFi PCR Master Mix the same as NEBNext® High-Fidelity 2X PCR Master Mix (M0541), or Q5 Hot Start High-Fidelity 2X PCR Master Mix (M0494)?
    6. Do I need to make any changes to the cycling conditions for my NGS library amplification I have previously been using with Phusion High-Fidelity PCR Master Mix?
    7. How many cycles of PCR should I perform with NEBNext® Q5 Hot Start HiFi PCR Master Mix?
    8. Are the DNA products produced by NEBNext® Q5 Hot Start HiFi PCR Master Mix blunt-ended or do they have a single base 3’ overhang?
    9. What do I do if I see precipitation in the NEBNext Q5 Hot Start HiFi PCR Master Mix?
    10. What are the advantages of using NEBNext® Q5 Hot Start HiFi PCR Master Mix?
    11. Will NEBNext® Q5 Hot Start HiFi PCR Master Mix incorporate dUTPs?