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人源单链选择性单功能 UDG（hSMUG1） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

重点

 

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆的人类 SMUG1 基因。

产品类别:
DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0336S     -20    
        hSMUG1 M0336SVIAL -20 1 x 0.1 ml 5,000 units/ml
        NEBuffer™ 1 B7001SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
        Recombinant Albumin, Molecular Biology Grade B9200SVIAL -20 1 x 0.6 ml 20 mg/ml

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 10 µl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时从含有单一 dU 位点的 34 mer 双链寡核苷酸上催化切除 1 pmol 脱氧尿嘧啶所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ 1
    Supplement with 100 µg/ml 重组白蛋白，分子生物学级
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ 1
    10 mM Bis-Tris-Propane-HCl
    10 mM MgCl2
    1 mM DTT
    (pH 7 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    250 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 µg/ml Recombinant Albumin
    50% Glycerol
    0.15% Triton® X-100
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    65°C for 20 minutes

    分子量

    理论上的: 29861 道尔顿

    单位活性检测条件

    1X NEBuffer 1 添加有 100 µg/ml 重组白蛋白，含 5 pmol 荧光标记的双链寡核苷酸，总反应体系为 10 µl。释放 dU 后，使用 100 mM NaOH 在 80℃ 下处理生成的 AP 位点，反应 10 分钟，即可切割寡核苷酸。

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • NEBuffer 1
    • 重组白蛋白, 分子生物学级（不含动物成分）

  • 注意事项

    1. 人源单链选择性单功能 UDG（hSMUG1）作用于 5-羟甲基尿嘧啶的活性是作用于尿嘧啶的 50%，而作用于单链 DNA 的活性是作用于双链 DNA 的 50%。

  • 参考文献

    1. Cannon-Crlson, S.V. et al. (1989). J. Biol. Chem. 264, 13306-13312.
    2. Masaoka, A. et al. (2003). Biochemistry. 42, 5003-5012.
    3. Wibley, J.E.A. et al. (2003). Cell. 11, 1647-1659.
    4. Singh, N. et al. (1998). Experimental Cell  Research. 175, 184-191.
    5. Collins, A. et al. (1993). Carcinogenesis . 14, 1733-1735..
    6. Collins, A. et al. (1996). Environmental Health Perspectives. 104, 465-469.

操作说明、说明书 & 用法

  • 使用指南

    • DNA Damage and PreCR

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Activities of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
    • DNA Repair Enzymes on Damaged and Non-standard Bases
    • Properties of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the activity of hSMUG1 in the NEBuffers 1-4?
    2. What is the molecular weight of hSMUG1?
    3. What substrate is used to test hSMUG1?
    4. Is hSMUG1 a tagged protein?

重组人源二聚体组蛋白 H2A/H2B |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

蛋白序列：人源组蛋白 H2A 蛋白序列：SGRGK QGGKA RAKAK SRSSR AGLQF PVGRV HRLLR KGNYS ERVGA GAPVY LAAVL EYLTA EILEL AGNAA RDNKK TRIIP RHLQL AIRND EELNK LLGRV TIAQG GVLPN IQAVL LPKKT ESHHK AKGK（GenBank 登录号：AAN59960）

人源组蛋白 H2B 蛋白序列：PEPAK SAPAP KKGSK KAVTK AQKKD GKKRK RSRKE SYSIY VYKVL KQVHP DTGIS SKAMG IMNSF VNDIF ERIAG EASRL AHYNK RSTIT SREIQ TAVRL LLPGE LAKHA VSEGT KAVTK YTSSK（GenBank 登录号：AAN59961）

重组人源二聚体组蛋白 H2A/H2B 的 SDS-PAGE 分析
重组人源二聚体组蛋白 H2A/H2B |
泳道 1 和 7：NEB 蛋白 Ladder（NEB #P7703）
泳道 2：组蛋白 H2A（NEB #M2502S）
泳道 3：组蛋白 H2B（NEB #M2505S）
泳道 4–6：2.0、4.0、8.0 µg 二聚体组蛋白 H2A/H2B

产品来源

对纯化的 H2A 和 H2B（NEB #M2502 和 NEB #M2505）进行变性、重折叠，再使用凝胶过滤纯化二聚体。

产品类别:
Discontinued (<3 years)

  • 特性和用法

    贮存溶液

    20 mM Tris-HCl
    2 M NaCl
    1 mM DTT
    1 mM EDTA
    pH 8 @ 25°C

    分子量

    理论上的: 27779 Da

  • 注意事项

    1. 蛋白浓度（0.55 mg/ml，20 μM）是通过组蛋白 H2A/H2B 二聚体的摩尔消光系数（11,920）及其在 280 nm 处的吸光值计算得出（4,5）。
    2. 如果要用作酶修饰活性测定或其它对盐敏感的实验流程中的底物，加 1 至 2 µl 二聚体，请至少使用 20 µl 反应体系，以使反应体系中的盐浓度 ≤ 200 mM。
    3. 由于盐含量高，溶液并不总是保持结冰状态。

  • 参考文献

    1. Kornberg, R.D. (1977). Annu. Rev. Biochem. 46, 931-954.
    2. van Holde, K.E. (1989). Chromatin. 1-497,
    3. Mersha, F. unpublished observations.
    4. Gill, S.C. and von Hippel, P.H. (1989). Anal. Biochem. 182, 319-326.
    5. Pace, C.N. et al. (1995). Protein Science. 4, 2411-2423.

FAQs & 问题解决指南

  • 实验技巧

    如果要用作酶修饰活性测定或其它对盐敏感的实验流程中的底物，加 1 至 2 μl 二聚体，请至少用 20 μl 反应体系，以使反应体系中的盐浓度不高于 200 mM。

重组人源四聚体组蛋白 H3.1/H4 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

组蛋白 H3.1 与组蛋白 H4 结合形成 H3/H4 四聚体。两个 H2A/H2B 异源二聚体与一个 H3/H4 四聚体结合构成组蛋白八聚体。组蛋白 H3.1 是目前仅在哺乳动物中发现的 H3 变异蛋白，为 DNA 复制所必须，与基因的激活和沉默有关。四聚体可作为多种酶的底物并被修饰。这些修饰在基因调控中相当重要。由于组蛋白与其配体亚基一起折叠，因此四聚体可能更适合作为特定酶和修饰的底物。

人源组蛋白 H3.1 蛋白序列：ARTKQ TARKS TGGKA PRKQL ATKAA RKSAP ATGGV KKPHR YRPGT VALRE IRRYQ KSTEL LIRKL PFQRL VREIA QDFKT DLRFQ SSAVM ALQEA CEAYL VGLFE DTNLC AIHAK RVTIM PKDIQ LARRI RGERA（Genbank 登录号：AAN10051）

人源组蛋白 H4 蛋白序列：SGRGK GGKGL GKGGA KRHRK VLRDN IQGIT KPAIR RLARR GGVKR ISGLI YEETR GVLKV FLENV IRDAV TYTEH AKRKT VTAMD VVYAL KRQGR TLYGF GG（Genbank 登录号：AAM83108）

重组人源四聚体组蛋白 H3.1/H4 的 SDS-PAGE 分析
重组人源四聚体组蛋白 H3.1/H4 |
泳道 1：NEB 蛋白 Ladder（NEB #P7703）
泳道 2：组蛋白 H3.1（NEB #M2503）
泳道 3：组蛋白 H4（NEB #M2504）
泳道 4–6：2.0、4.0、8.0 µg 组蛋白 H3.1/H4 四聚体

产品来源

对纯化的 H3.1 和 H4（NEB #M2503 和 NEB #M2504）进行变性、重折叠，再使用凝胶过滤纯化组蛋白 H3/H4 四聚体。

产品类别:
Discontinued (<3 years)

  • 特性和用法

    贮存溶液

    20 mM Tris-HCl
    2 M NaCl
    1 mM DTT
    1 mM EDTA
    pH 8 @ 25°C

    分子量

    理论上的: 53018 Da

  • 注意事项

    1. 蛋白浓度（0.53 mg/ml，10 μM）是通过组蛋白 H3.1/H4 四聚体的摩尔消光系数（21,360）及其在 280 nm 处的吸光值计算得出（5,6）。
    2. 如果要用作酶修饰活性测定或其它对盐敏感的实验流程中的底物，加 1 至 2 µl 四聚体，请至少用 20 µl 反应体系，以使反应体系中的盐浓度 ≤ 200 mM。
    3. 由于盐含量高，溶液并不总是保持结冰状态。

  • 参考文献

    1. Kornberg, R.D. (1977). Annu. Rev. Biochem,. 46, 931-954.
    2. van Holde, K.E. (1989). Chromatin,. 1-497,
    3. Hake, S.B. et al. (2006). J. Biol. Chem,. 281, 559-568.
    4. Mersha, F unpublished observation.
    5. Pace, C.N. et al. (1995). Protein Science. 4, 2411-2423.
    6. Gill, S.C. and von Hippel, P.H. (1989). Anal. Biochem. 182, 319-326.

重组人源组蛋白 H10 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

组蛋白 H1 作用于多聚核小体 DNA 的连接部位，将染色质浓聚成约 30 nm 的结构（1）。但对于八聚体和核小体核心颗粒（NCP）的形成则不是必需的。人类基因组中已经发现了 8 种不同的组蛋白 H1（2）。组蛋白 H10 为非复制依赖型组蛋白，在终末分化的细胞中高度表达（3）。

蛋白序列：
TENST SAPAA KPKRA KASKK STDHP KYSDM IVAAI QAEKN RAGSS RQSIQ KYIKS HYKVG ENADS QIKLS IKRLV TTGVL KQTKG VGASG SFRLA KSDEP KKSVA FKKTK KEIKK VATPK KASKP KKAAS KAPTK KPKAT PVKKA KKKLA ATPKK AKKPK TVKAK PVKAS KPKKA KPVKP KAKSS AKRAG KKK（Genbank 登录号：P07305）

重组人源组蛋白 H10 的 ESI-TOF 质谱分析结果
重组人源组蛋白 H10 |

重组人源组蛋白 H10 的 SDS-PAGE 分析
重组人源组蛋白 H10 |
泳道 1 和 7：NEB 蛋白 Ladder（NEB #P7703），泳道 2 至 6：0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 µg 重组人源组蛋白 H10。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有编码人源组蛋白 H1 基因 H1F0 或 H1FV 的质粒。（GenBank 登录号：X03473）

产品类别:
Discontinued (<3 years)

  • 特性和用法

    贮存溶液

    20 mM Sodium Phosphate
    300 mM NaCl
    1 mM EDTA
    pH 7 @ 25°C

    分子量

    理论上的: 20732 Da

  • 注意事项

    1. 蛋白浓度（1 mg/ml，48 µM）是使用组蛋白 H1 的摩尔消光系数（3840）及其在 280 nm 处的吸光值计算得出（4,5）。1.0 A280 unit = 5.4 mg/ml。
    2. There is a small percentage of Histone H10 with a mass of 20863.27 which is a +131 Da difference from the major species. This correlates to Histone H10 with an intact N-terminal methionine (6).
    3. （同物）异名：组蛋白 H1.0、组蛋白 H1(0)、组蛋白 H1′

  • 参考文献

    1. van Holde, K.E. (1989). Chromatin. 1-497,
    2. Marzluff, W.F., et al. (2002). Genomics. 80, 487-497.
    3. Pehrson, J.R. and Cole, R.D. (1982). Biochem. 21, 456-460.
    4. Gill, S.C. and von Hippel, P.H. (1989). Anal. Biochem. . 182, 319-326.
    5. Pace, C.N. et al. (1995). Protein Science. 4, 2411-2423.
    6. Qing, X. et al. (2010). Biochemistry. 49, 5588-5599.

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Do the histones need to be reconstituted?
    2. What are the recommended histone storage conditions?
    3. Are the histones fusion proteins or tagged proteins?
    4. Can the histones be used as substrates for protein modification enzymes? Which ones?

  • 实验技巧

    在冰上解冻后，用移液器上下吸打将溶液混匀。请勿离心。