可清洗去除的细胞染色探针

CytoSeeing<Reversible Cytoplasm Blue>

CytoSeeing是一种新型细胞染色试剂，只需添加到培养基即可迅速对细胞质进行染色。荧光观察细胞质后，只需更换不含CytoSeeing的培养基，便可轻松去除细胞内的荧光染色。

※本产品基于北海道大学研究生院理学研究科的研究成果商品化而成。

※本产品仅供研究，研究以外不可使用。

◆关于CytoSeeing

已知细胞核与细胞质的形态变化与细胞分化、功能、信号反应相关。传统的细胞质染色探针，主要作为细胞示踪剂使用，一旦摄入细胞，即使去除培养基中的试剂也会残留在细胞内。随后，细胞内的染色试剂随着细胞分裂的过程逐渐褪色，通常在3~6代左右便会消失。但是如果染色试剂残留在细胞内的话，实时成像观察细胞质与细胞核的形态后，难以立即使用其他探针进行成像。

不同于传统试剂，CytoSeeing是一种仅对细胞质进行染色且可清洗的细胞染色试剂。

参考文献：

Kamada, et al., PLOS ONE, 11：e0160625(2016).

◆特点

●　只需添加到培养基即可对细胞质进行染色。

●　染细胞质，但不会进入细胞核内。可以通过细胞核的边界对其进行形态学上的观察。例如，适用于活细胞中血细胞的细胞核形态观察。

●　可使用DAPI滤光片进行检测，且能够与GFR和RFP等绿色或红色荧光物质同时使用。

●　CytoSeeing的可视化不会影响细胞功能。

●　通过培养基或PBS清洗摄入细胞的CytoSeeing，可从细胞中去除CytoSeeing。

●　去除CytoSeeing后，可直接用于其他检测。

●　可用于贴壁细胞与悬浮细胞。

与现有的细胞质染色试剂比较

染色试剂	细胞质染色	判别细胞核形态	导入细胞内所需时间	Wash-out
CytoSeeing	○	○	3~9 min	○
T公司试剂	○	×	15 min~1 h	×
A公司试剂	○	×	15 min~1 h	×

◆产品概述

●　分子式：C₁₇H₁₂N₃

●　分子量：258.11

●　纯度：≧97％

●　激发/荧光波长（Ex/Em）^*1：345 nm/456 nm

●　可溶性：DMSO^*2

*1 可通过DAPI滤光片进行观察。

*2 建议使用10 mM作为母液。

◆操作方法概要

1. 取适量细胞进行培养；

2. 添加CytoSeeing溶液至培养基中使终浓度为10 μM~50 μΜ；

3. 在适合细胞的温度下孵育几分钟；

4. 使用荧光显微镜进行观察；

5. 去除CytoSeeing时，添加不含CytoSeeing的新鲜培养基清洗。

◆应用实例

使用CytoSeeing对CHO细胞进行染色

使用CytoSeeing（10 μM）对CHO细胞进行染色30 min。整个细胞质（cytoplasm）被染色，可以通过观察边界来观察细胞核的形态。

在A549细胞中CytoSeeing的时间依赖性摄取和分布

a）添加CytoSeeing（10 μM）至细胞中，并孵育。仅需9 min，CytoSeeing已被充分摄入到细胞内。

b）使用CytoSeeing（10 μM）染色细胞后，更换到不含CytoSeeing的培养基中孵育。仅需30 min CytoSeeing便脱离细胞。