突变 S Taq 酶

Taq Mut S

◆原理

 

   无

◆优点・特色

● Taq Mut S 是 DNA 修复系统的酶，可以识别错配碱基并且与之结合。

● Taq Mut S 来源于水生栖热菌，在０℃~70℃ 具有热稳定性，即便在高温也能保持活性并且和 DNA 结合。

● Taq Mut S 可以高效的结合１~４碱基的缺失（或者插入），以及 GT、CT 和 AG 的错配碱基对，因此可用于检测上述的突变。

    利用这种特异性结合的活性，可用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析突变，也可以在固相上进行分析。

● 与常规基于 PCR 进行检测基因突变的方法，生物芯片检测，测序方法等相比，该方法简单，快速。

 

产品中包括 1 mL 10× Taq MutS 缓冲液。 

来源	Thermus aquaticus
分子量（M.W）	89.3 kDa
浓度	1 μg/μL
保存条件	20 mM Tris-HCl(pH 7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50%(v/v) 甘油
酶反应条件	100 mM KCl, 50 mM Tris-HCl(pH 8.5), 20 mM MgCl2, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 2% 甘油, 65℃

◆案例・应用

合成的 36 bp DNA 进行电泳。Lane 2~5 与 Lane 6~13 都与 Taq Mut S 发生特异性结合，但是结合的情况有差别。Lane 2~5 是 1~4 碱基缺失，Lane 6~13 是碱基错配。

6%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳， SYBR® Gold 染色。

结合测试：20 μL 反应液，65℃ 反应 30 分钟，0.5 μg 的本产品能够结合不少于 50%（36 bp 的合成 DNA 100 ng，该合成 DNA 有１个碱基缺失）

 

结合特异性检测：

● ３μg本产品和 0.5 μg 质粒 pBRa322 在 37℃ 反应 16 小时，进行琼脂糖电泳（0.8% 琼脂糖Ｓ）。

● 结果显示不能检测 oc-DNA 。

● ３μg本产品和 0.5 μg 质粒 λDNA 在 37℃ 反应 16 小时，进行琼脂糖电泳（0.8% 琼脂糖Ｓ）。

● 结果显示不能检测降解的 λDNA 。

● ３μg本产品和 2 μg 底物 RNA 在 37℃ 反应 16 小时，进行琼脂糖电泳（0.8% 琼脂糖Ｓ）。

● 结果显示不能检测降解的 RNA 。