EnSens® 蛋白酶药物筛选 EnSens® Protease Activity Kit

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EnSens® 蛋白酶药物筛选                              EnSens® Protease Activity KitEnSens® Protease Activity Kit

EnSens® 蛋白酶药物筛选

EnSens® 技术是新型、便捷使用的荧光法蛋白酶活性检测技术,不依赖于 FRET、荧光蛋白和免疫荧光,可广泛用于各种荧光实验,从标准的荧光酶标仪到活细胞荧光显微镜。EnSens® 能够完整的识别位点序列,三级结构,极大增强选择性,产生更多相关和高质量的筛选候选物。EnSens® 底物是重组和可调节的,可以快速研发出新型和选择性的底物

◆原理


EnSens® 蛋白酶药物筛选                              EnSens® Protease Activity Kit


●  每个 EnSens® 底物(蓝色)设计成具有可被蛋白酶特异性识别的位点和隐蔽的染料结合位点。

  同类的酶(红色)清除 EnSens® 底物会暴露染料结合的位点。

  分子马达染料(绿色)不会显示荧光,除非结合到 EnSens® 底物,才会发出红外信号

  (激发/发射波长:635/655 nm)(表明受到较少的背景干扰)



◆优点、特色


● 选择性:靶向特异性的蛋白酶底物:底物可以完整的整合到识别的位点序列,产生更多相关和高质量的活性化合物。

● 底物是重组的,具有可调节性,可以快速研发新型和选择性的底物。

● 底物和基于 scFV 蛋白在体内外具有高稳定性。

● EnSens 远红外荧光团(FRF 染料)不发生光淬灭,可保持荧光强度 48 小时。

● 更长的发射波长(665 nm)减少了其他检测部件的干扰。

● 底物和荧光团是分离的,所以荧光团可以随时添加到反应液中。

● 不会发生能量转移,只发生少量的自淬灭。

● 标准的酶标板或者试管荧光计就足够了。

● 建立了可用流式细胞仪,标准和3D细胞培养用荧光显微镜检测活细胞的流程。

● 可快速便捷将 RFU 读数转换成反应速率,Kcat,Km,IC50等。

● 高信噪比:6-30X

● 需要的酶和底物的浓度更低,同时也意味着能够发现更具竞争性的抑制剂活性化合物。

● 对 pH 值,盐浓度/溶剂的变化不敏感。

● 底物和染料具有高溶解性。



◆案例、应用


EnSens® 蛋白酶药物筛选                              EnSens® Protease Activity Kit


EnSens® 蛋白酶药物筛选                              EnSens® Protease Activity Kit

◆产品


产品编号

产品名称

规格

032014_08

 EnSens ADAM10 Activity Detection Kit

   25孔/96孔/384孔

022315_08

 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for ADAM10 Activity Tracking

   25孔/96孔

032014_09

 EnSens ADAM17 Activity Detection Kit

   25孔/96孔/384孔

022315_09

 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for ADAM17 Activity Tracking

   25孔/96孔

032014_01

 EnSens MMP-2 Activity Detection Kit

   25孔/96孔/384孔

022315_01

 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for MMP-2 Activity Tracking

   25孔/96孔

032014_10

 EnSens MMP-3/MMP-10 Activity Detection Kit

   25孔/96孔/384孔

022315_10

 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for MMP-3/MMP-10 Activity Tracking

   25孔/96孔

032014_02

 EnSens MMP-9 Activity Detection Kit

   25孔/96孔/384孔

022315_02

 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for MMP-9 Activity Tracking

   25孔/96孔

032014_11

 EnSens MMP-13 Activity Detection Kit

   25孔/96孔/384孔

022315_11

 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for MMP-13 Activity Tracking

   25孔/96孔

032014_03

 EnSens MMP-14 Activity Detection Kit

   25孔/96孔/384孔

022315_03

 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for MMP-14 Activity Tracking

   25孔/96孔

032014_04

 EnSens MMP-25 Activity Detection Kit

   25孔/96孔/384孔

022315_04

 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for MMP-25 Activity Tracking

   25孔/96孔

032014_06

 EnSens Thrombin Activity Detection Kit

   25孔/96孔/384孔

022315_06

 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for    Thrombin Activity Tracking

   25孔/96孔

032014_07

 EnSens Factor Xa Activity Detection Kit

   25孔/96孔/384孔

022315_07

 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for Factor Xa Activity Tracking

   25孔/96孔

032014_05 

 EnSens Furin Activity Detection Kit

   25孔/96孔/384孔

022315_05 

 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for Furin    Activity Tracking

   25孔/96孔



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荧光法检测蛋白酶活性技术:  EnSens® vs. FRET/TRF/FLT/AMC


EnSens®

FRET/TRF/FLT/AMC

EnSens 对特异性蛋白酶具有选择性;能够结合到完全识别的序列上。

底物短。不具有选择性或者生理相关性。

EnSens 具有重组性&可调节性,可以快速研发新型和选择性的底物。

设计多样性的底物有局限性,需要具备一定经验才能研发新的底物。

EnSens远红外荧光团(FRF染料)不发生光淬灭,可保持荧光强度48小时。

荧光团比 EnSens 更容易发生光淬灭。

更长的发射波长(665nm)减少了其他检测部件的干扰。

很多荧光团的发射波长短,容易受到干扰。

建立了可用流式细胞仪,标准和3D细胞培养用荧光显微镜检测活细胞的流

程。

不容易运用到细胞或者体外实验。

需要的酶和底物的浓度更低,同时也意味着能够发现更具竞争性的抑制剂活性

化合物。

需要比EnSens更高浓度的酶和底物。

底物和荧光团是分离的,所以荧光团可以随时添加到反应液中。

底物和荧光团是一体的,一旦猝灭,就不能再使用。

可快速便捷将 RFU 读数转换成反应速率,Kcat ,Km,IC50 等。

需要复杂的数据处理。

标准的酶标板或者试管荧光计就足够了。

涉及使用繁琐/价格昂贵的仪器。

高信噪比:6-30X

比 EnSens 相比,背景值高。

不会发生能量转移,只发生最少量的自淬灭。

游离的荧光团掩饰了能量转移(自淬灭)

底物和染料具有高溶解性。

低溶解性。

底物和基于 scFV 蛋白在体内外具有高稳定性。

在体内外稳定性有限。

对 pH 值,盐浓度/溶剂的变化不敏感。

对 pH 值变化敏感


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
032014_08 EnSens® Protease Activity Kit
EnSens® 蛋白酶药物筛选
分别有25/96/384孔
022315_08 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for ADAM10 Activity Tracking 25孔/96孔
032014_09 EnSens ADAM17 Activity Detection Kit 25孔/96孔/384孔
022315_09 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for ADAM17 Activity Tracking 25孔/96孔
032014_01 EnSens MMP-2 Activity Detection Kit 25孔/96孔/384孔
022315_01 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for MMP-2 Activity Tracking 25孔/96孔
032014_10 EnSens MMP-3/MMP-10 Activity Detection Kit 25孔/96孔/384孔
022315_10 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for  25孔/96孔
032014_02 EnSens MMP-9 Activity Detection Kit 25孔/96孔/384孔
022315_02 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for MMP-9 Activity Tracking 25孔/96孔
032014_03 EnSens MMP-14 Activity Detection Kit 25孔/96孔/384孔
022315_03 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for MMP-14    Activity Tracking 25孔/96孔
032014_04 EnSens MMP-25 Activity Detection Kit 25孔/96孔/384孔
022315_04 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for MMP-25    Activity Tracking 25孔/96孔
032014_06 EnSens Thrombin Activity Detection Kit 25孔/96孔/384孔
022315_06 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for    Thrombin Activity Tracking 25孔/96孔
032014_07 EnSens Factor Xa Activity Detection Kit 25孔/96孔/384孔
022315_07 EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for Factor Xa Activity Tracking  25孔/96孔
032014_05 EnSens MMP-25 Activity Detection Kit 25孔/96孔/384孔
022315_05   EnSens Fluorescent 3D Live Cell Imaging Kit for Furin    Activity Tracking 25孔/96孔