追加PA tag系列磁珠

MagCapture™ HP抗PA tag抗体磁珠

PA tag系统是在日本开发并使用的利用多肽标签（12个氨基酸残基）与大鼠单克隆抗体（NZ-1）结合的亲和纯化标签系统1）。NZ-1对PA tag具有高亲和性和特异性，通过免疫沉淀可一步纯化出高纯度的PA tag融合蛋白2）。它还可以应用于蛋白印迹，流式细胞术，免疫细胞染色，利用PA tag洗涤溶液，可以简单地回收使用过的磁珠1,3）。近年来，通过解析PA tag和NZ-1复合物的晶体结构，明确了PA tag标记β-转角的方法4）。利用该特点还发表了《将PA tag插入膜蛋白环区中的应用》的应用文章4）。 　　这一次，Wako推出了抗PA tag抗体固相化的磁珠。可用于免疫沉淀法中PA tag融合蛋白的纯化和检测。

 

◆特点

●　非特异性结合少

●　可对PA tag进行竞争性洗脱、酸洗脱或2 mol/L MgCl₂溶液洗脱

●　无需离心

●　可回收利用

 

◆数据

重组PA tag融合EGFP蛋白的回收实验

确认了对K562细胞裂解液中表达的PA tag融合EGFP蛋白的回收性能。结果表明，可在各种洗脱条件下纯化得到高纯度的重组PA tag融合EGFP蛋白。

 

抗PA tag抗体磁珠的回收实验

　　

确认了抗PA tag抗体磁珠可再回收性能。结果表明，即使回收使用三次，也不会降低回收性能，可提取到重组PA tagg融合EGFP蛋白。另外，回收使用了PA tag Washing Solution［产品编号：169-27261］。

 

PA tag肽竞争性洗脱次数的研讨实验

　　

研讨了是否能通过多次重复竞争性洗脱，提高回收量。结果表明，通过多次重复PA tag的竞争性洗脱，可以提高重组PA tag融合EGFP蛋白的回收量。

◆产品列表

产品编号	产品名称	规格	包装
137-18751	MagCapture™ HP Anti PA tag Antibody Magnetic Beads MagCapture™ HP 抗PA tag抗体磁珠	免疫化学用	2 mL

◆相关产品（载体列表）

产品名称（载体名称）	抗性		规格	产品编号
	大肠杆菌抗性	真核细胞抗性
pCAG-Ble PA tag-C	Bleomycin		20 μg	161-26861
pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus			20 μg	168-26871
pCAG-Bsd PA tag-C	Blasticidin S		20 μg	165-26881
pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus			20 μg	162-26891
pCAG-Hyg PA tag-C	Hygromycin B		20 μg	165-26901
pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus			20 μg	162-26911
pCAG-Neo PA tag-C	Kanamycin	G418	20 μg	169-26921
pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus			20 μg	166-26931

[1]　Fujii, Y. et al. : Protein Expr. Purif., 95, 240（2014）.

[2]　藤井勇樹 他 : 蛋白質科学会アーカイブ, 7, e 075（2014）.

[3]　Kaneko, M. K. et al. :Biochem. Biophys. Res. Commun., 432, 40（2013）.

[4]　Fujii, Y. et al. : J. Cell Sci., 129, 1512（2016）.