多聚ADP-核糖基化修饰[PARylation：Poly(ADP-ribosyl)ation]
一种重要的翻译后修饰
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图：多聚ADP-核糖基化修饰和PAR去除的原理示意图（源自N.J. Curtin & C. Szabo; Nat. Rev. Drug Discov. 19, 711 (2020)）
多聚ADP-核糖基化修饰[PARylation：Poly(ADP-ribosyl)ation]，是一种翻译后修饰过程（类似于磷酸化、甲基化或乙酰化等修饰），通过该过程，ADP-核糖的聚合物（ADP-核糖残基在2~200或以上的pADPr或PAR）可利用PAR聚合酶（PARP）酶共价结合至核蛋白上。多聚ADP-核糖基化的翻译后修饰[PARylation：Poly(ADP-ribosyl)ation]在细胞生理学和应激反应中发挥着重要的作用。这种修饰由多聚ADP-核糖聚合酶（PARPs，也称为ARTDs）的家族成员进行催化。它还参与许多生物学进程，包括基因组稳定性维持、DNA损伤反应、DNA修复、复制和转录、染色质重塑、应激反应、细胞代谢和细胞死亡的调控。此外，PARPs在癌症治疗中是具有应用潜力的靶点，可作为化疗增敏剂与传统的DNA损伤化疗结合使用，也可以单独作为药物应用于缺乏同源重组的肿瘤。
◆多聚ADP-核糖聚合酶（PARPs）
多聚ADP-核糖（PAR）对核蛋白的翻译后修饰，主要由多聚ADP-核糖聚合酶1（PARP-1/ARTD1）催化，少部分以NAD+为底物，由其他的多聚ADP-核糖聚合酶进行催化。PARP-1是一种高含量且高度保守的、呈组成性表达的蛋白。然而，其催化活性主要取决于DNA单链或双链断裂的出现，这种断裂的出现可以被该酶的DNA结合结构域中的两个锌指所识别。
PARP-1被DNA链断裂选择性激活后，会催化PAR的长支链添加至各种核蛋白上，尤其是PARP自身。在DNA损伤的活细胞所形成的PAR量与细胞损伤程度相称。在DNA损伤的条件下，PAR会发生急剧的衰变，半衰期只有几分钟，这是因为PAR被多聚ADP-核糖水解酶（PARG）迅速水解并转化为游离的ADP-核糖。
除自动修饰的PARP-1外，还有许多蛋白已被认定为多聚ADP-核糖基化修饰的靶蛋白（受体），其中包括染色质-结构蛋白DEK。更重要的是，已表明PAR是以非共价但特异性的方式与多种蛋白质结合的。PAR这种非共价结合与特异性结合的蛋白（即XPA、p53、WRN）之间有着高亲和力（nM级），其同时取决于PAR链长和结合蛋白，表明其中存在着一种“PAR代码”。
如上所述，PAR不仅参与调节细胞存活和细胞死亡的程序，还被发现可以调节与PARP家族新成员相关的越来越多的其他生物学进程，包括转录调节、细胞分裂、细胞内运输、炎症和能量代谢等进程。
参考文献：
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1. |
Functions of PARylation in DNA Damage Repair Pathways: H. Wei & X. Yu; Gen. Prot. Bioinform. 14, 131 (2016) |
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2. |
In Vivo Level of Poly(ADP-ribose): M. Miwa, et al.; Challenges 9, 23 (2018) |
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3. |
The Enigmatic Function of PARP1: From PARylation Activity to PAR Readers: T. Kamaletdinova, et al.; Cells 8, 1625 (2019) |
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4. |
Novel insights into PARPs in gene expression: regulation of RNA metabolism: Y. Ke, et al.; Cell. Mol. Life Sci. 76, 3283 (2019) |
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5. |
Poly(ADP-Ribose) Glycohydrolase (PARG) vs. Poly(ADP-Ribose) Polymerase (PARP) – Function in Genome Maintenance and Relevance of Inhibitors for Anti-cancer Therapy: D. Harrision, et al.; Front. Mol. Biosci. 7, 191 (2020) |
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6. |
Poly(ADP- ribose) polymerase inhibition: past, present and future: N.J. Curtin & C. Szabo; Nat. Rev. Drug Discov. 19, 711 (2020) |
◆用于PAR & PARP研究的高质量试剂
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标准抗体：抗多聚ADP-核糖[PAR]，mAb（10H） |
可提供批量包装的产品！ |
在PARP领域具有新进展的大部分研究，特别是与酶的催化活性相关的，都是得益于新型ADP核糖检测试剂的开发。几十年来，这个领域一直依赖于抗PAR单抗（产品编号：AG-20T-0001），这种单克隆抗体可以与长度超过10个ADP核糖单位的PAR链结合，甚至可以在完整细胞水平上通过免疫荧光对多聚ADP-核糖（PAR）可视化。因此，这种抗PAR（10H）抗体被认为是多聚ADP-核糖基化修饰领域的标准抗体，并已刊登于数百种出版物中。这种抗体目前已应用于western blot、免疫组化、免疫细胞化学和流式细胞术的研究中。该抗体可以识别由多种PARP多聚ADP-核糖聚合酶合成的多聚ADP-核糖，如人、小鼠、大鼠或果蝇的PARP酶。
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图：使用了抗PAR（10H）的典型western blot图。该图显示U937细胞对H2O2有着剂量依赖性，且使用H2O2诱导多聚ADP-核糖基化（PARP-1激
图：活），在10 min时检测到的PARP-1激活阈值为200 mM。根据对照泳道，表明PARP-1和PKA在相同实验条件下的蛋白水平不变。
图：（A. Brunyanszki, et al.; Mol. Pharmacol. 86, 450 (2014)）
◆产品列表
高活性PARPs＆PARG
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产品编号 |
产品名称 |
包装 |
产品描述 |
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AG-40T-0010 |
PARP-1 [ARTD1] (catalytic domain) (human) (rec.) (His) 重组人PARP-1 [ARTD1]（催化结构域）（His标签） |
20 µg |
人PARP-1 [ARTD1]（aa 656-1014）与MYC 和His-tag结合。 在Sf21细胞中产生。活性：形成多聚ADP-核糖 需要约50 ng。 |
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AG-40T-0011 |
PARP-1 [ARTD1] (human) (rec.) (His) (high purity) 重组人PARP-1 [ARTD1]（His标签）（高纯度） |
10 µg |
人全长PARP-1 [ARTD1]与MYC和His-tag结 合。在Sf21细胞中产生。活性：≥1200 U/mg 蛋白。 |
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AG-40T-0012 |
PARP-2 [ARTD2] (mouse) (rec.) (His) (high purity) 重组人PARP-2 [ARTD2]（His标签）（高纯度） |
10 µg |
小鼠全长PARP-2[ARTD2]与His-tag结合。在 Sf21细胞中产生。活性：≥600 U/mg蛋白。 |
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AG-40T-0013 |
PARP-3 [ARTD3] (human) (rec.) (His) (high purity) 重组人PARP-3 [ARTD3]（His标签）（高纯度） |
10 µg |
人全长PARP-3[ARTD3]与HA-tag和His-tag结 合。在Sf21细胞中产生。活性：10 U/mg蛋白 （仅指单ADP-核糖基转移酶活性）。 |
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AG-40T-0015 |
PARP-1[ARTD1](E988K Mutant) (human) (rec.) Control 重组人PARP-1 [ARTD1]（E988K 突变）对照 |
10 µg |
人全长PARP-1的失活突变E988K与HA-tag和 His-tag结合。在Sf21细胞中产生。活性：野生 型PARP-1的0.5%。 |
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AG-40T-0022 |
PARG (human) (rec.) (His) (highly active) 重组人PARG（His标签）（高活性） |
2 µg |
人PARG与His-tag结合。 在Sf21细胞中产生。活性：多聚ADP-核糖的降 解实验需要约100 ng。 |
特异性PARP抗体
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产品编号 |
产品名称 |
包装 |
产品描述 |
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AG-25T-0001 |
anti-PARP-1 [ARTD1] (mouse), pAb 抗小鼠聚ADP核糖聚合酶-1[ARTD1]多抗 |
100 µL |
可识别小鼠PARP-1[ARTD1]。与人PARP-1的 交叉反应较弱。适用于ICC、IHC、IP和 Western blot。 |
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AG-25T-0002 |
anti-PARP-1 [ARTD1] (human), pAb 抗人聚ADP核糖聚合酶-1[ARTD1]多抗 |
100 µL |
可识别人PARP-1[ARTD1]。与小鼠、猴PARP- 1的交叉反应较弱。适用于ICC、IHC、IP和 Western blot。 |
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AG-25T-0003 |
anti-PARP-2 [ARTD2] (mouse), pAb 抗小鼠聚ADP核糖聚合酶-2[ARTD2]多抗 |
100 µL |
可识别小鼠PARP-2[ARTD2]。与人PARP-2的 交叉反应较弱。适用于ICC、IHC、IP和 Western blot。 |
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AG-20T-0004 |
anti-PARP-10 [ARTD10] (human), mAb (5H11) 抗人PARP-10 [ARTD10]单抗（5H11） |
1 mL |
可识别抗原表位在aa 256-407之间的，包含 甘氨酸富集区的人PARP-10 [ARTD10]。适用 于ICC、IP和Western blot。 |
PARPs＆PARG的小分子调节剂
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产品编号 |
产品名称 |
包装 |
产品描述 |
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SYN-1190 |
AS-703026 |
1 mg |
具有选择性、非竞争性和口服生物有效性的 MEK1/2抑制剂，可通过caspase-3和PARP裂 解在多发性骨髓瘤细胞中诱导凋亡。 |
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5 mg |
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10 mg |
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50 mg |
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100 mg |
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SYN-3046 |
AZ9482 |
1 mg |
强效和选择性PARP抑制剂（PARP- 1、-2、-3、-6，TNKS1/PARP-5a和TNKS2对 应的IC50分别为1、1、46、640、9和160 nM）。 |
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5 mg |
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10 mg |
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50 mg |
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100 mg |
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BVT-0079 |
Benadrostin |
500 µg |
稀有的天然PARP抑制剂（IC50=35 μM）。 |
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1 mg |
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AG-CR1-0037 |
DPQ |
1 mg |
细胞渗透性强、有效的PARP-1抑制剂（IC50= 40 nM）。对PARP-2的效力比PARP-1低10倍 左右。 |
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5 mg |
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AG-CR1-3706 |
GeA-69 |
1 mg |
针对多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶14（PARP-14 M2）（Kd=0.86 µM）的macrodomain结构 域2的强效和选择性变构抑制剂。PARP-14是一 种与炎症性疾病和多种癌症相关的抗凋亡促活 蛋白。 |
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AG-CN2-0481 |
Genipin 京尼平 |
25 mg |
诱导PARP裂解和诱导由caspase-3-、 caspase-9介导的细胞凋亡。 |
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100 mg |
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500 mg |
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AG-CR1-0024 |
1,5-Isoquinolinediol 1,5-异喹啉二醇 |
5 mg |
细胞渗透性强、有效的PARP-1抑制剂 （IC50=0.39 μM）。 |
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25 mg |
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100 mg |
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AG-CR1-3581 |
IWR-1-endo Wnt抑制剂 |
5 mg |
细胞渗透性强的Tankyrase-1/PARP- 5a（IC50=131 nM）和Tankyrase-2/PARP- 5b（IC50=56 nM）抑制剂（体外自 PARylation研究）。 |
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25 mg |
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CDX-M0565 |
MK-4827 tosylate MK-4827甲苯磺酸盐 |
10 mg |
PARP-1和PARP-2的口服生物有效性抑制剂 （IC50分别为3.8、2.1 nM）。 |
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50 mg |
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CDX-O0144 |
Olaparib 奥拉帕尼 |
100 mg |
细胞渗透性强的PARP-1和PARP-2的有效抑制 剂（IC50分别为5、1 nM）。抗Tankyrase- 1/PARP-5a的效果较弱（IC50=1.5 μM）。 |
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1 g |
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AG-CR1-0100 |
PJ-34 PARP抑制剂 |
1 mg |
细胞渗透性强的水溶性PARPs有效抑制剂 （EC50 = 20 nM）。能结合并抑制 Tankyrase-1/PARP-5a（IC50=1 μM）。 |
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5 mg |
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25 mg |
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AG-CR1-3646 |
PARG Inhibitor PDD00017273 聚（ADP-核糖）糖水解酶(PARG)抑制剂PDD00017273 |
1 mg |
有效的PARG抑制剂。抑制人重组PARG酶 （IC50=26 nM）以及用于细胞研究（IC50=37 nM）。对ARH3和PARP-1s无活性 （IC50>30 µM）。 |
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5 mg |