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308-16121
组胺测定试剂盒
显色法测定组胺
对于以生鱼(鲜鱼、冷冻鱼肉)为原料的食品来说,为了防止组胺过量而导致过敏性中毒,对于食品组胺浓度测定的管理是很重要的。
但是,以前的组胺检测需要耗时一天,检测费用高,需要使用大型检测设备。如果用显色法组胺检测系统,生鱼(鲜鱼、冷冻鱼肉)的组胺含量检测可以快捷地完成。
获奖履历:
2007年平成19年度日本水产学会水产技术奖
2014年平成26年度日本酱油协会日本酱油技术奖
◆特点
● 简单 由于酶的特异性高,无需使用强酸或有机溶剂,任何对象均可简单、安全地分析
● 迅速 如果是生鱼,检测和提取过程仅需要1个小时即可得到结果。
● 廉价 用廉价的试剂和检测器就可检测,免除了仪器成本。
◆测定原理
◆性能
● 特异性:即使样本中含有尸胺和腐胺等其他的胺类也不影响检测结果。
● 测定范围:0.4-6ppm生鱼样本换算10-150ppm(稀释25倍)。
● 测定时间:各试剂注入后约20分钟。
◆试剂盒组成
试剂名
主要成分
包装
酶
组胺脱氢酶
冷冻干燥品 6瓶
显色试剂
WST-8/1-Methoxy PMS
冷冻干燥品 6瓶
缓冲液
Tris缓冲液
24mL 3瓶
标准液(30mL)
组胺
30mL 1瓶
(60次测定:10次*6)(2-8℃保存)
注意:
● 测定时推荐分光光度计(在470nm处左右检测)
● 此试剂除了自主卫生检查和研究用途以外不可使用。
◆测定方法
● 下文所示显色法测定组胺实验手册
● 生鱼(分光光度计测定)
◆显色法测定组胺实验手册
实验器具准备
● 分光光度计
● 微量吸管
● 移液器(分注0.5mL溶液)
● 测量吸管
● 秒表
● 塑料试管2钟(容量约50mL、10mL)
● 试管架
● 水浴锅(设置到37℃)
● 遮光用的锡箔纸和箱子
● 天平(可测定1g类型)
● 粉碎机(研钵、匀浆器等)
● 漏斗
● 滤纸
● 旋涡混合器
● 冰浴装置
● 药匙
注意:因为组胺易吸附在玻璃上,试管等请使用塑料材质。
实验试剂准备
1、蒸馏水或者去离子水
2、0.1M EDTA·钠水溶液(pH=8):提取用溶液(将市售的0.5M EDTA溶液(pH=8)制备成5倍稀释液,可作为提取用溶液使用。)称取EDTA二钠二水合物37.2克,倒入1L容器。加入约750mL蒸馏水。搅拌混匀。用氢氧.化钾水溶液或者氢氧.化钠水溶液调节pH值到8.0。pH值是在搅拌停止时的状态测定。将配置好的溶液倒入1L量筒,用蒸馏水定容到1L。制备完毕后倒入新容器,在室温下保存。
操作流程
1.检测液的配制
①称取样本(生鱼)约10g置于粉碎机制成样本粉末。
②称量1g样本装入塑料试管(50mL容量)。
③向试管中加入24mL提取用溶液,用漩涡混合器使其拌匀。
④将试管置于沸水中20分钟,加入提取。
⑤将试管置于冰上冷却后,清理样本碎块,用漩涡混合器使其拌匀。
⑥用滤纸(No.5C)过滤步骤⑤的提取液。
⑦抽取滤液1mL以上作为检测液。
2.试剂的准备
①显色试剂(紫色标签)用11mL蒸馏水溶解。
②酶试剂(绿色标签)用6mL缓冲液(粉红色标签)溶解。
3.测定
①准备4个塑料试管,如下表所示加入各个试剂。
(1次测定情况)同一样本3次测定的情况:(样本,空白样本,标准液,显色对照)*3=12
②遮光处理,37℃孵育15分钟,然后用分光光度计测定各反应液的吸光度。
检测液Es
检测液空白Eb
标准液Estd
显色对照Ec
检测液(mL)
0.5
0.5
—
—
水(mL)
—
—
—
0.5
标准液(mL)
—
—
0.5
—
显色试剂(mL)
0.5
0.5
0.5
0.5
缓冲液(mL)
—
0.5
—
—
酶溶液(mL)
0.5
—
0.5
—
Es:检测液的吸光度 Eb:检测液空白的吸光度 Estd:标准液的吸光度 Ec:发光对照的吸光度
组胺浓度的计算方法
计算式:
样本液中的组胺含量(mg/L=ppm)=(Es-Eb)/(Estd-Ec)*4※1*25※2
样本液中的组胺含量(mg/L=ppm)=(Es-Eb)/(Estd-Ec)*100
※1 4:标准液的组胺浓度 ※2 25:样本溶液稀释25倍
产品编号 产品名称 产品规格 308-16121 组氨检测试剂盒Histamine Test 60次 温馨提示:不可用于临床治疗。风险提示:仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
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