溶酶体细胞毒理检测试剂盒 (红色荧光)(绿色细胞系)(微孔板)

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    • 货号:

      ENZ-51015-KP002

    • 供应商:

      上海金畔生物科技有限公司-中国

    • 英文名:

      Lyso-ID® Red cytotoxicity kit

    • 保存条件:

      -80℃

    • 规格:

      1Kit

    溶酶体积聚检测试剂盒

     

     

    ◆原理

     

    溶酶体细胞毒理检测试剂盒 (红色荧光)(绿色细胞系)(微孔板)-价格-厂家-供应商-上海金畔生物科技有限公司

      Lyso-ID ® Red cytotoxicity kit 阳 离子两亲性示踪剂(CAT)的染料,其以类似诱导磷脂药物的方式迅速分到细胞中。通过在探头(染料)上放置可滴定基团,形成此示踪。使标记物扩展到用弱碱 性细胞穿透物化合物预处理的细胞层状包涵体,如抗疟药氯喹。此外,溶酶体本身探头可用于突出溶酶体样细胞器,前提是其中的细胞产生包含大多数降解酶的溶酶 体,非酸性母体细胞器的空泡可以监测溶酶体降解功能的失常,使用药物类的阳离子示踪染料选择性地快速染色酸性细胞器,可用于监控活细胞内溶酶体的积聚和溶酶体样结构。可用于体外毒理学和临床前药物安全评估。

     

     

    ◆优点特色

     

      ● 包括迅速区分细胞和标记酸性细胞器的独特药物类染料的分析。

      ● 市面上唯一可用于长期监测细胞毒性作用的商业化产品。

      ● 高通量快速检测:染料仅需10-15分钟孵育。

      ● 无需与人工磷脂类似物共同培育进行检测,消除了混杂染料所造成伪像的可能性。

      ● 监控溶酶体积累长期药物治疗的反应。

      ● 定量分析,包括药物诱导,3个小时即可完成

     

    试剂盒组成

     

      10x双色检测试剂: 2 x 1 ml
      检测缓冲液: 20 ml

      Verapamil 对照:3 μmoles
      10x 分析缓冲液:15 ml

     

     

    ◆案例应用

     

    1、消除混杂染料所造成伪像

     

     

      在短短15分钟,LYSO-ID® 红染料培养消除了混杂染料所造成伪像的可能性。在24小时内U-2 OS细胞的荧光强度对应不同浓度氯喹。在药物治疗期间,把用LipidTox染料(绿线)染色的细胞放在荧光脂质中培育24小时。在药物培育后,用LYSO-ID® Red dye(red line)或Hoechst公司产品33342(蓝线)染色细胞15分钟。

     

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    2、激发和发射光谱

     

     

      ALYSO-ID® Red Detection Reagent;B是Hoechst 33342细胞核染色。

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    3、溶酶体扰动活性治疗学的高通量筛选

     

      使用传统的荧光酶标仪去估测在U-2 OS细胞里维拉帕米的毒性。用维拉帕米处理U-2 OS的细胞18小时后,用LYSO-ID® Red dye染色15分钟。高Z因子(0.87为100μM的维拉帕米)显示LYSO-ID® Red dye适合HTS的应用。Hoechst可用作复染剂,归一化控制细胞数目。

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     4、细胞的复合亮场和荧光显微镜图像

     

     

      U2-OS细胞(左),用64μM氯喹预先处理5小时的细胞(右)。用LYSO-ID® Red dye来染色细胞10分钟。用Hoechst 33342 染料进行细胞核复染。

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    5、使用LYSO-ID® Red dye来估测U-2 OS细胞药物诱导的溶酶体的累积

     

     

      这两种化合物是阳离子和两亲性,并且可观察到诱导溶酶体内磷脂异常累积,导致板层体的形成。由图中增加的红色荧光可知,U-2 OS细胞对磷脂诱导药物的处理,导致溶酶体数目和体积的增加。细胞核的复染用Hoechst 33342染料(蓝色)。

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    (A)未处理的细胞 (B)氯丙嗪,28µM (C)维拉帕米,200µM

     

     

    产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
    ENZ-51015-KP002 Lyso-ID® Red cytotoxicity kit (GFP-Certified®) for microplates
     溶酶体细胞毒理检测试剂盒(红色荧光)(绿色细胞系)(微孔板)
    1kit
     
    温馨提示:不可用于临床治疗。

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