品牌 | 其他品牌 | 货号 | 297-79201 |
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规格 | 90tests | 供货周期 | 一个月 |
主要用途 | 培养物上清的外泌体定性·定量分析 |
原装进口-PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)
培养物上清的外泌体定性·定量分析
本试剂盒含有细胞培养上清和体液样品纯化外囊泡定性分析,以及细胞上清样品外囊泡定量分析作用的酶联免疫测定试剂。
原装进口-PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)
培养物上清的外泌体定性·定量分析
◆特点
采用PS结合分子Tim4包被板
● 通过磷脂酰丝氨酸(PS)结合分子进行捕捉。※1
● 可检测出0.1μL培养上清液细胞外囊泡。
● 用纯化细胞外囊泡为标准品※2进行定量检测。
● 可通过WB法※3进行50~1,000倍高灵敏度检测。
↓↓
培养上清的细胞外囊泡高灵度定性·定量检测
※1比通过抗体包被板ELISA法能更好进行外囊泡的定性·定量分析。
※2请使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡标准品。
※3WB法:免疫印迹实验
zui优化试剂盒
● zui优化对照用一抗※4
● zui优化检测用二抗※5
● 采用显色法
↓↓
操作简便,实验重复性高
※4附加抗人CD63抗体。检测其他表面标记蛋白可利用任意小鼠单抗。
※5附加抗小鼠IgG抗体-HRP标记。
◆测定原理·产品概述
本试剂盒含有细胞培养上清和体液样品纯化外囊泡定性分析,以及细胞上清样品外囊泡定量分析作用的酶联免疫测定试剂。将能与外囊泡表面的磷脂酰丝氨酸(PS)特异性结合的蛋白包被到板上,细胞外囊泡与其反应固定后,用任意外囊泡表面标记蛋白的小鼠单抗作为检测一抗,试剂盒的HRP标记小鼠IgG抗体为二抗,可高灵敏度检测表面具有任意标记蛋白的细胞外囊泡。另外,试剂盒含有作为控制组检测一抗的抗人CD63小鼠单抗,可检测出人CD63阳性外囊泡。 通过MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS(Code No.: 293-77601)提纯细胞培养上清和体液样品中的外囊泡,通过本试剂盒对细胞外囊泡的表面标记蛋白进行免疫印迹实验,可50~1,000倍高灵敏度且简便进行检测。另外,从细胞上清中利用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡作为标准品,可对细胞上清外囊泡进行定量分析。 |
◆试剂盒组成
试剂盒组成(96次) |
包装 |
捕获外泌体96孔板 |
1个(8well×12strips) |
反应/洗涤缓冲液(10×) |
50mL×2瓶 |
外泌体结合增强子(100×) |
10mL×1瓶 |
对照一抗Anti-CD63(100×) |
120μL×1瓶 |
二抗HRP缀合抗小鼠IgG(100×) |
120μL×1瓶 |
TMB溶液 |
12mL×1瓶 |
终止液 |
12mL×1瓶 |
封板膜 |
4个 |
说明书 |
1本 |
◆案例
各种细胞培养上清纯化外囊泡定性分析
将各种细胞获得的纯化外囊泡1ng添加至板孔中,利用能检测表面标记蛋白CD9/CD63/CD81的一抗通过本试剂盒对各表面标记量进行定性比较。
另外,作为比较参考数据,将各细胞纯化150ng外囊泡进行电泳,利用能检测表面标记的CD9/CD63/CD81的一抗对各表面标记蛋白量进行定性分析。
ELISA系统和WB分析之间,已确认标记蛋白表达模式具有相关性!!
正常人血清纯化细胞外囊泡的定性分析
将从正常人血清的6个样品纯化的细胞外囊泡,通过BCA检测外囊泡膜上的蛋白浓度。分别添加40、20、10ng到孔中,用可识别表面标记CD63的对照组检测一抗测定OD值进行定性比较。
使用从体液样品纯化的细胞外囊泡具有良好的线性!!
细胞培养上清纯化细胞外囊泡的检测灵敏度参考数据
COLO201细胞培养上清纯化外囊泡,比较本试剂盒和免疫印迹实验的检测灵敏度。
免疫印迹实验和ELISA的检测灵敏度比较
(a),(b)使用各种抗CD63抗体(其他公司产品,Wako产品:Code No. 012-27063)进行免疫印迹实验检测灵敏度数据
样品:COLO201细胞培养上清纯化外囊泡(使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS纯化)
★:各抗体免疫印迹实验的检测限。
(c)Exosome ELISA Kit检测限数据
用本试剂盒对COLO201细胞源纯化外囊泡(使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS纯化)进行梯度稀释的样品以及缓冲液的空白值进行测定,制作COLO201标准曲线。利用此标准曲线可算出COLO201源纯化样品的zui低检测灵敏度。(测定各浓度点n=6,空白点n=12)
比免疫印迹实验可高灵敏度检测标记蛋白。
细胞培养上清样品的稀释线性(Linearity)参考数据
COLOC201细胞培养上清纯化外囊泡为标准品制作标准曲线,以COLO201细胞培养上清5个梯度稀释样品(1:100-1:1600)进行稀释线性进行评估。
COLO201细胞培养上清 |
|||||
CM量 (μL) |
稀释 |
测定值 (ng/mL) |
期望值 (ng/mL) |
预期百分比 |
|
比率 |
稀释因子(×) |
||||
0.0625 |
1:1600 |
0.000625 |
0.89 |
0.91 |
98.4 |
0.125 |
1:800 |
0.00125 |
1.82 |
1.72 |
105.6 |
0.25 |
1:400 |
0.0025 |
3.44 |
3.52 |
97.8 |
0.5 |
1:200 |
0.005 |
7.04 |
6.78 |
103.9 |
1 |
1:100 |
0.01 |
13.6 |
— |
— |
标准品:COLO201细胞源外泌体
(使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS纯化)
测定样品:COLO201细胞培养上清
一抗:试剂盒附带抗CD63抗体
良好的稀释线性,已确认可检测0.1μL培养上清的细胞外囊泡。
原装进口-PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)
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可代替超速离心法纯化标准高纯度细胞外囊泡。
产品编号 |
产品名称 |
保存 |
包装 |
293-77601 |
MagCapture™ 外泌体提取试剂盒PS MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS |
2-10℃ |
10次*1 |
*1 所使用的磁珠可重复再利用4次。内附充足缓冲液。若同一样品反复提取及不会发生污染的情况下,zui多可使用50次。
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