Tim-4 (mouse):Fc (human) (rec.) (Biotin)

Tim-4（小鼠）：Fc（人）（重组）（生物素标记）

 

◆产品详情

别名：TIM4，TIMD4

          T Cell Immunoglobulin and Mucin Domain-containing Protein 4；

          T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域蛋白4

产品类型：蛋白质

特性

来源/宿主： CHO细胞

序列：小鼠TIM-4（aa 22-279）的胞外域融合到人IgG1的Fc区的N端

交叉反应性：人，小鼠

应用

功能：

        -抑制受刺激的T细胞增殖

        -用于分离细胞外囊泡

标记：生物素标记

特异性：TIM-4可以用于分离表面含有磷脂酰丝氨酸（PS）的不同物种（人，小鼠，大鼠等）的细胞外囊泡。

生物活性：测量其对经抗CD3诱导刺激人T细胞增殖能力的抑制作用。Tim-4 (mouse):Fc (human)(rec.) 

                 (Biotin)结合磁珠可用于细胞外囊泡的分离。在钙离子依存的情况下，120ng蛋白足够分离

                 1010的细胞外囊泡颗粒。

分子量：~95kDa (SDS-PAGE)

纯度：≥95% (SDS-PAGE)

内毒素：<0.05EU/μg 蛋白 (LAL test; Lonza)

浓度：复溶后0.1mg/mL

复溶：100 µL灭菌水复溶

规格：溶于PBS中，经0.2μm过滤后冻干

其他产品数据：NCBI reference NP_848874.3: Tim-4 (mouse)

 

运输和保存

运输：冰块

短期储存：+4℃

长期储存：-20°C

保存建议：避免反复冻融。

使用/稳定性：收到产品后可在-20°C稳定保存6-12个月。

                      产品分装后可在-20°C稳定保存3个月。

 

◆产品描述

　　细胞外囊泡（EVs）由多种细胞释放到细胞微环境中，可以自发的运输或携带多种生物活性分子，如非编码RNA、miRNA、基因组DNA、脂质、生长因子和信号分子。EVs可分为外泌体（30～100nm）、微囊泡（100-1000 nm）和凋亡小体（＞1000 nm）。EVs不仅在正常生理过程的调节中起着重要作用，而且在疾病发病机制中起着重要作用，它的内含物能够反映分泌细胞的生理状态。目前正在研究和开发利用EVs进行治疗和诊断的方法。因此，开发理想的EVs分离和定量方法已经成为了一个活跃的研究领域。细胞外囊泡在其外部脂质双分子层上表达磷脂酰丝氨酸（PS）。

　　Tim-4 (T cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 4)是一种单链I型膜蛋白，属于免疫球蛋白超家族和TIM家族。Tim-4含有一个Ig样V型（免疫球蛋白样）结构域。它在树突细胞和巨噬细胞上表达。Tim-4在T辅助细胞2（Th2）的增殖中起重要作用。Tim-4以钙离子依赖的形式与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸（PS）结合，并且介导凋亡细胞的吞噬。

　　EV膜富含磷脂酰丝氨酸（PS），Tim-4可以结合EVs表面上的PS。华山力成教授团队开发了一种新型的亲和方法，通过将生物素亲和的Tim-4结合到链霉素磁珠上，在钙离子存在的情况下，进行EVs的分离。该方法可以用于替代目前最常用的超速离心法来进行EVs的纯化。这种全新的Tim-4亲和法与其他方法相比（如超离法、PEG沉淀法、抗体免疫沉淀法），可以获得更好的产率、纯度，以及分离多种群EVs。

参考文献

[1]　A novel affinity-based method for the isolation of highly purified extracellular vesicles:

        W. Nakai, et al.; Sci. Rep. 6, 33935 (2016)

[2]　High purity isolation and sensitive quantification of extracellular vesicles using affinity

        to Tim-4: T. Yoshida, et al.; Curr. Prot. Cell Biol. 77, 3.45.1-3.45.18 (2017)