高灵敏度的脂滴活细胞成像荧光染料

LipiDye^® <Lipid Droplet Green>

LipiDye^® 是一种可以对脂滴进行高灵敏染色的新型荧光素。与以往的脂滴检测色素Nile Red相比显示出高S/N比。活细胞和固定细胞均可使用。

※本产品用于研究，不可用于临床。

※本产品由名古屋大学转化生命分子研究所（ITbM）的研究成果商品化而来

Yamaguchi E., et al., Angew. Chem. Int. Ed., 54:4539～4543 (2015).

◆脂滴（Lipid droplet）的含义

脂滴（Lipid droplet）是在脂肪细胞（Adipocyte）中发现的巨大的中性脂质的结块，主要成分是甘油三酯（Triglyceride）和甾醇酯（Sterol Ester）的单分子层结构体。脂滴被认为是储存细胞内中性脂质的细胞器，并且有较多肥胖和疾病相关的报道。最近，除了脂肪细胞，还在肝细胞、平滑肌细胞、神经胶质细胞等各种细胞中发现了脂滴。这些发现明确了其不仅仅是作为中性脂质的储存场所，还有抑制代谢和基因表达调节等各种功能。非脂肪细胞的脂滴在1μm以下，与脂肪细胞中的10~100μm的脂滴相比较小。目渐多评论认为，脂滴是每个细胞中都存在的普遍的小型细胞器。实际上，近年来与脂滴研究相关的研究报告数量显著增加（据Pubmed的调查）。

◆脂类自噬（Lipophagy）：脂滴的自噬

自2009年Nature初次报道自噬是脂滴分解的过程之后*，脂类自噬（Lipophagy）作为自噬抑制的脂质代谢引起人们的关注。脂类自噬的形成以及活性化机制作为基于脂滴分解的脂质代谢的新过程，期待它可以有效地预防脂质异常的疾病。

＊Singh, et al., Nature., 458: 1131-1135． （2009）．

脂滴的模拟图	脂滴研究的时间推移

◆特点

●　LipiDye^® 是依存溶剂的分子极性发光的荧光素，选择性地吸收脂滴，使其在中性脂质中发出绿色的荧光。

●　由于其在水溶液中没有荧光，所以细胞质中的非特异性发光被明显抑制，与以往的色素相比具有高S/N比。

●　也可用于脂滴的实时成像和固定细胞中的观察。

●　具有很高的光稳定性，是实时成像的最佳选择。

●　低浓度的使用量（1 μM）就可获得足够地灵敏度，工作浓度（1 μM）几乎不显示细胞毒性。

◆化合物信息

●　IUPAC name: 1,3-Diphenyl-2-[4-(N,N-diphenylamino)phenyl]benzo[b]phosphole-P-oxide

●　化学式 : C₃₈H₂₈NOP

●　分子量 : 545.58 g/mol

●　溶解度 : 可溶于DMSO

◆波长

Excitation/ Emission: 405 nm / 521～530 nm

※LipiDye^® 用一般的绿色荧光色素使用的滤镜（FITC和GFP等）无法检测。请使用合适的滤镜。

检测试剂	活细胞	固定细胞	延时拍摄	多重染色	S/N比
LipiDye（本产品）	○	○	○	○	高
Nile Red	○	○	○	×	低
荧光色素B	○	○	×	○	中
脂肪染色试剂T	×	○	×	○	高
Oil Red O	×	○	×	×	低

◆使用案例

与Nile Red比较

脂肪细胞的脂滴用LipiDye^® 或者Nile Red染色，检测箭头（左图）指示范围的荧光强度（右图）。无论是灵敏度还是S/N比LipiDye^® 都比Nile Red高。脂滴中的荧光强度LipiDye^® 较强（distance 0～10 μm），细胞质中的非特异性荧光信号Nile Red较强（distance 10～20 μm）。

脂肪前驱细胞3T3-L1细胞的分化

用LipiDye^® 观察脂肪前驱细胞3T3-L1的分化过程。可以看出，分化过程中脂滴不断变大。

比较固定细胞

比较培养脂肪细胞用多聚甲醛固定后染色的情况（左图）和活细胞染色后用多聚甲醛固定的情况（右图），无论哪一种情况都可以高灵敏度地检测出脂滴。

※甲醇固定可能会影响到脂滴的构造，不建议使用。请使用多聚甲醛等的交联型固定试剂。

验证光稳定性

评价了LipiDye^® 和BODIPY493/503、Fluorescein、Prodan随着照射时间的光稳定性。LipiDye^® 与其他的荧光素相比显示出了较高的光稳定性。

验证细胞毒性

用MTT法评价LipiDye^® 的细胞毒性。LipiDye^® 几乎不影响细胞存活率。

产品编号	生产厂家	产品名称	包装
FDV-0010	FNA	LipiDye <Lipid Droplet Green>	0.1mg

◆相关产品

功能 类别	品牌	产品编号	产品名称	包装	用途
细胞 凋亡	Wako	016-16831	Anti PARP, Monoclonal Antibody, Affinity Purified     聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶 亲和纯化抗体	100 μg	细胞凋亡相关抗体
细胞 自噬	Wako	030-23703	Carbamazepine 卡马西平	50 g	Na+ 通道抑制剂，细胞自噬相关化合物
	Wako	047-18863	Dexamethasone 地塞米松	1 g	干细胞分化相关物质，细胞自噬相关化合物
	Wako	079-03811	GF 109203X, 90.0+ % (HPLC) 双吲哚马来酰亚胺 I （GF 109203X）	1 mg	蛋白激酶C选择性抑制剂，细胞自噬相关化合物
	Wako	148-09431	NF 449 Octasodium Salt	10 mg	嘌呤受体拮抗剂，对P2X1具有高选择性
	Wako	146-08533	Nocodazole 诺考达唑	50 mg	微管抑制剂。它具有抑制有丝分裂的作用。
	Wako	163-18614	Paclitaxel 紫杉醇	100 mg	微管抑制剂。它具有抑制有丝分裂的作用。
	Wako	011-22533	AICAR	1 g	AMPK激活剂，细胞自噬相关化合物
	Wako	058-06841	Epoxomicin	100 μg	蛋白酶抑制剂，细胞自噬相关化合物
	Wako	131-17671	3-Methyladenine 3-甲基腺嘌呤	1 g	细胞自噬抑制剂
	Wako	227-00753	Vinblastine Sulfate     硫酸长春碱	50 mg	细胞自噬抑制剂
	Wako	230-02341	(+)-Wortmannin, 97.0+ % (HPLC) 渥曼青霉素	2 mg	细胞自噬抑制剂
	Wako	092-05581	Itraconazole 伊曲康唑	5 g	细胞自噬诱导剂
	Wako	130-15485	Metformin Hydrochloride 盐酸二甲双胍	500 g	细胞自噬诱导剂
	Biomol	BML-PI102-0025	MG-132	25 mg	–
	Wako	188-02534	Rapamycin 雷帕霉素	50 mg	细胞自噬诱导剂
	Wako	205-17283	Thapsigargin 毒胡萝卜素	5 mg	细胞自噬诱导剂
	Wako	208-08243	Tunicamycin 衣霉素	50 mg	细胞自噬诱导剂
	ENZO	ENZ-KIT175-0050	CYTO-ID® Autophagy detection kit 2.0 Cyto-ID细胞自噬 检测试剂盒 2.0	50 tests	细胞自噬荧光检测
LC3 研究	Wako	034-17973	Chloroquine Diphosphate 磷酸氯喹	100 g	自噬抑制剂，LC3研究相关相关化合物
	Wako	164-17181	Plumbagin	1 g	诱导G2/ M细胞周期停滞，LC3研究相关相关化合物
	Wako	246-00921	Xanthohumol	5 mg	VCP抑制剂， LC3研究相关相关化合物
	Wako	013-22831	Anti Human Atg7, Rabbit	50 μL	LC3研究相关抗体

用途	产品编号	产品名称	规格	包装
脂滴染色	144-08811	Nile Red	病理研究用	25 mg
	140-08813			100 mg
	141-06822	Nile Blue Hydrogensulfate	病理研究用	25 g
	154-02072	Oil Red O 油红O	病理研究用	25 g
	192-04392	Sudan Ⅲ 苏丹Ⅲ	和光特级	25 g
	194-07652	Sudan Ⅳ 苏丹红IV	和光一级	25 g
	192-04412	Sudan Black B 苏丹黑B	和光一级	25 g