α1-2,3 甘露糖苷酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

底物特异性：
α1-2,3 甘露糖苷酶 |

α1-2,3 甘露糖苷酶是一种高度特异性的糖苷外切酶，催化水解寡糖末端 α1-2 和 α1-3 连接的 D-吡喃甘露糖残基。

产品来源

克隆自木薯细菌性萎蔫病菌（Xanthomonas manihotis），在 E. coli 中表达。

产品类别:
Exoglycosidases Products

应用:
Glycan Sequencing,
Recombinant Glycoprotein Expression,
Glycoprotein Analysis

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • P0729S     4    
        α1-2,3 Mannosidase P0729SVIAL 4 1 x 0.02 ml 32,000 units/ml
        GlycoBuffer 1 B1727SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
        Recombinant Albumin (Low-glycerol) B9203SVIAL -20 1 x 0.25 ml 10 mg/ml

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 10 µl 总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内将 1 nmol Manα1-3Manβ1-4GlcNAc-7-amino-4-methyl-coumarin （AMC）中超过 95% 的非还原性末端 α-D-甘露糖水解所需的酶量。

    反应条件

    1X GlycoBuffer 1
    Supplement with 100 µg/ml Recombinant Albumin (Low-glycerol)
    Incubate at 37°C

    1X GlycoBuffer 1
    5 mM CaCl2
    50 mM sodium acetate
    (pH 5.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    50 mM NaCl
    20 mM Tris-HCl
    1 mM EDTA
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    65°C for 10 minutes

    分子量

    实际: 90 kDa

    单位活性检测条件

    在 10µl 反应体系中，将两倍梯度稀释的 α1-2,3 甘露糖苷酶与 1 nmol AMC 标记底物在添加了 100 µg/ml BSA 的 1X GlycoBuffer 1 中进行温育。反应混合液在 37℃ 条件下温育 1 小时。通过薄层色谱法观察反应产物的分离情况（1）。

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    • α1-6 甘露糖苷酶

  • 注意事项

    1. 对硝基苯-α-D-吡喃甘露糖苷不是本酶底物。

  • 参考文献

    1. Wong-Madden, S.T. and Landry, D. (1995). Glycobiology. 5, 19-28.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Typical Reaction Conditions for  α1-2,3 Mannosidase (P0729)

  • 使用指南

    • Detailed Characterization of Several Glycosidase Enzymes
    • Glycobiology Unit Conversion Chart

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is a good positive control for this α1-2, 3 Mannosidase?
    2. How much exoglycosidase should be used?
    3. What are Glycosidases and their uses?
    4. Why have the NEB Glycosidase enzymes changed reaction buffers? What are the new reaction buffers and can I still use an enzyme with its old buffer? Where can I find the composition of the old buffers?
    5. Do detergents inhibit exoglycosidases/endoglycosidases?
    6. How much exoglycosidase should be used?

  • 实验技巧

    反复冻融会降低酶活性。推荐贮存温度为 4℃。

    1 µg 糖蛋白或 100 nM 寡糖反应 1 小时，酶的最佳起始量范围为 1-2 µl。

    对硝基苯-a-D-吡喃甘露糖苷不是本酶底物。