α2-3 神经氨酸苷酶 S |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

神经氨酸苷酶是乙酰神经氨酸水解酶（唾液酸酶）的俗称。α2-3 神经氨酸苷酶 S 是一种具有高度特异性的糖苷外切酶，可催化水解糖蛋白和寡糖上 α2-3 糖苷键连接的 N-乙酰神经氨酸残基。

特异性

α2-3 神经氨酸苷酶 S |

产品来源

该酶克隆自肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae），在 E. coli 中表达。

产品类别:
Exoglycosidases Products

应用:
Expression Systems,
Glycan Sequencing,
Protein Digestion,

Recombinant Glycoprotein Expression,

Glycoprotein Analysis

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • P0743S     -20    
        α2-3 Neuraminidase S P0743SVIAL -20 1 x 0.05 ml 8,000 units/ml
        GlycoBuffer 1 B1727SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
    • P0743L     -20    
        α2-3 Neuraminidase S P0743LVIAL -20 1 x 0.25 ml 8,000 units/ml
        GlycoBuffer 1 B1727SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内将 1 nmol Neu5Acα2-3Galβ1- 3GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glc-AMC 中超过 95% 的末端 α-Neu5Ac 水解所需要的酶量。

    反应条件

    1X GlycoBuffer 1
    Incubate at 37°C

    1X GlycoBuffer 1
    5 mM CaCl2
    50 mM sodium acetate
    (pH 5.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    50 mM NaCl
    20 mM Tris-HCl
    1 mM EDTA
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    65°C for 10 minutes

    分子量

    实际: 74000 Da

    比活度

    160,000 unit/mg

    单位活性检测条件

    在 10 μl 1X GlycoBuffer 1 反应体系中，将两倍稀释的 α2-3 神经氨酸苷酶 S 与 1 nmol AMC 标记底物进行温育。反应混合液在 37℃ 条件下温育 1 小时。通过薄层色谱法观察反应产物的分离情况（1）。

  • 相关产品

    相关产品

    • α2-3,6,8 神经氨酸苷酶
    • α2-3,6,8,9 神经氨酸苷酶 A

  • 注意事项

    1. 如需更大反应体积，可按比例扩大反应体系。
    2. 酶切底物不同，所需糖苷外切酶的量也不同。在 10–25 μl 的反应体系中，1 μg 糖蛋白或 100 nM 寡糖反应 1 小时，酶的起始量范围为 1–2 μl。如果酶切不完全，可让反应过夜。
    3. 如果 α2-3 神经氨酸苷酶 S 酶量过量，或温育时间过长（24 小时以上），可能会出现轻微的 α2-6 神经氨酸苷酶活性。

  • 参考文献

    1. Wong-Madden, S. T. and Landry, D. (1995). Glycobiology. 5, 19-28.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Typical Reaction Conditions for α2-3 Neuraminidase S (P0743)

  • 应用实例

    • Detailed Characterization of Antibody Glycan Structure using the N-Glycan Sequencing Kit

工具 & 资源

  • Web 工具

    • Glycan Analyzer

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What are Glycosidases and their uses?
    2. What is the difference between the four Neuraminidase enzymes sold by NEB: α2-3,6,8 Neuraminidase, α2-3,6,8,9 Neuraminidase A, α2-3 Neuraminidase and α2-3 Neuraminidase S?
    3. Can I use α2-3 Neuraminidase S in a double digest with other exoglycosidases and/or endoglycosidases?
    4. What is a good positive control for α2-3 Neuraminidase S?
    5. Does this enzyme require denaturing conditions to act on glycoproteins?
    6. What is a good method to re-purify a glycan or glycopeptide after exoglycosidase treatment?
    7. Do detergents inhibit glycosidases?
    8. Do the NEB Neuraminidase enzymes cleave both N-acetylneuraminic acid (Neu5Ac) and N-glycolylneuraminic acid (Neu5Gc) residues?
    9. How much exoglycosidase should be used?
    10. How much exoglycosidase should be used?

  • 实验技巧

    • α2-3 神经氨酸苷酶 S 可与 PNGase F、糖苷内切酶 H 和 O-糖苷酶（在天然或变性条件下）进行双酶切。
    • α2-3 神经氨酸苷酶 S 在添加 1% BME 和 0.5% SDS 后表现出正常活性。
    • 1 µg 糖蛋白或 100 nM 寡糖反应 1 小时，酶的最佳起始量范围为 1-2 µl。