α2-3,6,8 神经氨酸苷酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

α2-3,6,8 神经氨酸苷酶 |
 
神经氨酸苷酶是乙酰神经氨酸水解酶（唾液酸酶）的俗称。该酶可催化水解糖蛋白和寡糖的 α2-3、α2-6 和 α2-8 连接的 N-乙酰神经氨酸残基。

底物特异性：

α2-3,6,8 神经氨酸苷酶 |
α2-3,6,8 神经氨酸苷酶 |

产品来源

该酶克隆自产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens），在 E. coli 中过表达。

产品类别:
Exoglycosidases Products,
Proteome Analysis Products

应用:
Expression Systems,
Glycan Sequencing,
Proteomics,

Recombinant Glycoprotein Expression,

Glycoprotein Analysis

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • P0720S     -20    
        α2-3,6,8 Neuraminidase P0720SVIAL -20 1 x 0.04 ml 50,000 units/ml
        GlycoBuffer 1 B1727SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
    • P0720L     -20    
        α2-3,6,8 Neuraminidase P0720LVIAL -20 1 x 0.2 ml 50,000 units/ml
        GlycoBuffer 1 B1727SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指 10 µl 反应体系中，37℃ 条件下，5 分钟内将 1 nmol Neu5Acα2-3Galβ1-3GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glc-7-amino-4-methyl-coumarin（AMC）中超过 95% 的末端 α-Neu5Ac 水解所需要的酶量。

    反应条件

    1X GlycoBuffer 1
    Incubate at 37°C

    1X GlycoBuffer 1
    5 mM CaCl2
    50 mM sodium acetate
    (pH 5.5 @ 25°C)

    贮存溶液

    50 mM NaCl
    20 mM Tris-HCl
    5 mM EDTA
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    65°C for 10 minutes

    分子量

    实际: 43 kDa

    单位活性检测条件

    在 10 µl 1X GlycoBuffer 1 反应体系中，将两倍稀释的 α2-3,6,8 神经氨酸苷酶与 1 nmol AMC 标记底物进行温育。反应混合液在 37℃ 条件下温育 5 分钟。通过薄层色谱法观察反应产物的分离情况（3）。

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    • p0733-o-glycosidase

  • 参考文献

    1. Roggentin, P. et al. (1988). FEBS Lett. 238(1), 31-34.
    2. Guan, C., New England Biolabs unpublished observations.
    3. Wong-Madden, S.T. and Landry, D. (1995). Glycobiology. 5, 19-28.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Typical Reaction Conditions for α2-3,6,8 Neuraminidase (P0720)
    2. Endo-α-N-Acetylgalactosaminidase Application Note 1

  • 使用指南

    • Glycobiology Unit Conversion Chart

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can I use α2-3,6,8 Neuraminidase in a double digest with Endo H(Hf) or PNGase F?
    2. Is α2-3,6,8 Neuraminidase active at higher pH levels?
    3. How much exoglycosidase should be used?
    4. Do detergents inhibit exoglycosidases/endoglycosidases?
    5. What is a good positive control for α2-3,6,8 Neuraminidase?
    6. Why have the NEB Glycosidase enzymes changed reaction buffers? What are the new reaction buffers and can I still use an enzyme with its old buffer? Where can I find the composition of the old buffers?
    7. What are Glycosidases and their uses?
    8. Is it necessary to treat my glycoprotein concomitantly with Neuraminidase and O-Glycosidase?
    9. Do the NEB Neuraminidase enzymes cleave both N-acetylneuraminic acid (Neu5Ac) and N-glycolylneuraminic acid (Neu5Gc) residues?
    10. How much exoglycosidase should be used?

  • 实验技巧

    用 O-糖苷酶酶切时，切勿忘记添加神经氨酸苷酶。