SNAP-Cell® 647-SiR |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

该产品包含 30 nmol SNAP-Cell 647-SiR 底物，足以制备 10 ml 的 3 μM SNAP-tag 融合蛋白标记溶液。

SNAP-tag 蛋白标记体系能将目标蛋白以共价结合的形式，特异性地标记上任何分子。 SNAP-tag 来自人类 O6-烷基鸟嘌呤-DNA-烷基转移酶（hAGT）。 SNAP-tag 的底物通过苄基与鸟嘌呤或氯嘧啶基团 偶联荧光基团、生物素或微珠 。在标记反应中，底物的苄基部分被替换，与 SNAP-tag 形成共价结合。

该体系包括两个步骤：亚克隆并表达与 SNAP-tag 融合的目的蛋白；选择 SNAP-tag 底物 进行标记融合蛋白。 在 SNAP-tag 质粒的产品说明中 描述了 SNAP-tag 融合蛋白的表达。 有关利用 SNAP-tag 底物进行融合蛋白标记的信息如下所述。

图 1：表达 SNAP-tag 的 NIH/3T3 活细胞与线粒体氧化酶 8A（Cox8A-SNAPf）融合

SNAP-Cell® 647-SiR |

用 SNAP-Cell 647-SiR（红色）在 37℃ 条件下，5% CO2 中标记细胞 30 分钟。
图 2：在 pH 7.5 的缓冲液中将 SNAP-Cell 647-SiR 与 SNAP-tag 偶联后的激发光谱（虚线）和发射光谱。SNAP-Cell® 647-SiR |
图 3：SNAP-Cell 647-SiR 结构（MW 724.9 g/mol）
SNAP-Cell® 647-SiR |
产品类别:
SNAP-tag Substrates Products ,
Protein Labeling Products

应用:
SNAP Cell,
Pulse Chase,
In vivo Imaging,

Receptor Internalization,
Protein Localization,

Protein Labeling Snap Clip

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • S9102S     -20    
        SNAP-Cell® 647-SiR S9102SVIAL -20 1 x 30 nmol Not Applicable

  • 特性和用法

    需要但不提供的材料

    • 表达 SNAP-tag 融合蛋白的细胞
    • 组织培养材料和培养基
    • 转染试剂
    • 荧光显微镜及适用的滤光装置
    • DMSO

    激发

    645nm

    发射

    661nm

  • 注意事项

    1. 贮存条件：SNAP-Cell 647-SiR 应避光贮存于 -20℃（长期贮存）或 4℃（短期贮存，少于 4 周）。底物应避免光照和受潮。如果妥善贮存在 -20℃ 下，干燥贮存的底物至少可保持三年稳定，溶解在 DMSO 中时，至少可保持三个月稳定。

  • 参考文献

    1. Lukinavicius, G. et al. (2013). Nat. Chem. 5, 132-139.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Cellular Labeling (S9102)
    2. Labeling of Proteins in vitro (S9102)

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Cellular Imaging and Analysis FAQs
    2. We have recently ordered the SNAP-Cell 647-SiR and when it was resuspended in DMSO the solution didn’t change to a blue color like SNAP-Surface 649 and SNAP-Surface Alexa Fluor 647. Is there something wrong with the substrate?