SNAP-Surface® 488 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

该产品包含 50 nmol SNAP-Surface 488 底物,足以制备 10 ml 5 µM SNAP-tag 融合蛋白标记溶液。

SNAP-tag 蛋白标记体系能将目标蛋白以共价结合的形式,特异性地标记上任何分子。SNAP-tag 是一种基于哺乳动物 O6-烷基鸟嘌呤-DNA-烷基转移酶(AGT)的小蛋白。SNAP-tag 的底物是苄基嘌呤和苄基氯嘧啶的衍生物。在标记反应中,底物的苄基部分被替换,与 SNAP-tag 形成共价结合。

该体系包括两个步骤:亚克隆并表达目标蛋白为 SNAP-tag 融合蛋白,以及使用所选的 SNAP-tag 底物标记融合蛋白。在 SNAP-tag 质粒的产品说明中描述了 SNAP-tag 融合蛋白的表达。有关利用 SNAP-tag 底物进行融合蛋白标记的信息如下所述。

图 1:利用 pSNAP-ADRβ2 瞬时转染的 HEK293 活细胞

SNAP-Surface® 488 |
用 SNAP-Surface 488(绿色)标记细胞 30 分钟。

图 2:SNAP-Surface 488 结构(MW 841.9 g/mol)

SNAP-Surface® 488 |

图 3:在 pH 7.5 的缓冲液中将 SNAP-Surface 488 与 SNAP-tag 偶联后的激发光谱(虚线)和发射光谱(实线) SNAP-Surface® 488 |
产品类别:
SNAP-tag Substrates Products ,
Protein Labeling Products

应用:
Snap Surface Products,
Pulse Chase,
In vivo Imaging,

Receptor Internalization,
Protein Localization,

Protein Labeling Snap Clip

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • S9124S     -20    
        SNAP-Surface® 488 S9124SVIAL -20 1 x 50 nmol Not Applicable

  • 特性和用法

    需要但不提供的材料

    • 表达 SNAP-tag 融合蛋白的细胞。可在目标蛋白 N 端或 C 端融合 SNAP-tag,但请注意,标签需要暴露在细胞质膜胞外表面,以便利用 SNAP-Surface 488 进行标记。
    • 组织培养材料和培养基
    • 转染试剂
    • 荧光显微镜及适用的滤光装置
    • DMSO

    激发

    506nm

    发射

    526nm

  • 注意事项

    1. 贮存条件:SNAP-Surface 488 应避光贮存在 -20℃(长期贮存)或 4℃(短期贮存,少于 4 周)条件下。底物应避光和避免受潮。如果妥善贮存在 -20℃ 下,干燥贮存的底物至少可保持三年稳定,溶解在 DMSO 中时,至少可保持三个月稳定。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Cellular Labeling (S9124)
    2. Labeling Proteins in vitro (S9124)
    3. View the video “Fluorescent Labeling of COS-7 Expressing SNAP-tag Fusion Proteins for Live Cell Imaging” in the Journal of Visualized Experiments (JoVE)

  • 应用实例

    • Simultaneous Fluorescent Labeling of Proteins in Living Cells

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Comparison of SNAP-tag®/CLIP-tag™ Technologies to GFP
    • SNAP-tag® and CLIP-tag™ Substrate Selection Chart

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Cellular Imaging and Analysis FAQs

  • 问题解决指南

    • Labeling with SNAP-tag® Technology Troubleshooting Guide

  • 实验技巧

    添加 DMSO 后,使用移液枪吸打混匀至少 10-20 次,然后剧烈涡旋处理至少 1 分钟整,以确保底物完全溶解。

    在完全培养基中稀释底物后,使用移液枪吸打混匀至少 10 次,有助于降低背景。

    增加底物浓度及/或反应时间通常会导致背景较高,并且不一定会增加信噪比(SNR)。