Turbo E. coli 感受态细胞（高效级） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

大肠杆菌化学感受态细胞，适合高效级转化，且菌落生长迅速。

重点

  • 通过 laclq 严格控制表达，从而能够克隆潜在的毒性基因
  • 在琼脂平板上生长速度最快，在转化后 6.5 小时菌落可见
  • 去除了非特异性核酸内切酶 I（endA1）的活性，以获得最高质量的质粒制备
  • 抗 T1 噬菌体（fhuA2）
  • 适用于蓝白斑筛选，通过 β-半乳糖苷酶基因的 α-互补实现
  • 适用于 AmpR 质粒的 5 分钟转化流程
  • EcoKr–m–, McrBC–
  • K12 菌株
  • 将过夜培养的单菌落培养 4 小时后，即可分离提取 DNA
  • 无动物来源

基因型

F’ proA+B+ lacIq ∆lacZM15 / fhuA2  ∆(lac-proAB)  glnV galK16 galE15  R(zgb-210::Tn10)TetS  endA1 thi-1 ∆(hsdS-mcrB)5  

产品类别:
Cloning Competent Cell Strains Products

应用:
High-throughput cloning and automation solutions,
Transformation,
Fast Cloning: Accelerate your cloning workflows with reagents from NEB

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • C2984H     -80    
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        NEB® Turbo Competent E. coli (High Efficiency) C2984HVIAL -80 20 x 0.05 ml Not Applicable
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
    • C2984I     -80    
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        NEB® Turbo Competent E. coli (High Efficiency) C2984IVIAL -80 6 x 0.2 ml Not Applicable
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable

  • 特性和用法

    Antibiotic for Plasmid Selection

    用于质粒筛选的抗生素 使用浓度
    Ampicillin 100 µg/ml
    Carbenicillin 100 µg/ml
    Chloramphenicol 33 µg/ml
    Kanamycin 30 µg/ml
    Streptomycin 25 µg/ml
    Tetracycline 15 µg/ml

    货运单

    • Ships on dry ice

    抗生素耐药性

    • nit

  • 优势和特性

    Features

    • 生长速度最快，6.5 小时后可见菌落
    • 4 小时后可进行质粒制备
    • 对毒性基因的严格控制/表达 (F´lacIq)

    应用特性

    Turbo E. coli 感受态细胞（高效级） |
    DNA 对转化效率和菌落产量的影响：在转化反应中使用的最佳 DNA 量比通常认为的要低。使用纯化后的超螺旋 pUC19，在 100 pg-1 ng 范围内转化效率最高。但是，随着 DNA 用量增加到 100 ng，单次转化反应得到菌落总数会随之增加。
    DNA 对转化效率和菌落产量的影响：Turbo E. coli 感受态细胞（高效级） |
    在转化反应中使用的最佳 DNA 量比通常认为的要低。使用纯化后的超螺旋 pUC19，在 100 pg-1 ng 范围内转化效率最高。但是，随着 DNA 用量增加到 100 ng，单次转化反应得到菌落总数会随之增加。

    37℃ 条件下摇瓶中 NEB Turbo 与 DH5α 的生长曲线对比：Turbo E. coli 感受态细胞（高效级） |
    在 1 升烧瓶中，将 NEB Turbo 和 DH5α 冷冻原液（相同细胞密度）分别以 1:100 比例接种于 80 ml 液体培养基（每升 10 g 胰蛋白胨、5 g 酵母提取物、10 g NaCl、1 g MgCl2 和 1 g 葡萄糖，pH7.2）中。细胞在 37℃ 条件下生长，以 250 rpm 转速摇动。每 30 分钟测量 O.D.600，测量达到 16 小时。
    37℃ 条件下发酵罐中 NEB Turbo 与 DH5α 的生长曲线对比：Turbo E. coli 感受态细胞（高效级） |
    在 1 升发酵罐中，将过夜培养的 NEB Turbo 和 DH5α 培养物分别以 1:50 接种于 1 升 LB（每升 10 g 胰蛋白胨、5 g 酵母提取物、10 g NaCl，pH7.0）中。细胞在 37℃ 条件下生长。每 30 分钟测量 O.D.600，测量达到 9 小时。
    NEB Turbo 细胞生长和 DNA 产量：Turbo E. coli 感受态细胞（高效级） |
    将 pUC19 转化进 NEB Turbo 感受态大肠杆菌。将过夜培养的 6 个菌落（菌落大小为直径约 2.4 mm）接种到 30 ml LB/Amp 中，充分混匀后，在每支 25 ml 试管中分装 5 ml（相当于 5 ml LB/Amp 中 1 个菌落）。细胞在 37℃ 条件下生长，以 250 rpm 转速摇动。分别于生长 3、4、5、6、7、16 小时后，将 1 支试管置于冰上，测量其 O.D.600 值。通过将 1.5 ml 培养物离心 3 次（共 4.5 ml），最后将 DNA 洗脱到 50 μl EB 缓冲液中，进行小量制备。
    生长 4 小时后 DNA 产量对比：Turbo E. coli 感受态细胞（高效级） |
    分别将 pUC19 转化进 NEB Turbo E.coli、Invitrogen Mach1 和 DH5α 感受态细胞。将过夜培养的菌落（菌落大小：NEB Turbo 直径约 2.4 mm，Mach1 直径约 1.8 mm，DH5α 直径约 1.2 mm）接种于 25 ml 试管中的 5ml LB/Amp 中，在 37℃ 条件下以 250 rpm 转速摇动细胞。生长 4 小时后，测量细胞的 O.D.600 值，并将 1.5 ml 培养物离心 3 次（共 4.5 ml），最后将 DNA 洗脱到 50 μl EB 缓冲液中，进行小量制备。NEB Turbo 的 O.D.600 值为 3.08，Mach 1 的 O.D.600 值为 2.36，DH5α 的 O.D.600 值为 0.75。

    热激时间对 NEB Turbo E.coli 感受态细胞转化效率的影响：Turbo E. coli 感受态细胞（高效级） |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，热激时间的变化范围为 0 至 80 秒。
    DNA 温育时间对 NEB Turbo E. coli 感受态细胞转化效率的影响：Turbo E. coli 感受态细胞（高效级） |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，DNA 温育时间的变化范围为 0 至 40 分钟。
    细胞复苏培养基对转化效率的影响：Turbo E. coli 感受态细胞（高效级） |
    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl NEB Turbo E.coli 感受态细胞，不同反应使用不同的复苏培养基。NEB SOC Outgrowth 培养基的转化效率最高。

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    单独销售的组分

    • SOC Outgrowth 培养基

  • 注意事项

    1. 注意：本产品含危险物质 DMSO。处理前请先查看 MSDS。
    2. 贮存和处理：感受态细胞应在 -80℃ 条件下贮存。-20℃ 条件下贮存会显著降低转化效率。当细胞温度高于 -80℃ 时，即使不融化，细胞也会失去效率。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. High Efficiency Transformation Protocol (C2984)
    2. 5 Minute Transformation Protocol (C2984)

  • 使用指南

    • Additional E. coli Strain Genotypes
    • Chemical Transformation Tips
    • Competent E. coli Genome Sequences Tool
    • Genetic Markers
    • McrA, McrBC and EcoKI Strain Phenotypes
    • Restriction of Foreign DNA by E. coli K-12

  • 应用实例

    • Enhancing Transformation Efficiency

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Characteristics of Select E.coli Strains
    • Competent Cell Product Comparison
    • Competent Cell Selection Guide

  • Web 工具

    • Competitor Cross-Reference Tool
    • NEBcloner®

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Which competent cell strains are compatible with Gateway® Cloning?
    2. Does plasmid size affect colony size (C2984)?
    3. How long can I purify plasmid after the inoculation from a single colony using NEB Turbo competent E.coli (C2984)?
    4. How long should I incubate cells on ice after DNA has been added (NEB #C2984H and NEB #C2984I)?
    5. What are the strain properties (C2984)?
    6. What does the growth curve of NEB Turbo cells look like compared to DH5α?
    7. What is the difference between NEB #C2984H and NEB #C2984I?
    8. What is the optimal heat shock time for this strain (NEB #C2984H and NEB #C2984I)?
    9. Which strain of Competent E.coli should I use for general cloning?
    10. How should I calculate the transformation efficiency (C2984)?
    11. What are the solutions/recipes (C2984)?
    12. Can I store competent cells at -20°C instead of -80°C?
    13. Which kind of transformation tubes should be used?
    14. What volume of DNA can be added into competent cells?
    15. What is the shelf life for this strain (NEB #C2984H and NEB #C2984I)?
    16. Are NEB’s competent cells compatible with the “Mix & Go” protocol?
    17. How should I store SOC Outgrowth Medium? The SOC I received with my competent cells recommends storage at either room temperature or 4°C, however, when I purchase it as a stand alone product, it recommends storing it at 4°C. Which is better?
    18. How should fragments be prepared for assembly using NEBuilder HiFi?
    19. Are NEB Turbo Competent E. coli (High Efficiency) or NEB Turbo Electrocompetent E. coli recommended for cloning repetitive or unstable DNA?