EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶是 Taq DNA 聚合酶和温度敏感性核酸适配体抑制剂的混合物。这种抑制剂可与酶可逆结合，在温度低于 45℃ 时抑制聚合酶活性，而在正常的 PCR 循环条件下释放酶。此特性有助于在室温下建立反应体系。基于适配体的热启动机制的一个优点是无需单独的高温温育步骤来激活酶。EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶拥有先进的基于适配体的热启动机制活性，并随附经优化的反应缓冲液，堪称用于扩增重亚硫酸盐转化 DNA 的理想之选。

Taq DNA 聚合酶具有 5´ – 3´ 聚合酶活性（1、2、3）和 5´ 结构特异性核酸内切酶活性（4、5）。

EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶随附 5X EpiMark 热启动 Taq 反应缓冲液，从而可实现重亚硫酸盐转化 DNA 和富含 AT 的扩增子的稳定扩增。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自水生嗜热菌（Thermus aquaticus）YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因。

产品类别:
Methylome Analysis Products,
Epigenetic Analysis Products,
Taq DNA Polymerase Products,

Next Generation Sequencing Library Preparation Products

应用:
Bisulfite Sequencing,
Bisulfite Conversion,
Hot Start PCR,

Specialty PCR,
Routine PCR,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0490S     -20    
        EpiMark® Hot Start Taq DNA Polymerase M0490SVIAL -20 1 x 0.025 ml 5,000 units/ml
        EpiMark® Hot Start Taq Reaction Buffer Pack B0490SVIAL -20 1 x 2 ml 5 X
    • M0490L     -20    
        EpiMark® Hot Start Taq DNA Polymerase M0490LVIAL -20 1 x 0.125 ml 5,000 units/ml
        EpiMark® Hot Start Taq Reaction Buffer Pack B0490SVIAL -20 3 x 2 ml 5 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 75℃ 条件下，30 分钟内将 15 nmol dNTP 掺入到酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X EpiMark®热启动 Taq 反应缓冲液套装

    1X EpiMark®热启动 Taq 反应缓冲液套装
    20 mM Tris-HCl
    1.8 mM MgCl2
    22 mM KCl
    0.06% IGEPAL® CA-630
    0.05% Tween® 20
    22 mM NH4Cl
    (pH 8.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    0.5% Tween® 20
    0.5% IGEPAL® CA-630
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    分子量

    理论上的: 94000 道尔顿

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    Yes

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    No

    产物末端

    • 3´ 单碱基突出末端

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液、200 µM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 重亚硫酸盐转化 DNA 的 PCR 实验

  • 相关产品

    相关产品

    • MgCl2 溶液
    • dNTP 套装
    • EpiMark® 甲基化 DNA 富集试剂盒
    • dNTP 混合液

    单独销售的组分

    • EpiMark® Hot Start Taq Reaction Buffer Pack

  • 参考文献

    1. Chien, A., Edgar, D.B. and Trela, J.M. (1976). J. Bact. . 127, 1550-1557.
    2. Kaledin, A.S., Slyusarenko, A.G. and Gorodetskii, S.I. (1980). Biokhimiya . 45, 644-651.
    3. Lawyer, F.C. et al. (1993). PCR Methods And Appl.. 2, 275-287.
    4. Longley, M.J., Bennett, S.E. and Mosbaugh D.W. (1990). Nucleic Acids Res. . 18, 7317-7322.
    5. Lyamichev, V., Brow, M.A. and Dahlberg, J.E. (1993). Science. 260, 778-783.
    6. Saiki R.K. et al. (1985). Science. 230, 1350-1354.
    7. Powell, L.M. et al. (1987). Cell. 50, 831-840.
    8. Sun, Y., Hegamyer, G. and Colburn, N. (1993). Biotechniques . 15, 372-374.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. EpiMark® Hot Start Taq DNA Polymerase Guidelines for PCR (M0490)

  • 使用指南

    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers

工具 & 资源

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What ends will my PCR products have?
    2. What are Hot Start and WarmStart® polymerases and when would I use them?
    3. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
    4. My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
    5. What should the final primer concentration be in my PCR?
    6. Is this Taq DNA Polymerase product compatible with other NEB Buffers?
    7. What are the general recommendations for designing primers for bisulfite-treated/deaminated DNA?