5´ 去腺苷化酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

酵母 5´ 去腺苷化酶是组氨酸三聚体(HIT)家族蛋白的一员,属于组氨酸三聚体核苷结合蛋白(Hint)的分支。它是 aprataxin 在酵母中的直系同源基因。人源 aprataxin 的突变会导致神经系统疾病,如共济失调伴眼动失用症 1(1)。通过从 DNA 的 5´ 末端去除 AMP(AMP-DNA 水解酶活性),人源 5´ 去腺苷化酶可以去除未连接中间体(2)。它还能够通过去除 3´ 磷酸和 3´ 磷酸乙醇酸来修复 DNA 的 3´ 末端损伤(3)。人源 Aprataxin 可以作用于小分子,如核苷多磷酸双腺苷四磷酸(AppppA)和 lysyl-AMP。

5´ 去腺苷化酶由酿酒酵母(S. cerevisiae)的 HNT3 基因编码。NEB 的研究表明,该蛋白能够从 DNA 和 RNA 的 5´ 末端去腺苷化,留下 5´ 磷酸末端。它还能切割 AppppA 生成 ATP 和 AMP。未检测到其对lysyl-AMP 有作用。

产品来源

从携带编码酿酒酵母(S. cerevisiae)5´ 去腺苷化酶质粒的 E. coli 菌株中纯化获得。

产品类别:
RNA Modification

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0331S     -20    
        5´ Deadenylase M0331SVIAL -20 1 x 0.05 ml 50,000 units/ml
        NEBuffer™ 1 B7001SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 30℃ 条件下,10 分钟能从 5´ 腺苷化 DNA 寡核苷酸中去除 10 pmol AMP 所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ 1
    Incubate at 30°C

    1X NEBuffer™ 1
    10 mM Bis-Tris-Propane-HCl
    10 mM MgCl2
    1 mM DTT
    (pH 7 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    0.1% (w/v) Triton® X-100
    pH 7.5 @ 25°C

    热失活

    70°C for 20 minutes

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • NEBuffer 2

  • 注意事项

    1. 5´ 腺苷化 DNA 可以是双链 DNA、单链 DNA 和 5´ 末端带有腺苷酸残基的切刻 DNA。对双链 DNA 和切刻 DNA 的去腺苷化更加有效。

  • 参考文献

    1. Le Ber, I. et al. (2003). Brain. 126, 2761.
    2. Ahel, I. et al. (2006). Nature. 443, 713.
    3. Takahashi, T. et al. (2007). Nucl. Acids Res. 35, 3797.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. A Typical Deadenylation Reaction (M0331)

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the molecular weight of 5’ Deadenylase?
    2. Is 5’ Deadenylase a tagged protein?
    3. Can 5’ Deadenylase deadenylate ssDNA?