RNA 5´ 焦磷酸水解酶（RppH） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

细菌 RNA 5´ 焦磷酸水解酶（RppH）从 5´ 末端三磷酸化的 RNA 去除焦磷酸盐，产生 5´ 单磷酸 RNA（1）。RppH 蛋白又叫 NudH/YgdP，可以将 Ap5A 分解成 ADP 和 ATP（2）。

产品来源

纯化自携带有 RppH 基因的 E. coli 菌株。

产品类别:
RNA Modification

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0356S     -20    
        RNA 5′ Pyrophosphohydrolase (RppH) M0356SVIAL -20 1 x 0.04 ml 5,000 units/ml
        NEBuffer™ 2 B7002SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 37℃ 条件下，30 分钟能催化 1 µg 300 mer RNA 转录产物转化为 XRN-1 可消化的 RNA 所需酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ 2
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ 2
    50 mM NaCl
    10 mM Tris-HCl
    10 mM MgCl2
    1 mM DTT
    (pH 7.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    20 mM Tris-HCl
    200 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    0.01% Triton® X-100
    pH 7.5 @ 25°C

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • NEBuffer 2

  • 注意事项

    1. RppH 在添加 Mg2+ 后具有活性，因此可以与 RNA 连接酶或 XRN-1 一起进行温育。

  • 参考文献

    1. Deana, A. et al. (2008). Nature. 451, 355-358.
    2. Bessman, M.J. et al. (2001). JBC. 276, 37834.
    3. Neri F, Rapelli S, Krepelova A, Incarnato D, Parlato C, Basile G, et al. (2017). Intragenic DNA Methylation prevents spurious transcription initiation. Nature. 543, 72–7.
    4. Hetzel, Jonathan et al. (2016). Nascent RNA Sequencing Reveals Distinct Features in Plant Transcription. Proceeding of the National Academy of Sciences. 113.43, 12316–12321.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Decapping eukaryotic mRNA with RppH (NEB #M0356)
    2. Cappable-seq for prokaryotic transcription start site (TSS) determination
    3. Removal of pyrophosphate from 5 triphosphorylated RNA using RppH (NEB #M0356)

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can RppH replace Tobacco Acid Pyrophosphatase (TAP) as a decapping enzyme?

  • 实验技巧

    强烈建议戴上手套，使用无核酸酶的管子和试剂，并彻底清洁移液器和工作台表面以避免 RNase 污染。