T3 RNA 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

噬菌体 T3 RNA 聚合酶是一种 DNA 依赖性 RNA 聚合酶，对 T3 噬菌体启动子具有高度特异性。该酶的分子量为 99 kD，它以 T3 启动子后的克隆 DNA 序列为模板催化体外 RNA 合成。 T3 RNA 聚合酶制备的 RNA 适用于多种科研和生物技术应用。

产品来源

分离自大肠杆菌，携带包含 T3 基因 I 的质粒。

产品类别:
cDNA Synthesis & Reverse Transcriptases Products,
RNA Synthesis In vitro Transcription (IVT)

应用:
PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0378S     -20    
        T3 RNA Polymerase M0378SVIAL -20 1 x 0.1 ml 50,000 units/ml
        RNAPol Reaction Buffer B9012SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指 37℃ 条件下，1 小时催化 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件
    1X RNAPol 反应缓冲液，每种 ATP、UTP、GTP、CTP 的浓度为 0.5 mM，以及含有 T3 RNA 聚合酶启动子的 DNA 模板。37℃ 温育。

    反应条件

    1X RNAPol 反应缓冲液

    1X RNAPol 反应缓冲液
    40 mM Tris-HCl
    6 mM MgCl2
    1 mM DTT
    2 mM spermidine
    (pH 7.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    100 mM NaCl
    50 mM Tris-HCl
    1 mM EDTA
    20 mM 2-mercaptoethanol
    0.1% Triton® X-100
    50% (w/v) Glycerol
    pH 7.9 @ 25°C

    单位活性检测条件

    50 μl 反应体系：1X RNAPol 反应缓冲液，每种 ATP、UTP、GTP、CTP 的浓度为 0.5 mM，以及 2 μg T3 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 放射标记的 RNA 探针
    • 非同位素 RNA 标记
    • 制备 RNA 疫苗
    • 合成用于基因靶向的向导 RNA
    • 合成用于体外翻译和显微注射的 mRNA
    • 合成用于 RNA 结构、加工和催化性能研究的 RNA
    • RNA 扩增
    • 合成反义 RNA，调控基因表达

  • 相关产品

    相关产品

    • 2X RNA 上样染料
    • m0307-rnase-inhibitor-human-placenta
    • 小鼠 RNase 抑制剂
    • 无机焦磷酸酶（大肠杆菌）
    • 低分子量 ssRNA Ladder
    • ssRNA Ladder
    • m2080-vaccinia-capping-system
    • mRNA 帽结构 2-O-甲基转移酶
    • E. coli Poly(A) 聚合酶
    • rNTP 混合液
    • rNTP 套装
    • SP6 RNA 聚合酶
    • m0251-t7-rna-polymerase

  • 注意事项

    1. 对于放射性标记高特异性 RNA 探针，放射性核苷酸的浓度不应超过 6 μM。
    2. 为了防止核糖核酸酶降解 RNA ，反应中 RNase 抑制剂（NEB #M0314 或 #M0307）终浓度应为 1 U/μl。
    3. T3 RNA 聚合酶对盐抑制极其敏感。盐总浓度不应超过 50 mM。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Standard RNA Synthesis (NEB #M0378)

  • 应用实例

    • Scaling of High-Yield In vitro Transcription Reactions for Linear Increase of RNA Production

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the promoter sequence of T3 RNA Polymerase?
    2. Does the transcription reaction with T3 RNA Polymerase require a primer?
    3. Does T3 RNA Polymerase leave an extra base at the end of a transcript?
    4. Will T3 RNA Polymerase work on uncut plasmid DNA?
    5. Can aberrant RNA be produced when using T3 RNA Polymerase?
    6. Can I use T3 RNA Polymerase to make high specific activity radiolabeled probes?
    7. What are the main causes of reaction failure using T3 RNA Polymerase?
    8. Why is the specific activity of the probe low?