Tth 核酸内切酶 IV |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有嗜热栖热菌（Thermus thermophilus）核酸内切酶 IV 基因。

产品类别:
DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0294S     -20    
        Tth Endonuclease IV M0294SVIAL -20 1 x 0.05 ml 10,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指在 10 μl 反应体系中，65℃ 条件下，1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 60 bp 寡核苷酸双链所需的酶量。

    * AP 位点创建方法：37℃ 条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 60 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。

    反应条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装
    Incubate at 65°C

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装
    20 mM Tris-HCl
    10 mM (NH4)2SO4
    10 mM KCl
    2 mM MgSO4
    0.1% Triton® X-100
    (pH 8.8 @ 25°C)

    使用浓度

    10,000 units/ml

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    0.1% Triton® X-100
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    单位活性检测条件

    10 μl 总反应体系，含 1X ThermoPol 反应缓冲液和 5 pmol 荧光标记寡核苷酸双链。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 碱洗脱（1）
    • 碱解旋（2）

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • ThermoPol® 反应缓冲液套装

  • 注意事项

    1. 将反应体系置于热循环仪中，或用矿物油覆盖，以减少蒸发。
    2. 反应体系中加入终浓度为 25 μM 的 ZnCl2，以确保酶在超过 80℃ 的条件下保持稳定。
    3. 不建议在 NEBuffer 1 – 4 和 ThermoPol® II 反应缓冲液中使用。
    4. 稀释液兼容性：稀释液 D：       
      100 mM KCl、10 mM Tris-HCl（pH 7.4 @ 25℃）、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1% Triton X-100 和 50% 甘油。

  • 参考文献

    1. Pflaum, M. et al. (1998). FreeRad. Res.. 29, 585-594.
    2. Hartwig, A. et al. (1996). Toxicology Letters. 88, 85-90.

操作说明、说明书 & 用法

  • 使用指南

    • DNA Damage and PreCR

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Activities of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases
    • DNA Repair Enzymes on Damaged and Non-standard Bases
    • Properties of DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. How does Tth Endonuclease IV perform in PCR?