尿嘧啶糖基酶抑制剂（UGI）（也称：尿嘧啶糖基化酶抑制剂） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

尿嘧啶糖基酶抑制剂（UGI），来源于枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）噬菌体 PBS1，蛋白分子量较小（9.5 kDa），可抑制 E. coli 尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）以及来源于其它物种的 UDG。UGD 与 UGI 按 1:1 比例进行可逆的蛋白结合，发挥对 UDG 的抑制作用。UGI 可解离 UDG-DNA 复合物。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）噬菌体 PBS1 的 UGI 基因。

产品类别:
DNA Repair Enzymes and Structure-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0281S     -20    
        Uracil Glycosylase Inhibitor (UGI) M0281SVIAL -20 1 x 0.1 ml 2,000 units/ml
        UDG Reaction Buffer B0280SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
    • M0281L     -20    
        Uracil Glycosylase Inhibitor (UGI) M0281LVIAL -20 1 x 0.5 ml 2,000 units/ml
        UDG Reaction Buffer B0280SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位 UGI 指在 50 µl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时抑制 1 单位大肠杆菌 UDG 所需的酶量。1 单位 UDG 指每分钟从含尿嘧啶的双链 DNA 上催化释放 60 pmol 尿嘧啶所需的酶量。

    反应条件

    1X UDG 反应缓冲液
    Incubate at 37°C

    1X UDG 反应缓冲液
    20 mM Tris-HCl
    1 mM DTT
    1 mM EDTA
    (pH 8 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 µg/ml BSA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    70°C for 10 minutes

  • 优势和特性

    应用特性

    • 尿嘧啶糖基酶抑制剂（UGI）可抑制尿嘧啶-DNA 糖基酶（UDG）。由于 95℃ 热处理后该酶仍有部分活性，UGI 可用于阻止产物 DNA 的后续降解。

  • 相关产品

    单独销售的组分

    • UDG Reaction Buffer

  • 注意事项

    1. 由于 95℃ 热处理后该酶仍有部分活性，UGI 可用于阻止产物 DNA 的后续降解。
    2. 对 NEB 的大肠杆菌 UDG 酶有效（NEB #M0280）。
    3. 在原始反应中加入与 UDG 等量或过量的 UGI。
    4. 在 NEBuffer 1-4 中都有活性。（NEB #B7001、NEB #B7002、NEB #B7003、NEB #B7004）
    5. UGI 的热稳定性极高，煮沸 10 分钟仍具有 95% 以上的活性。

  • 参考文献

    1. Lindahl, T. et al. (1977). J. Biol.Chem.. 252, 3286-3294.
    2. Wang, Z., et al. (1991). Gene. 99, 31-37.
    3. Bennett, S. E. and Mosbaugh, D. W. (1992). J. Biol. Chem.. 267, 22512-22521.

操作说明、说明书 & 用法

  • 使用指南

    • DNA Damage and PreCR

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the nature of the Uracil Glycosylase Inhibitor?
    2. How does UGI inhibit UDG?
    3. Does UGI inhibit the activity of all UDGs?
    4. What is the molecular weight of UGI?
    5. Why is it necessary to use UGI in a reaction?