RecJf 核酸外切酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

RecJf 核酸外切酶是一种单链 DNA 特异性核酸外切酶，沿 5’→3′ 方向催化去除 DNA 的单磷酸脱氧核苷酸（1）。RecJf 核酸外切酶是 RecJ 与麦芽糖结合蛋白（MBP）的重组融合蛋白，与野生型 RecJ 具有相同的酶学特性。与 MBP 融合表达，提高了 RecJf 核酸外切酶的溶解度（2）。

当底物为 5´ 端突出了 22 个核苷酸的 DNA 时，经 RecJf 核酸外切酶酶切后可得到含有以下三种末端的混合产物：平齐末端、5´ 突出末端（1-5 个核苷酸）和 5´ 凹陷末端（1-8 个核苷酸）（3）。RecJf 核酸外切酶发挥活性时无需 5′ 末端磷酸化（3）。

产品来源

RecJf 核酸外切酶 C 端融合麦芽糖结合蛋白（MBP）进行过表达和纯化。MBP 不影响 RecJf 核酸外切酶的催化活性，但提高了 RecJf 核酸外切酶的溶解度（2）。

产品类别:
Exonucleases and Non-specific Endonucleases Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0264S     -20    
        RecJf M0264SVIAL -20 1 x 0.033 ml 30,000 units/ml
        NEBuffer™ 2 B7002SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X
    • M0264L     -20    
        RecJf M0264LVIAL -20 1 x 0.165 ml 30,000 units/ml
        NEBuffer™ 2 B7002SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 50 μl 含 1X NEBuffer 2 的反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟催化超声处理的 1.5 µg [3H]-标记单链 E. coli DNA 时，产生 0.05 nmol 可溶于 TCA 的脱氧核糖核苷酸所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ 2
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ 2
    50 mM NaCl
    10 mM Tris-HCl
    10 mM MgCl2
    1 mM DTT
    (pH 7.9 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 µg/ml BSA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    65°C for 20 minutes

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    单独销售的组分

    • NEBuffer 2

  • 参考文献

    1. Lovett, S.T., Kolodner, R.D. (1989). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 86, 2627-2631.
    2. Lovett, S. and Whitaker, R. Unpublished observation
    3. Whitaker, R. Unpublished observation

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for RecJf (NEB #M0264)

  • 使用指南

    • Activity of DNA Modifying Enzymes in rCutSmart™ Buffer

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Activities of Exonucleases and Non-specific Endonucleases
    • Common Applications for Exonucleases and Endonucleases
    • Properties of Exonucleases and Non-specific Endonucleases

  • Web 工具

    • Exo Selector

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the activity of RecJf in the NEBuffers?
    2. Can DNA be blunted using RecJf?
    3. What is the difference between RecJf and Exonuclease I (NEB# M0293)?
    4. Can RecJf be heat inactivated?
    5. Will RecJF work in rCutSmart buffer?