Therminator™ DNA 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

重点

 

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自热球菌（Thermococcus）属 9°N-7 中经过基因工程改造的 9°N（D141A/E143A/A485L）DNA 聚合酶基因。

产品类别:
DNA Labeling Products

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0261S     -20    
        Therminator™ DNA Polymerase M0261SVIAL -20 1 x 0.1 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
    • M0261L     -20    
        Therminator™ DNA Polymerase M0261LVIAL -20 1 x 0.5 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 3 x 1.5 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 75℃ 条件下，30 分钟内能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装
    20 mM Tris-HCl
    10 mM (NH4)2SO4
    10 mM KCl
    2 mM MgSO4
    0.1% Triton® X-100
    (pH 8.8 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    分子量

    理论上的: 90000 道尔顿

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    No

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    No

    链置换

    +

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol 反应缓冲液，200 µM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的单链 M13mp18。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 部分核糖核酸置换法用于 DNA 测序（3）
    • ddNTP（4）或 acyNTP（5）的链终止法用于 DNA 测序
    • ddNTP 或 acyNTP 的链终止法进行 SNP 分析（6）

  • 相关产品

    相关产品

    • acyNTP 套装
    • dNTP 混合液
    • dNTP 套装

    单独销售的组分

    • ThermoPol® 反应缓冲液套装
    • Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution

  • 注意事项

    1. 扩增延长区域（extended regions）时可能需要优化反应条件。

  • 参考文献

    1. Gardner, A.F. and Jack, W.E. (1999). Nucl. Acids Res.. 27, 2545-2555.
    2. Gardner, A.F. and Jack, W.E. (2002). Nucl. Acids Res. 30, 605-613.
    3. Barnes, W.F. (1978). J. Mol. Biol.. 119, 83-99.
    4. Sanger, F., Nicklen, S. and Coulson, A.R. (1977). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 74, 5463-5467.
    5. Trainor, G.L. (1996). U.S. Patent No. 5,558,991.
    6. Haff, L.A. and Simirnov, I.P. (1997). Genome Methods. 7, 378-388.

操作说明、说明书 & 用法

  • 使用指南

    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the specific activity of Therminator™ DNA Polymerase?
    2. Can Therminator™ DNA Polymerase be used in other buffers?
    3. When should Therminator™ DNA Polymerase be used?
    4. Can Therminator™ DNA Polymerase be substituted for ThermoSequenase™?
    5. Can Therminator™ DNA Polymerase be used for sequencing?
    6. Why are some of the A’s in my sequence weak when using Therminator™ DNA Polymerase?
    7. Does Therminator™ DNA Polymerase have 3’→5′ proofreading exonuclease activity?

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide