Q5® 血源直扩 2X 预混液 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Q5 血源直扩 2X 预混液可以免除 DNA 纯化步骤，直接使用干血斑或含高达 30% 的全血样品进行各种靶标扩增。该预混液包含 Q5® 热启动超保真 DNA 聚合酶，该酶热稳定性好，具有 3′→ 5′ 外切酶活性，融合了具有增强持续合成能力的 Sso7d DNA 结合域，优化的 dNTP 缓冲液有效提高了对血液中扩增抑制成分、抗凝剂以及滤纸上化学品的耐受度。该产品能够从含有 EDTA 钠盐、EDTA 钾盐、枸橼酸钠和肝素钠的全血细胞以及从保存在普通防腐滤纸上的血样品中扩增长达 7.5 kb 的片段。

Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶扩增性能卓越、保真度高。通过核酸适配体抑制酶活，可在室温条件下建立反应体系。

建议使用 NEB’s Tm Calculator 针对于感兴趣的聚合酶/缓冲液确认引物的最适退火温度，与其它 Tm 值估算系统不同，NEB Tm 值估算系统在估算最佳退火温度时，考虑了影响退火温度的缓冲液组分。

图 1：Q5 血源直扩 2X 预混液扩增性能卓越，能够直接扩增全血或干血斑 

Q5® 血源直扩 2X 预混液 |

根据说明书推荐的标准反应条件，使用 Q5 血源直扩 2X 预混液进行 35 个循环的 PCR 扩增。使用 LabChip® 微流控分析仪对产率和纯度进行定量，结果分别以圆点的大小和颜色展示：圆点面积越大、绿色越深，则表示扩增性能越强。 A. 以 10% EDTA 保存的人全血为模板，扩增人基因组不同靶标（0.3 至 7.5 kb）。结果以模拟胶图（上）和相应的点图（下）呈现。结果显示：Q5® 血源直扩 2X 预混液在较大范围的模板长度区间内均表现良好。B. 以全血（上）或滤纸干血（底部）为模板，对人类基因组靶标（604 bp）进行扩增。人全血占总反应体积 (50 µl) 的 5-30%。将未经处理的 1 mm 打孔干血斑直接添加到 25 µl 反应体系中（每个反应一个打孔样品）。结果显示：Q5 血源直扩 2X 预混液对不同的全血含量、防腐剂和各种类型的采血卡纸具有广泛的耐受性。 

图 2：Q5 血源直扩 2X 预混液对各种靶标序列均能高效扩增 

Q5® 血源直扩 2X 预混液 |

使用 Q5 血源直扩 2X 预混液和其它几种市售血液直扩聚合酶，分别对不同 GC 含量 (23-77%)（A图）和不同长度（2 -7 kb）（B 图）人类基因靶标进行 PCR。以 10% EDTA 保存的人全血为模板。根据说明书建议使用 50 µl 反应体系进行热循环。使用 LabChip® 微流控分析仪进行定量，结果分别以圆点的大小和颜色表示产量和纯度。结果显示：Q5 血源直扩 2X 预混液对于各种类型的靶标均表现优异。 

图 3：在各种滤纸，血液防腐剂、反应体系中表现稳定 

Q5® 血源直扩 2X 预混液 |

根据说明书推荐的标准反应条件，使用 Q5 血源直扩 2X 预混液对干血中的人类基因组靶标（604 bp）进行 PCR。将不同抗凝剂抗凝的血样采集于 Whatman 903 或 FTA Elute 卡纸上，在上述干血卡纸打孔，分别直接加入到 20、25 或 50 μl 反应体系中。结果显示：在各种体积的反应体系、抗凝剂或滤纸类型中，均能达到稳健扩增。

产品类别:
Q5® High-Fidelity DNA Polymerases Products,
Master Mixes Products,
PCR, qPCR & Amplification Technologies Products

应用:
Extraction-Free PCR,
qPCR & RT-qPCR,
Hot Start PCR,

High-Fidelity PCR,

DNA Amplification, PCR & qPCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0500S     -20    
        Q5® Blood Direct 2X Master Mix M0500SVIAL -20 1 x 1 ml 2 X
    • M0500L     -20    
        Q5® Blood Direct 2X Master Mix M0500SVIAL -20 5 x 1 ml 2 X

  • 特性和用法

    热失活

    否

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Routine PCR Directly from Whole Blood or Dried Blood Spots (DBS) using Q5® Blood Direct 2X Master Mix (NEB #M0500)

工具 & 资源

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the difference between Q5® Blood Direct 2X Master Mix and Hemo KlenTaq (NEB #M0332)?
    2. What types of samples/materials are compatible with the Q5® Blood Direct 2X Master Mix?
    3. What concentration of whole blood is recommended for use with Q5® Blood Direct 2X Master Mix?
    4. What blood anticoagulants can be used with Q5® Blood Direct 2X Master Mix?
    5. How do I pre-treat Dried Blood Spot Punches?
    6. What length of product can be made by Q5® Blood Direct 2X Master Mix?
    7. What ends will my PCR products have?
    8. What are Hot Start and WarmStart® polymerases and when would I use them?
    9. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
    10. My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
    11. When and how should I use the Q5® High GC Enhancer?

质控、安全 & 法规

  • 质控分析

    每一新批次的 NEB 产品都要经过质控，以满足指定的质量标准，对特定产品的质量标准和每一批次的检测数据可以通过产品说明表格、COA、产品信息卡或者产品手册进行查阅或下载。关于 NEB 产品质控的详细信息，可从此处查阅。

  • 产品说明与变更通知

    产品说明表包含产品的储存温度、有效期和规格，这些文件的命名规则如下：[货号]_[规格]_[版本]

    • M0500S_L_G_v1

  • CoA 文件包含单个批次产品的储存温度、有效期和质控，这些文件的命名规则如下： [货号]_[规格]_[版本]_[Lot#]

    • M0500G_v1_10157482
    • M0500L_v1_10157480
    • M0500S_v1_10157478
    • M0500G_v1_10159686
    • M0500L_v1_10189911
    • M0500S_v1_10184748
    • M0500L_v1_10204369
    • M0500G_v1_10198149
    • M0500L_v1_10207348
    • M0500L_v1_10210691
    • M0500S_v1_10211736
    • M0500L_v1_10233224

  • SDS

    以下 SDS 文件可以帮助您安全地使用该产品

    • Q5® 血源直扩 2X 预混液