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产品信息
Q5® 热启动超保真 DNA 聚合酶是一种热稳定的高保真热启动 DNA 聚合酶,具有 3´→5´ 核酸外切酶活性,并且融合了具有增强持续合成能力的 Sso7d 结构域,能够进行稳健的 DNA 扩增。通过加入核酸适配体抑制剂,可在室温条件下建立反应体系。Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶的错配率不到 Taq DNA 聚合酶的二百八十分之一,是克隆的理想选择,可用于长片段或难扩增的扩增子。Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶提供优化的缓冲液系统,不论模板 GC 含量多少,都能实现有效扩增。5X Q5 反应缓冲液按 1X 终浓度使用时含有 2 mM Mg++,可用于大多数常规应用。对于高 GC 含量的靶标(GC 含量 ≥ 65%),可以通过添加 5X Q5 High GC Enhancer 来改善扩增效果。Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶不同于常规的较低保真度的 PCR 酶。强烈建议使用 NEB Tm Calculator,确定给定引物组的最佳退火温度。
产品来源
大肠杆菌菌株,携带 Q5 超保真 DNA 聚合酶基因。
- 产品类别:
- Q5® High-Fidelity DNA Polymerases Products
- 应用:
- Hot Start PCR,
- Long Range PCR,
- Fast PCR,
- Genome Editing Applications,
- High-Fidelity PCR,
- Multiplex PCR,
- Specialty PCR,
- Routine PCR,
- DNA Amplification, PCR & qPCR,
- PCR,
Fast Cloning: Accelerate your cloning workflows with reagents from NEB
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产品组分信息
本产品提供以下试剂或组分:
NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度 -
M0493S -20 Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase M0493SVIAL -20 1 x 0.05 ml 2,000 units/ml Q5® Reaction Buffer Pack B9027SVIAL -20 1 x 1.5 ml 5 X Q5® High GC Enhancer B9028AVIAL -20 1 x 1.5 ml 5 X
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M0493L -20 Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase M0493LVIAL -20 1 x 0.25 ml 2,000 units/ml Q5® Reaction Buffer Pack B9027SVIAL -20 4 x 1.5 ml 5 X Q5® High GC Enhancer B9028AVIAL -20 4 x 1.5 ml 5 X
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特性和用法
单位定义
1 单位是指在 74℃ 条件下,30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。
热失活
否
单位活性检测条件
25 mM TAPS-HCl(25℃ 时 pH 9.3)、50 mM KCl、2 mM MgCl2、1 mM β-巯基乙醇、200 μM dNTP(含 [3H]-dTTP)和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。
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优势和特性
应用特性
- 高特异性 PCR
- 超保真 PCR
- 克隆
- 长片段或难扩增片段的扩增
- 高通量 PCR
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- dNTP 混合液
- dNTP 套装
- Q5® 超保真 2X 预混液
- Q5® 超保真 DNA 聚合酶
- Q5® 热启动超保真 2X 预混液
- Q5® 反应缓冲液套装
操作说明、说明书 & 用法
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操作说明
- PCR Using Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase (M0493)
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使用指南
- Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
- Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases
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应用实例
- AppNote_Multiplex_PCR_Using_Q5_HF_DNA_Polymerase
工具 & 资源
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选择指南
- DNA Polymerase Selection Chart
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Web 工具
- Tm Calculator
FAQs & 问题解决指南
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FAQs
- What are the advantages of using Q5® High-Fidelity DNA Polymerase?
- What are the differences between the numerous Q5® Polymerase products available?
- My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
- What ends will my PCR products have?
- What does exonuclease activity mean for a DNA polymerase?
- Does Q5® High-Fidelity DNA Polymerase exhibit a strand displacement activity?
- What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
- What should the final primer concentration be in my PCR?
- When and how should I use the Q5® High GC Enhancer?
- Do other polymerases work in Q5® Reaction Buffer?
- There is a precipitate in the bottom of the Master Mix tube? Is this normal?
- What are Hot Start and WarmStart® polymerases and when would I use them?
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问题解决指南
- PCR Troubleshooting Guide