OneTaq® 热启动 DNA 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

OneTaq® 热启动 DNA 聚合酶是经过优化的 Taq 和 Deep Vent® DNA 聚合酶结合核酸适配体（aptamer）抑制剂的混合物。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 核酸外切酶活性提升了 Taq DNA 聚合酶（1）的保真性和聚合能力；而热启动剂型不仅使用方便，而且减少了引物二聚体和副产物对反应的干扰。OneTaq 反应缓冲液与 High GC Enhancer 的组合使得无论模板的 GC 含量高低，都只需最小的优化即能获得最高的产量。

这种核酸适配体抑制剂能够与聚合酶发生可逆结合，当温度低于 45℃ 时抑制聚合酶活性。正常的热循环条件下聚合酶即可被激活，因而可在室温下建立反应。OneTaq 热启动 DNA 聚合酶无需额外的高温温育步骤来激活酶，可用于常规的基于 Taq DNA 聚合酶的 PCR 反应。

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶随附两种 5X 缓冲液 （标准和 GC 反应缓冲液）以及 High GC Enhancer。对于大多数常规和/或富含 AT 的扩增子（例如 Lambda）或 GC 含量高达 65% 的复杂扩增子，OneTaq 标准反应缓冲液可提供高效扩增。对于高 GC 含量的扩增子可使用 OneTaq GC 反应缓冲液来提高性能和产量。对于 GC 含量特别高或复杂扩增子（例如 GC 含量 ≥ 75%），可在含有 OneTaq GC 反应缓冲液的反应体系中添加终浓度为 10 – 20% 的 OneTaq High GC Enhancer。

OneTaq 产品与其它市售聚合酶的比较

OneTaq® 热启动 DNA 聚合酶 | 

对一系列高 GC 含量的人类基因组 DNA 靶标进行扩增，展示 OneTaq 的优异性能。所有聚合酶均根据制造商使用建议进行循环扩增，包括使用添加剂来增强高 GC 含量的靶标扩增。在 Perkin Elmer LabChip® 上对反应产物的产量（点大小）和纯度（颜色）进行量化。深绿色大圆点代表最高的产量与纯度。
OneTaq® 热启动 DNA 聚合酶 |

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自水生嗜热菌（Thermus aquaticus）YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因；大肠杆菌菌株，携带有克隆自 Pyrococcus GB-D 的 Deep Vent® DNA 聚合酶基因。

产品类别:
OneTaq® DNA Polymerases Products,
Taq DNA Polymerase Products

应用:
Hot Start PCR,
Multiplex PCR,
Specialty PCR,

Routine PCR,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0481S     -20    
        OneTaq® Hot Start DNA Polymerase M0481SVIAL -20 1 x 0.04 ml 5,000 units/ml
        OneTaq® Standard Reaction Buffer Pack B9022SVIAL -20 1 x 2 ml 5 X
        OneTaq® GC Reaction Buffer Pack B9023SVIAL -20 1 x 2 ml 5 X
        OneTaq® High GC Enhancer B9026AVIAL -20 1 x 2 ml Not Applicable
    • M0481L     -20    
        OneTaq® Hot Start DNA Polymerase M0481LVIAL -20 1 x 0.2 ml 5,000 units/ml
        OneTaq® Standard Reaction Buffer Pack B9022SVIAL -20 5 x 2 ml 5 X
        OneTaq® GC Reaction Buffer Pack B9023SVIAL -20 3 x 2 ml 5 X
        OneTaq® High GC Enhancer B9026AVIAL -20 3 x 2 ml Not Applicable
    • M0481X     -20    
        OneTaq® Hot Start DNA Polymerase M0481LVIAL -20 5 x 0.2 ml 5,000 units/ml
        OneTaq® Standard Reaction Buffer Pack B9022SVIAL -20 25 x 2 ml 5 X
        OneTaq® GC Reaction Buffer Pack B9023SVIAL -20 15 x 2 ml 5 X
        OneTaq® High GC Enhancer B9026AVIAL -20 15 x 2 ml Not Applicable

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 75℃ 条件下，30 分钟能使 15 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X OneTaq® 标准反应缓冲液套装

    1X OneTaq® 标准反应缓冲液套装
    20 mM Tris-HCl
    22 mM NH4Cl
    22 mM KCl
    1.8 mM MgCl2
    0.06% IGEPAL® CA-630
    0.05% Tween® 20
    (pH 8.9 @ 25°C)

    使用浓度

    1.25 units/50 μl 反应体系

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    0.5% Tween® 20
    0.5% IGEPAL® CA-630
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    Yes

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    Yes

    链置换

    No

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液、200 µM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。 

  • 优势和特性

    应用特性

    • 高灵敏度 PCR
    • 高通量 PCR
    • 常规 PCR
    • 高 GC PCR
    • 高 AT PCR
    • 菌落 PCR
    • 长片段 PCR（基因组片段可扩增至 6 kb）

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 套装
    • dNTP 混合液
    • MgCl2 溶液
    • Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution
    • OneTaq® DNA 聚合酶

    单独销售的组分

    • OneTaq® Standard Reaction Buffer Pack
    • OneTaq® GC Reaction Buffer Pack

  • 注意事项

    1. The OneTaq High GC Enhancer should not be used alone. It should be added only to the OneTaq GC Reaction Buffer and will typically enhance yields when other conditions have failed.
    2. Product specifications for individual components in the OneTaq Hot Start DNA Polymerase mix are available separately.

  • 参考文献

    1. Barnes, W.M. (1994). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 91, 2216-2220.
    2. Saiki R.K. et al. (1985). Science. 230, 1530-1554.
    3. Powell, L.M. et al. (1987). Cell. 50, 831-840.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for OneTaq Hot Start DNA Polymerase (M0481)

  • 使用指南

    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
    • Guidelines for PCR Optimization with OneTaq® and OneTaq® Hot Start DNA Polymerases
    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

  • 应用实例

    • Robust Colony PCR from Multiple E. coli Strains using OneTaq® Quick-Load® Master Mixes

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart
    • Thermophilic DNA Polymerases

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What ends will my PCR products have?
    2. What are Hot Start and WarmStart® polymerases and when would I use them?
    3. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
    4. What should the final primer concentration be in my PCR?
    5. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
    6. What are the stability and storage requirements for NEB’s Taq and OneTaq DNA Polymerases?
    7. Can Taq/OneTaq® DNA Polymerases be used for nick translation?
    8. How can I optimize my PCR when using Taq DNA Polymerase?

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide

  • 实验技巧

    您知道吗？在使用 68℃ 的延伸温度时，大多数 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶扩增反应会更有效、更稳定。