Taq 5X 预混液 |NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

Taq DNA 聚合酶是一种热稳定 DNA 聚合酶，具有 5´→3´ 聚合酶活性（1,2,3）和 5´ 结构特异性核酸内切酶活性（4,5）。

Taq 5X 预混液是经过优化的即用型溶液，包含 Taq DNA 聚合酶、dNTP、MgCl2、KCl 和稳定剂。其非常适合多种模板（包括纯 DNA 溶液、细菌菌落和 cDNA）的常规 PCR 应用。可用于扩增不超过 4 kb 的复杂基因组 DNA 或不超过 5 kb 的 Lambda DNA。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自水生嗜热菌（Thermus aquaticus）YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因。

产品类别:
Master Mixes Products,
Taq DNA Polymerase Products

应用:
Multiplex PCR,
Specialty PCR,
Routine PCR,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0285L     -20    
        Taq 5X Master Mix M0285SVIAL -20 5 x 1 ml 5 X
        Magnesium Chloride (MgCl2) Solution B9021SVIAL -20 3 x 1.5 ml 25 mM

  • 特性和用法

    1X 预混液组分

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1.5 mM MgCl2
    5% Glycerol
    0.08% IGEPAL® CA-630
    0.05% Tween® 20
    0.2 mM dNTPs
    25 units/ml Taq DNA Polymerase
    pH 8.6 @ 25°C

    热失活

    否

    分子量

    理论上的: 94000 道尔顿

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    Yes

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    No

    链置换

    No

    产物末端

    • 3´ 单碱基突出末端

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液、200 µM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

    单位定义：

    1 单位的 Taq DNA 聚合酶是指在 75℃ 条件下，30 分钟能使 10 nmol dNTP 掺入到酸不溶物所需的酶量。

  • 优势和特性

    应用特性

    • PCR
    • 引物延伸
    • 菌落 PCR

  • 相关产品

    相关产品

    • Taq DNA 聚合酶（提供标准 Taq 缓冲液）
    • dNTP 套装
    • dNTP 混合液
    • 标准 Taq 反应缓冲液（无 Mg2+）
    • 标准 Taq 反应缓冲液套装
    • EpiMark® 甲基化 DNA 富集试剂盒

    单独销售的组分

    • MgCl2 溶液

  • 注意事项

    1. 当 -20℃ 储存时，Taq 5X 预混液反复冻融 15 次仍保持稳定。
    2. Taq 5X 预混液在 4℃ 下可稳定储存六个月。因此，为了便于频繁使用，可分装储存在 4℃ 条件下。
    3. Taq 5X 预混液的工作液浓度为 1X，并加入 DNA 模板和引物，总反应体积为 25 或 50 μl。

  • 参考文献

    1. Chien, A., Edgar, D.B. and Trela, J.M. (1976). J. Bact.. 127, 1550-1557.
    2. Kaledin, A.S., Sliusarenko, A.G. and Gorodetskii, S.I. (1980). Biokhimiya. 45, 644-651.
    3. Lawyer, F.C. et al. (1993). PCR Methods and Appl.. 2, 275-287.
    4. Longley, M.J., Bennett, S.E. and Mosbaugh D.W. (1990). Nucleic Acids Res.. 18, 7317-7322.
    5. Lyamichev, V., Brow, M.A. and Dahlberg, J.E. (1993). Science. 260, 778-783.
    6. Saiki R.K. et al. (1985). Science. 230, 1350-1354.
    7. Powell, L.M. et al. (1987). Cell. 50, 831-840.
    8. Sun, Y., Hegamyer, G. and Colburn, N. (1993). Biotechniques. 15, 372-374.
    9. Sarkar, G., Kapelner, S. and Sommer, S.S. (1990). Nucleic Acids Res.. 18, 7465.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Taq 5X Master Mix (M0285)

  • 使用指南

    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
    • Guidelines for PCR Optimization with Taq DNA Polymerase
    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart
    • Thermophilic DNA Polymerases

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What ends will my PCR products have?
    2. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
    3. What should the final primer concentration be in my PCR?
    4. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
    5. What are the stability and storage requirements for NEB’s Taq and OneTaq DNA Polymerases?
    6. Can Taq/OneTaq® DNA Polymerases be used for nick translation?
    7. How can I optimize my PCR when using Taq DNA Polymerase?

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide
    • Taq PCR Kit Troubleshooting Guide

  • 实验技巧

    您知道吗？对于大多数 Taq 反应，当延伸温度为 68℃ 时，会发生更高效、更稳定地扩增。