Vent (exo-) DNA 聚合酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

Vent (exo-) DNA 聚合酶经过基因工程改造，去除了 Vent DNA 聚合酶带有的 3´→5´ 核酸外切酶校读活性（1）。该产品是高温双脱氧终止法测序反应和高产量引物延伸反应的首选。其保真度有所降低，大约是 Taq DNA 聚合酶的 2 倍（2、3）。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有经过基因工程改造的嗜热球菌（Thermococcus litoralis）（4）Vent（D141A/E143A）DNA 聚合酶基因。这种原生生物从海底火山口（5）中分离出来，可在高达 98℃ 的温度下生长。

产品类别:
Other PCR Polymerases Products

应用:
Routine PCR,
PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0257V     -20    
        Vent® (exo-) DNA Polymerase M0257VVIAL -20 1 x 0.05 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
        Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution B1003SVIAL -20 1 x 1.5 ml 100 mM
    • M0257S     -20    
        Vent® (exo-) DNA Polymerase M0257SVIAL -20 1 x 0.1 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
        Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution B1003SVIAL -20 1 x 1.5 ml 100 mM
    • M0257L     -20    
        Vent® (exo-) DNA Polymerase M0257LVIAL -20 1 x 0.5 ml 2,000 units/ml
        ThermoPol® Reaction Buffer B9004SVIAL -20 3 x 1.5 ml 10 X
        Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution B1003SVIAL -20 1 x 1.5 ml 100 mM

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位是指在 75℃ 条件下，30 分钟能使 10 nmol 的 dNTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装

    1X ThermoPol® 反应缓冲液套装
    20 mM Tris-HCl
    10 mM (NH4)2SO4
    10 mM KCl
    2 mM MgSO4
    0.1% Triton® X-100
    (pH 8.8 @ 25°C)

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    0.1% Triton® X-100
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    分子量

    理论上的: 89000 道尔顿

    5′ – 3′ 核酸外切酶

    No

    3′ – 5′ 核酸外切酶

    No

    链置换

    +++

    产物末端

    • 平末端和 3´ 单碱基突出末端混合物

    单位活性检测条件

    1X ThermoPol 反应缓冲液、每种浓度为 200 µM 的 dNTP（含 [3H]-dTTP）、15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

    错配率

    < 190x10-6bases

  • 优势和特性

    应用特性

    • PCR
    • 引物延伸
    • 热循环测序
    • 高温双脱氧测序

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 套装
    • dNTP 混合液

    单独销售的组分

    • ThermoPol® 反应缓冲液套装
    • Magnesium Sulfate (MgSO4) Solution

  • 注意事项

    1. 该酶不提供 BSA，因为大多数引物延伸反应不需要 BSA。但如果需要，在售有 NEB #B9001。乙酰化的 BSA 不能用于引物延伸反应。
    2. 在售稀释液 D。推荐使用此稀释液稀释 Vent (exo-) 聚合酶。
    3. 本产品还提供其它 ThermoPol 反应缓冲液套装。每种缓冲液套装包含 4 管 10X 缓冲液（1.5 ml/管）和 1 管 MgSO4（100 mM）。

  • 参考文献

    1. Kong, H.M., Kucera, R.B. and Jack, W.E. (1993). J. Biol. Chem.. 268, 1965-1975.
    2. Mattila, P. et al. (1991). NAR. 19, 4967-4973.
    3. Eckert, K.A. and Kunkel, T.A. et al. (1991). PCR Methods and Applications 1. 17-24.
    4. Perler, F.B. et al. (1992). PNAS USA. 89, 5577-5581.
    5. Belkin, S. and Jannasch, H.W. (1985). Arch Microbiol. 141, 181-186.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Guidelines for PCR Optimization for Vent DNA Polymerase
    2. Protocol for a Routine Vent (exo-) PCR

  • 使用指南

    • Guidelines for PCR Optimization with Thermophilic DNA Polymerases

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart
    • Thermophilic DNA Polymerases

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can Vent (exo-) DNA Polymerase be used in other buffers?
    2. Are the DNA fragments produced by Vent (exo-) DNA Polymerase blunt-ended or do they have the single-base 3′ overhang that Taq DNA Polymerase yields?
    3. I can’t get Vent (exo-) DNA Polymerase to work yet Taq DNA Polymerase works fine.
    4. What should I take into consideration when designing a set of PCR primers?
    5. How can I facilitate the amplification of templates with hairpin-loop structures or high GC-content?

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide