Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品信息

超保真 DNA 聚合酶对于扩增后需要 DNA 序列正确的应用非常重要。Thermo Scientific® Phusion 超保真 DNA 聚合酶由 NEB 公司生产并进行质量控制，兼备高保真度和稳健扩增的性能，适用于所有 PCR 应用。其拥有独特的结构，将一种类似火球菌属（Pyrococcus）来源的新型酶，与增强持续合成能力的结构域融合表达，从而提高保真度和扩增速度。Phusion DNA 聚合酶是克隆的理想选择，可用于长片段或难扩增的扩增子。Phusion 是目前具有最高扩增准确性的热稳定型聚合酶之一，错配率是 Taq DNA 聚合酶的 1/50，是火球菌（Pyrococcus furiosus）DNA 聚合酶（1）的 1/6。Phusion DNA 聚合酶具有 5´→3´ 聚合酶活性和 3´→5´ 核酸外切酶活性，可生成平末端产物。

Phusion 热启动 Flex 2X 预混液采用便捷的预混液剂型，具有高保真度和稳健扩增的性能，有助于在室温下建立反应体系。通过加入核酸适配体抑制剂，可在室温条件下建立反应体系。这款便捷的 2X 预混液包含 dNTP 和 Mg++，仅需加入引物和 DNA 模板，即可稳健扩增。也可使用提供的 DMSO 溶液优化反应。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带 Phusion DNA 聚合酶基因。

产品类别:
Phusion® High-Fidelity DNA Polymerases Products,
Master Mixes Products

应用:
Hot Start PCR,
Long Range PCR,
Fast PCR,

High-Fidelity PCR,
Multiplex PCR,
Specialty PCR,
Routine PCR,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0536S     -20    
        Phusion® Hot Start Flex 2X Master Mix M0536SVIAL -20 2 x 1.25 ml 2 X
        DMSO B0515AVIAL -20 1 x 0.5 ml 100 %
    • M0536L     -20    
        Phusion® Hot Start Flex 2X Master Mix M0536SVIAL -20 10 x 1.25 ml 2 X
        DMSO B0515AVIAL -20 2 x 0.5 ml 100 %

  • 特性和用法

    热失活

    否

    单位活性检测条件

    25 mM TAPS-HCl（25℃ 时 pH 9.3）、50 mM KCl、2 mM MgCl2、1 mM β-巯基乙醇、200 µM dNTP（含 [3H]-dTTP）和 15 nM 已结合引物的 M13 DNA。

  • 优势和特性

    应用特性

    • 高特异性 PCR
    • 克隆
    • 长片段或难扩增片段的扩增
    • 高通量 PCR

  • 相关产品

    相关产品

    • dNTP 混合液
    • dNTP 套装
    • MgCl2 溶液
    • Phusion® GC 反应缓冲液套装
    • Phusion® HF 反应缓冲液套装
    • m0530-phusion-high-fidelity-dna-polymerase
    • Phusion® High-Fidelity PCR Kit
    • Phusion® 超保真 PCR 预混液（提供 HF 缓冲液）
    • Phusion® Hot Start Flex DNA Polymerase
    • Phusion® 超保真 PCR 预混液（提供 GC 缓冲液）

  • 注意事项

    1. Phusion Hot Start Flex DNA Polymerase is unlike other enzymes and care must be taken when designing cycling protocols. To determine the optimal annealing temperatures for a given set of primers, use of the NEB Tm Calculator is highly recommended.
    2. Product specifications for individual components in the Phusion Hot Start Flex 2X Master Mix are available separately.

  • 参考文献

    1. Frey, B. and Suppman, B. (1995). BioChemica. 2, 34-35.
    2. Chester, N. and Marshak, D.R. (1993). Analytical Biochemistry. 209, 284-290.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Protocol for Phusion® Hot Start Flex 2X Master Mix

  • 使用指南

    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart
    • Thermophilic DNA Polymerases

  • Web 工具

    • Tm Calculator

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What are the differences between the various available Phusion® products?
    2. My results are not as expected. Where can I find troubleshooting help?
    3. What ends will my PCR products have?
    4. What does exonuclease activity mean for a DNA polymerase?
    5. Does Phusion® High-Fidelity DNA Polymerase exhibit a strand displacement activity?
    6. What are the properties of this polymerase (fidelity, product ends, max amplicon, modified base incorporation, etc.)?
    7. How should I determine the appropriate annealing temperature for my reaction?
    8. What should the final primer concentration be in my PCR?
    9. What are Hot Start and WarmStart® polymerases and when would I use them?

  • 问题解决指南

    • PCR Troubleshooting Guide

  • 实验技巧

    Phusion 热启动 Flex 对退火温度的要求与大多数 PCR 酶不同。请访问 www.neb.cn/tmcalculator，帮助您确定最佳的 Phusion 退火温度。