acyNTP 套装 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

与 Therminator DNA 聚合酶（NEB #M0261）一起使用时，无环核苷酸类似物的浓度大致等于与 Thermo Sequenase™ 一起使用时的双脱氧核苷酸浓度（参见图）。

acyNTP 套装 |
混合组份（50 ng/µl 单链 M13mp18 DNA、0.05 µM [32P]-S1224S 引物、1X ThermoPol 缓冲液、50 µM dNTP、不同比例的 acyGTP 和 0.05 unit/µl Therminator）在 94℃ 条件下温育 5 分钟，然后以 94℃（30 秒）、55℃（30 秒）、72℃（30 秒）的循环程序进行 25 个循环反应。通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（QuickPoint、NOVEX, Inc.）分离反应产物，并通过放射自显影进行分析。每条泳道上的数字显示了 acyGTP 与 dNTP 的摩尔比（即 50、17、5、6 和 1.9 µM acyGTP）。电泳胶侧面的数字表示引物延伸产物长度。
产品类别:
Nucleotide Solutions Products

应用:
DNA Sequencing,
PCR,
PCR

  • 试剂盒组成

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • N0460S     -20    
        AcycloATP N0461AVIAL -20 1 x 0.5 µmol Not Applicable
        AcycloCTP N0462AVIAL -20 1 x 0.5 µmol Not Applicable
        AcycloGTP N0463AVIAL -20 1 x 0.5 µmol Not Applicable
        AcycloTTP N0464AVIAL -20 1 x 0.5 µmol Not Applicable

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    • Therminator™ DNA 聚合酶

  • 注意事项

    1. Thermo Sequenase™ 是 GE Healthcare 的商标。
    2. 添加 50 μl 的蒸馏水或去离子水（Milli-Q™）可得到终浓度 10 mM 的 acyNTP。复溶后的 acyNTP 溶液应贮存于 -20℃ 条件下。

  • 参考文献

    1. Sanger, F., Nicklen, S. and Coulson, A.R. (1977). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 74, 5463-5467.
    2. Trainor, G.L. (1996). U.S. Patent No. 5,558,991.
    3. Haff, L.A. and Simirnov, I.P. (1997). Genome Methods. 7, 378-388.
    4. Gardner, A.F. and Jack, W.E. (1999). Nucl. Acids Res.. 27, 2545-2553.
    5. Gardner, A.F. and Jack, W.E. (2002). Nucl. Acids Res.. 30(2), 605-613.

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Are substrates terminated with 3′ acyclonucleosides resistant to 3′-5′ exonuclease activity?
    2. Which DNA polymerases incorporate acyclonucleotides?
    3. Can acyclonucleotides be used in Sanger sequencing?
    4. Can acyclonucleotides be used for sequencing-by-synthesis?